一种解淀粉芽孢杆菌发酵液、可湿性粉剂和应用

本发明属于微生物，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌发酵液、可湿性粉剂和应用。

背景技术：

1、现代作物的增产对化肥的依赖性越来越强，化肥通过土壤在短时间内为作物提供生长发育所需的大量养分，但人们为了追求产量而忽视了化肥给环境带来的诸多问题，由于过度使用化肥，资源浪费严重，土壤性质发生改变，透气性差。人们一直在寻找能发挥化肥的增肥作用但对环境友好的替代品。生物菌肥中的有效成分含有大量有益微生物，通过微生物的生命活动分解难溶物质，有效降低了土壤板结的情况，从而最大限度地使土壤的潜在肥力发挥出来，改善了农作物的生长环境，为植物提供更多营养，从而使农产品的产量和品质都得到了提升。

2、因此，本发明旨在开发一种含有解淀粉芽孢杆菌的生物菌肥，使其利于形成产品进入市场。

技术实现思路

1、本发明的解淀粉芽孢杆菌zhr0发酵液，解淀粉芽孢杆菌zhr0的保藏号为cctccno:m 2014577，具有抑菌和促生双重功能，且抗逆性强易培养。另外，将解淀粉芽孢杆菌开发成生物菌肥或生物农药，有利于其形成产品进入市场流通。可湿性粉剂应用于田间既可采用灌根的方式，也可用于叶面喷施。因为菌剂产品中的有效成分为活菌，生产时既要满足粉剂的工艺要求，同时也要考虑制备粉剂所需的辅料对有效成分的活性是否有抑制作用，因此需针对目标菌选择合适的辅料。而本申请发明人通过实验研究获得了可湿性粉剂，其理化性质稳定、菌体存活率高、常温条件下货架期长。

2、本发明第一方面提供一种发酵液，采用解淀粉芽孢杆菌zhr0发酵制得，解淀粉芽孢杆菌zhr0的保藏号为cctcc no:m 2014577，所述菌剂中解淀粉芽孢杆菌zhr0的活菌量为(5～8)×108cfu/g。

3、本发明第二方面提供发酵液的制备方法，包括如下步骤：

4、1)将解淀粉芽孢杆菌zhr0转接于培养基中，接种浓度(3～5)×107cfu/ml，36.5～37.5℃振荡培养12～48h，制得种子液。可选地，接种浓度可以为3×107cfu/ml、4×107cfu/ml或5×107cfu/ml，或三者之间的值；可选地，振荡培养时间为12～24h或24～48h。

5、2)以培养基的重量为计，将种子液以25～35wt％的接种量接入装有培养基的发酵罐中发酵50～70h，得到发酵液。可选地，接种量为25～30wt％或30～35wt％；可选地，发酵时间为50～60h或60～70h。

6、本发明第三方面提供一种可湿性粉剂，包含第一方面所述的发酵液。

7、在一可行的实例中，所述可湿性粉剂还包括载体和助剂；其中，载体对发酵液的最大吸附量为3.0～4.5ml/g，载体和助剂的质量比为(1～3)：1。可选地，载体和助剂的质量比为(1～2)：1或(2～3)：1；可选地，最大吸附量为3.0～4.0ml/g或4.～4.5ml/g。

8、在一可行的实例中，可湿性粉剂的润湿时间为15～20s；可选地，时间为15～16s、16～18s或19～20s。

9、在一可行的实例中，可湿性粉剂的悬浮率为70～72％；可选地，悬浮率为70～71％或71～72％。

10、在一可行的实例中，可湿性粉剂中，解淀粉芽孢杆菌zhr0的活菌量为(5～8)×108cfu/g；可选地，可以为5×108cfu/g、6×108cfu/g、7×108cfu/g或8×108cfu/g，或三者之间的值。

11、在一可行的实例中，所述载体选自高岭土、硅藻土、壳聚糖或滑石粉中的至少一种；优选地，所述载体为硅藻土或高岭土。

12、在一可行的实例中，所述助剂选自三聚磷酸钠、木质素磺酸钠、sds、sdbs、peg或吐温80中的至少一种；优选地，所述助剂为三聚磷酸钠和sdbs；更优选地，所述三聚磷酸钠和sdbs的质量比为1：(10～40)；可选地，所述三聚磷酸钠和sdbs的质量比为1：(10～20)、1：(20～30)或1：(30～40)。

13、在一可行的实例中，高岭土:sdbs:三聚磷酸钠＝61.3:37.4:1.3。

14、本发明第四方面提供可湿性粉剂的制备方法，包括如下步骤：

15、1)向载体中加入发酵液，发酵液的用量为载体对发酵液的最大吸附量，最大吸附量为3.0～4.5ml/g；可选地，最大吸附量可以为3.0～4.0ml/g或4.0～4.5ml/g；

16、2)将吸附发酵液的载体在35～50℃下烘干得到原粉；可选地，温度可以为35～40℃、40～45℃或45～50℃；

17、3)按质量比要求，将原粉与助剂混合得到可湿性粉剂。

18、本发明第五方面提供第一方面的发酵液和第三方面所述的可湿性粉剂在土壤肥料中的应用。

19、在一些可行实例中，在下述任一项中的应用：

20、1)在柑橘根际土壤中作为生物肥料的应用；

21、2)在促进土壤中有机质增加中的应用；

22、3)在促进土壤中有效n元素和/或有效p元素和/或速效k元素增加中的应用；

23、4)在改良土壤ph中的应用。

24、本发明第六方面提供可湿性粉剂的施用方式，稀释50～200倍后环施于植物根部滴水线处，例如稀释50倍、100倍、150倍或200倍。

25、本发明提供的菌剂、发酵液和可湿性粉剂具有至少下述有益技术效果：

26、1)本发明的解淀粉芽孢杆菌zhr0发酵液，具有抑菌和促生双重功能，且抗逆性强易培养。

27、2)本发明的可湿性粉剂，其理化性质稳定、菌体存活率高、常温条件下货架期长。

28、3)本发明的可湿性粉剂应用于柑橘根际土壤中，促进土壤中有机质增加，促进土壤中有效n元素和/或有效p元素和/或速效k元素增加，还可以改良土壤ph。

29、保藏证明说明：

30、保藏机构：中国典型培养物保藏中心；

31、保藏编号：cctcc no:m 2014577；

32、保藏日期：2014年11月18日；

33、保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学；

34、分类学命名：解淀粉芽孢杆菌zhr0(bacillus amyloliquefaciens zhr0)。

技术特征：

1.一种发酵液，其特征在于，采用解淀粉芽孢杆菌zhr0发酵制得，解淀粉芽孢杆菌zhr0的保藏号为cctcc no:m 2014577。

2.如权利要求1所述的发酵液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.一种可湿性粉剂，其特征在于，包含如权利要求1所述的发酵液。

4.根据权利要求3所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述可湿性粉剂还包括载体和助剂；其中，载体对发酵液的最大吸附量为3.0～4.5ml/g，载体和助剂的质量比为(1～3)：1；

5.如权利要求4所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述载体选自高岭土、硅藻土、壳聚糖或滑石粉中的至少一种；优选地，所述载体为硅藻土或高岭土。

6.如权利要求4或5所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述助剂选自三聚磷酸钠、木质素磺酸钠、sds、sdbs、peg或吐温80中的至少一种；

7.如权利要求3～6任一项所述的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

8.如权利要求1所述的发酵液、或如权利要求3～6任一项所述的可湿性粉剂在土壤肥料中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，在下述任一项中的应用：

10.如权利要求3～6任一项所述的可湿性粉剂的施用方式，其特征在于，稀释50～200倍后环施于植物根部滴水线处。

技术总结本发明公开一种解淀粉芽孢杆菌发酵液、可湿性粉剂和应用。发酵液采用解淀粉芽孢杆菌ZHR0发酵制得，解淀粉芽孢杆菌ZHR0的保藏号为CCTCC NO:M 2014577，具有抑菌和促生双重功能，且抗逆性强易培养。可湿性粉剂，包含所述的发酵液，可应用于土壤肥料，其理化性质稳定、菌体存活率高、常温条件下货架期长，且可以促进土壤中有机质增加，促进土壤中有效N元素和/或有效P元素和/或速效K元素增加。技术研发人员：张木清,黄芳,蒋洪涛,暴怡雪受保护的技术使用者：广西大学技术研发日：技术公布日：2024/9/29