一种用于治疗急性毛细胞损伤的CAT/Dex-PTMC/HA多功能生物微球凝胶

本发明涉及生物微球凝胶，尤其涉及用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶。

背景技术：

1、毛细胞损伤是临床的棘手疾患。毛细胞损伤所致疾患包括耳鸣、突发性耳聋、爆震性聋等。目前的治疗手段最有效的手段主要有两种：激素治疗以及高压氧治疗。激素治疗包括全身用药及局部用药。全身用药所致的全身副作用大。局部鼓室注射激素药物(如地塞米松)需每日在鼓膜上打孔注射。高压氧治疗须每日均进入高压氧仓治疗。二者在不同的科室治疗(耳鼻喉科及高压氧科)，过程繁琐，耗费人力、物力，常常需要住院治疗，每日奔波于不同科室之间。局部用药因其局部浓度高、全身副作用小，效果较好而被推崇。

2、然而目前尚无能将激素治疗以及高压氧治疗复合在一次诊疗过程的治疗方式。开发一种一次鼓室注射即可为患耳长期缓释糖皮质激素及氧气的生物复方制剂，是毛细胞损伤相关疾患的迫切需求。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明提供用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，以解决传统的技术问题。

2、本发明采用如下技术方案实现：

3、一种用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，包括如下制备步骤：

4、分别取25-35mg a组分、35-50mg b组分、25-35mg c组分与50-100ml d组分混合后，吸入医用注射器，通过双母鲁尔直通医用接头将各组分充分均匀混合，即得，其中，a组分为(cat@caco3)微球，b组分为dex/cao2-ptmc(地塞米松/二氧化钙-聚三亚甲基碳酸酯)，c组分为dex-ha(地塞米松-透明质酸钠)，d组分为人工外淋巴液。

5、进一步地，所述a组分的制备步骤为：

6、(1)称量12.11g三羟甲基氨基甲烷(tris)置于100ml烧杯中，加入约40ml的去离子水，充分搅拌溶解，加入浓hcl，调节溶液ph值至7.35-7.45之间，再将溶液定容至100ml，得到tris-hcl缓冲液；

7、(2)称取过氧化氢酶(cat)400mg，溶于40ml tris-hcl缓冲液中，得到10mg/ml的游离cat酶液；

8、(3)称取16.52mg脲酶溶于2ml的tris-hcl缓冲液中，振荡至充分溶解，得到脲酶溶液；

9、(4)用tris-hcl缓冲液配制2ml底物溶液，其中，底物溶液含有质量比4.9：4的氯化钙和尿素，如0.392g氯化钙和0.32g尿素；

10、(5)取10μl游离cat酶液和170μl底物溶液，加入至320μl脲酶溶液中，再置于涡旋振荡器中，以3000r/min充分振荡2min，静置反应1.5h后，以2000r/min离心3min，沉淀即为a组分。

11、进一步地，在步骤(5)中，还包括以下后处理步骤：

12、将沉淀用去离子水洗涤3次，再次2000r/min离心2min，放置在4°冰箱保存。

13、进一步地，所述b组分的制备步骤为：

14、a、称取dex 30mg、ptmc 100mg，分别称取4个不同量的10mg-50mg cao2；

15、b、各量取10ml dcm(二氯甲烷溶剂)于4个样品瓶中，将dex 30mg、ptmc 100mg和各分量的cao2分别放入各个dcm样品瓶中(即每个dcm样品瓶中均含有dex、ptmc和cao2)，密封；然后，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解；接着，真空干燥72小时后，反复研磨直至可过300目过筛(孔径48微米)，4°冰箱保存，即得。

16、进一步地，在步骤b中，磁力搅拌器的搅拌转速为800rpm。

17、进一步地，所述c组分的制备步骤为：称取dex 30mg，透明质酸钠凝胶干粉30mg，二者混合，4°冰箱保存，即得。

18、进一步地，所述d组分的制备步骤为：称取0.0191g氯化钙、0.0171g氯化镁、0.0403g氯化钾、0.8006g氯化钠、0.0991g葡萄糖和0.1192g hepes(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)，在100ml的去离子水中溶解，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解，4°冰箱保存，即得。以上溶液在模拟内耳环境中配置所得的溶液。

19、进一步地，磁力搅拌器的搅拌转速为800rpm。

20、相比现有技术，本发明的有益效果在于：

21、1、本发明的多功能生物微球凝胶可同时释放氧气及激素，将氧气及激素的多频次、多地点、短效的诊疗行为整合为一次诊疗行为，使用方便，只需要鼓室注射一次即可完成治疗，可节省大量人力、物力。

22、2、本发明的多功能生物微球凝胶使用范围广泛，与毛细胞急性损伤相关的疾病均可以使用，如突发性耳聋、急性耳鸣、爆震性聋。

技术特征：

1.用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，包括如下制备步骤：

2.根据权利要求1所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，所述a组分的制备步骤为：

3.根据权利要求2所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，在步骤(5)中，还包括以下后处理步骤：

4.根据权利要求1所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，所述b组分的制备步骤为：

5.根据权利要求4所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，在步骤b中，磁力搅拌器的搅拌转速为800rpm。

6.根据权利要求1所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，所述c组分的制备步骤为：称取dex 30mg，透明质酸钠凝胶干粉30mg，二者混合，即得。

7.根据权利要求1所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，所述d组分的制备步骤为：称取0.0191g氯化钙、0.0171g氯化镁、0.0403g氯化钾、0.8006g氯化钠、0.0991g葡萄糖和0.1192ghepes，在100ml的去离子水中溶解，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解，即得。

8.根据权利要求7所述的用于治疗急性毛细胞损伤的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝胶，其特征在于，所述磁力搅拌器的搅拌转速为800rpm。

技术总结本发明公开了用于治疗急性毛细胞损伤的CAT/Dex‑PTMC/HA多功能生物微球凝胶，包括：分别取25‑35mgA组分、35‑50mg B组分、25‑35mg C组分与50‑100ml D组分混合后，吸入医用注射器，通过双母鲁尔直通医用接头将各组分充分均匀混合，其中，A组分为CAT@CaCO<subgt;3</subgt;微球，B组分为Dex/CaO<subgt;2</subgt;‑PTMC，C组分为Dex‑HA，D组分为人工外淋巴液。上述多功能生物微球凝胶可同时释放氧气及激素，将氧气及激素的多频次、多地点、短效的诊疗行为整合为一次诊疗行为，使用方便，只需要鼓室注射一次即可完成治疗，可节省大量人力、物力。技术研发人员：许木清,张宏征受保护的技术使用者：南方医科大学珠江医院技术研发日：技术公布日：2024/10/10