一种羊肚菌液体菌种温室栽培方法

本发明涉及羊肚菌种植，具体涉及一种羊肚菌液体菌种温室栽培方法。

背景技术：

1、高原独特的气候条件及生态系统蕴育着丰富的生物多样性，其中不乏野生羊肚菌资源。羊肚菌风味独特、肉质鲜美，富含多种营养物质及生物活性物质，具有极高的药食两用价值，深受世界人民喜爱。

2、羊肚菌在商业化生产已十余年，产业规模不断扩大并发展迅速，羊肚菌栽培面积不断扩大、产量不断提高，产业发展已初具规模。除少数栽培模式如工厂立体化栽培、林下仿生栽培等，羊肚菌人工栽培主要以设施温室栽培为主，且因高原地区独特的冷凉气候，能够实现一年两季栽培。

3、目前羊肚菌栽培技术中栽培种的制作以原种接种至固体培养菌袋为主，固体培养袋基质主要以小麦、木屑和玉米芯等为主，再辅以其它营养配料制成，培养菌袋制种成本高，且小麦消耗量大，羊肚菌栽培节粮技术攻关日趋紧迫。液体菌种具有培养周期短、播种方便、生产成本低等优点，但直接应用于生产却未见报道。

4、因此，提供一种羊肚菌液体菌种温室栽培方法成为亟待解决的问题。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种羊肚菌液体菌种温室栽培方法，具体包括以下步骤，

2、步骤一，配置培养基

3、将马铃薯、葡萄糖、琼脂和水按20g:2g:2g:100ml混合，温度121℃，压力103kpa灭菌20min，冷却后得pda培养基；优选的，制成平板培养皿；

4、将蛋白胨、酵母浸粉、mgso4·7h2o、kh2po4、k2hpo4、葡萄糖和蒸馏水按比例2g:1g:0.5g:0.5g:1g:20g:1l混合，温度121℃，压力103kpa灭菌20min，冷却后得cym液体培养基；或者将马铃薯、葡萄糖和水按200g:20g:1l混合，温度121℃，压力103kpa灭菌20min，冷却后得pdb培养基；

5、将小麦、油菜秸秆、腐殖土、玉米芯、石灰、按质量比50:30:10:9:1混合，喷水至60-65％，用12cm×24cm规格的聚丙烯菌袋装袋后温度12l℃，压力103kpa灭菌3h，得外源营养袋；优选的，在外源营养袋制备前3d将小麦在25℃水中浸泡16-20h、再与油菜秸秆和玉米芯拌匀喷水进行堆料发酵，发酵完成后再与其他物料混合。

6、步骤二，纯化菌种

7、将羊肚菌母种接种至pda培养基中，封口，暗环境20℃恒温培养5d，选取无污染的pda培养基，用打孔器打取1个直径9mm的菌饼，将菌饼接种至新的pda培养基中，封口，再次进行暗环境20℃恒温培养；

8、步骤三，制备菌种液

9、待菌丝长满pda培养基时，选取无污染的pda培养基，每个pda培养基用打孔器打20个菌饼，接种至cym液体培养基，封口，20℃、160rpm恒温振荡培养，待菌丝长满cym液体培养基时，得菌种液；

10、或者待菌丝长满pda培养基时，选取无污染的pda培养基，每个pda培养基用打孔器打20个菌饼，接种至pdb培养基，封口，20℃、160rpm恒温振荡培养，待菌丝长满pdb培养基时，得菌种液；

11、优选的，制备菌种液时，还可以将制备好的菌种液与液体培养基按体积比1:10混合，封口，20℃、160rpm恒温振荡培养，待菌丝长满液体培养基时，得新的菌种液。

12、步骤四，播种

13、播种时间：春季栽培，土壤温度≤15℃、空气温度≤20℃时进行。一般可在2月上旬至3月中旬播种。

14、秋季栽培，温室内气温＞0℃条件下进行。一般从10月中下旬至12月中旬均可播种。

15、播种前30d处理土壤，清洁整理温室内杂物，去除土壤中残留的农余废弃物及杂质，保持温室整洁干净，清理10-15d后，将温室外层棉毡用卷帘机升至棚顶，内层塑料膜密闭，采用阳光暴晒高温闷棚的方式，杀灭土壤表层杂菌害虫。然后在土壤中施生石灰50-100kg/亩，旋耕土壤表层20-30cm，浇水至土壤含水率22-28％，7-15d后土壤表面微润，此时翻耕土壤表层15-20cm并做畦，畦面宽0.8-1.2m，畦高10-15cm，畦间设30cm作业道；

16、温室内土壤ph 6.5-7.5时进行播种，将菌种液用水稀释5-10倍后均匀撒在畦面上，菌种液用量140-200l/亩，然后浇水至土壤含水率20-25％，播种7-10d，摆放外源营养袋；

17、与固体菌种栽培不同，液体菌种栽培很少或不出现“菌霜”。

18、优选的，播种后耙土2-3cm覆盖菌种；

19、优选的，外源营养袋用量为1500袋/亩，每袋间隔20-30cm交错摆放于畦面；最优选的，摆放前用消毒器具将袋子一侧划口2道或钉排打9-18个孔，划口或孔口朝下，扣放在畦面上，稍用力压实，使羊肚菌菌丝紧密接触外源营养袋。营养袋摆放后，空气与土壤温湿度控制与发菌期管理相同，若发现营养袋内有杂菌污染，迅速将外源营养袋撤离至棚外，避免杂菌扩散，加重病害。

20、步骤五，生长期管理

21、发菌期管理：空气温度≤20℃，空气相对湿度80-95％，土壤温度≤15℃，土壤含水率15-25％；

22、优选的，发菌期温棚多数时间闭帘管理，如果棚内气温和土壤温度偏高，可选择在早晚太阳升起前或落山后打帘通风降温，通风时间不宜过长，以免空气相对湿度骤降难以保湿。外界气温偏低时，可在正午时分打帘升温，注意打帘到遮阳网处即可，避免阳光直射大棚。温湿度适宜时，每隔2-3d选择适宜时段给大棚通风换气。

23、催菇期管理：空气湿度85-95％，土壤含水率25-30％；羊肚菌播种40-80d，且地温保持8-15℃时进行水分刺激，闭棚管理5-10d后可见原基；

24、优选的，所述水分刺激为喷灌浇水，浇水至土壤含水量为22-28％。

25、原基分化至幼菇期管理：气温4-18℃，空气相对湿度＞85％；

26、子实体生长期管理：1.5-3cm小菇形成后，气温10-18℃，空气相对湿度80-90％，土壤含水率20-25％；

27、子实体成熟阶段，空气相对湿度70-85％，降低土壤含水量至18-22％；

28、步骤六，子实体总长度为12-14cm，菌盖长度7-9cm时，即可采收。

29、本发明还包括病虫害防治，少施或不施用化学农药及灭杀试剂等。对于霉菌性病害，加强前期土壤灭菌处理，发现污染营养袋及时撤出大棚，并在污染袋附近撒施生石灰；对于霉菌污染子实体，要及时摘除；对于盘菌病害，减少温棚羊肚菌连作年限，栽培两年后，轮作其他农作物。在温室内要放置老鼠夹，粘鼠板及老鼠药等。在蛞蝓经常出没的地方撒施生石灰，如见蛞蝓大量活动痕迹，撒施四聚乙醛进行诱杀。菇蚊菇蝇等飞虫：可通过悬挂粘虫板和诱虫灯等诱杀捕杀。

30、本发明有以下优点：

31、(1)节省成本：目前羊肚菌栽培种以固体料袋菌种为主，其中小麦为栽培种的主成分原材料，一般菌种用量125-150kg/亩；液体菌种用种量140-200l/亩。固体麦粒菌种成本约3元/kg，加之其它辅料1元/kg，固体栽培种每亩用种成本为至少为500元以上；而液体菌种成本仅为1元/l，每亩用种成本最低仅为140元，较固体菌种成本减少70％以上，大大节约了生产成本，提高了经济效益。

32、(2)节约时间：羊肚菌固体栽培种培养一般需要20d以上，而液体菌种培养一般仅需7d，较固体菌种培养节省时间65％，大大缩短了制种时间，提高生产时效。