一种磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物及其制备方法

本发明涉及功能性多肽螯合亚铁离子，具体为磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物及其制备方法。

背景技术：

1、我国蚕业资源丰富，其中，每年柞蚕的产量也极高。柞蚕蛹蛋白质含量约占干重的55％，含有多种人体必需氨基酸，加工特性优良，具有很高的研究价值和开发潜力。铁元素是维持人体正常代谢的重要元素，铁元素的缺乏会导致多种疾病，如贫血、儿童发育迟缓、头晕乏力等，严重影响身体健康。目前市面上常见的补铁产品主要包括无机铁和有机铁，肽铁螯合物作为一种新兴的补铁产品，因其具有吸收率高、安全无副作用等优点，近年来逐渐被当成新型的理想补铁剂。

2、磷酸化改性可以增强蛋白质分子间的电负性，影响其疏水平衡，并通过影响蛋白质分子间的相互聚集使蛋白质在溶液中更加分散，从而使蛋白质的溶解度得到增强。由于磷酸基团掺入后界面吸附动力学得到改善，界面膜得到强化，磷酸化还被证明是改善蛋白质乳化性能的一种有效方法，磷酸化改性可赋予蛋白质理想的乳化特性，以稳定具有恶劣环境耐受性的乳液。同样，磷酸化还可以在一定程度上增强蛋白质的起泡性和起泡稳定性。

技术实现思路

1、本发明目的是制备一种具有良好的加工特性磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物，且具有良好的抗氧化性能和消化吸收特性。

2、本发明所述一种磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物及其制备方法，包括柞蚕蛹蛋白为原料，使用中性蛋白酶和复合蛋白酶对其进行双酶酶解后，然后进行磷酸化改性，最后通过螯合反应制备磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物，具体按照下列方案进行，具体步骤如下：

3、一种磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物，是将柞蚕蛹蛋白粉添加蛋白酶进行酶解，并进行磷酸化改性，然后通过螯合反应制备磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物。

4、上述的磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物的制备方法，步骤如下：

5、1)双酶酶解：取柞蚕蛹蛋白粉于烧杯中，超纯水溶解，加入中性蛋白酶和复合蛋白酶，搅拌进行双酶酶解，搅拌，反应完全后煮沸灭酶，在离心，然后取上清液，冷冻干燥，得到柞蚕蛹多肽粉；

6、2)磷酸化改性：取一定量的柞蚕蛹多肽粉，将其溶于的磷酸盐溶液中，混合后，进行超声、冷却、透析、冷冻干燥，得到磷酸化改性柞蚕蛹多肽粉。

7、3)螯合反应：取磷酸化改性柞蚕蛹多肽粉配置溶液，调ph为7，加入氯化亚铁和抗坏血酸，进行反应，离心取上清液，加入无水乙醇再次离心，取沉淀，重复操作直至上清液变透明，去除上清液，留取沉淀，进行冷冻干燥，最终得到磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物。

8、上述的制备方法，步骤1)中，中性蛋白酶：复合蛋白酶的体积比为1:1，中性蛋白酶的质量分数为1％，复合蛋白酶的质量分数为1％。

9、上述的制备方法，步骤1)中，所述搅拌是在55℃条件下搅拌8h。

10、上述的制备方法，步骤2)中，所述的磷酸盐溶液是三聚磷酸钠或磷酸氢二钠，磷酸盐溶液的质量分数是1％～3％，ph为7.0。

11、上述的制备方法，步骤2)中，混合时调节ph为8.0，超声是在45℃、超声波振幅40％、功率530w下，反应2h，透析是在温度4℃下进行24h透析操作。

12、上述的制备方法，步骤3)中，磷酸化改性柞蚕蛹多肽溶液的质量分数为1％。

13、上述的制备方法，步骤3)中，按质量比，磷酸化改性柞蚕蛹多肽粉：氯化亚铁为4：1上述的制备方法，步骤3)中，所述反应是在30℃下反应30min。

14、通过采用上述方案，本发明研究的对象与传统技术相比，其亮点在于：

15、(1)对于蛋白来源的选择，柞蚕蛹蛋白质含量约占干重的55％，含有多种人体必需氨基酸，具有很高的研究价值和开发潜力。

16、(2)铁元素作为人体中的重要营养元素，具有多种生理作用，目前市面上常见的补铁产品主要包括无机铁和有机铁，而肽铁螯合物作为一种新兴的补铁产品，具有吸收率高、安全无副作用等优点，逐渐被人们所熟知。

17、(3)本发明结合磷酸化对柞蚕蛹蛋白肽进行改性，得到的产品在加工特性方面得到提高，特别是持油力和乳化性，此外，磷酸化改性使氨基酸上的羟基被磷酸化，进一步增加多肽与金属离子的结合位点，使得多肽的亚铁结合能力得到了一定提高。

技术特征：

1.一种磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物，其特征在于，是将柞蚕蛹蛋白粉用蛋白酶进行酶解，并进行磷酸化改性，然后通过螯合反应制备磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物。

2.权利要求1所述的磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于，步骤如下：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，中性蛋白酶：复合蛋白酶的体积比为1:1，中性蛋白酶的质量分数为1％，复合蛋白酶的质量分数为1％。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述搅拌是在55℃条件下搅拌8h。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述的磷酸盐溶液是三聚磷酸钠或磷酸氢二钠，磷酸盐溶液的质量分数是1％～3％，ph为7.0。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，混合时调节ph为8.0，超声是在45℃、超声波振幅40％、功率530w下，反应2h，透析是在温度4℃下进行24h透析操作。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，磷酸化改性柞蚕蛹多肽溶液的质量分数为1％。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，按质量比，磷酸化改性柞蚕蛹多肽：氯化亚铁为4：1。

9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述反应是在30℃下反应30min。

技术总结本发明提供了一种磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物及其制备方法，涉及功能性多肽螯合亚铁离子技术领域。本发明所述的磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物是将柞蚕蛹蛋白粉用蛋白酶对其进行酶解，并进行磷酸化改性，然后通过螯合反应制备磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物。本发明结合磷酸化对柞蚕蛹蛋白肽进行改性，得到的产品在加工特性方面得到提高，特别是持油力和乳化性。此外，磷酸化改性使氨基酸上的羟基被磷酸化，进一步增加多肽与金属离子的结合位点，使得多肽的亚铁结合能力得到了一定提高。本发明所述的磷酸化改性柞蚕蛹多肽亚铁螯合物具有良好的加工特性和抗氧化活性，推动了在食品和保健品等领域的应用。技术研发人员：李玮轩,任一非,赵玉静,胡风庆,张韧恒,宁崇受保护的技术使用者：辽宁大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10