奥戈伏单抗和PARP抑制剂用于治疗卵巢癌的用途的制作方法

背景技术：

1、(a)技术领域

2、所公开的主题一般涉及通过给药包括单克隆抗体和parp抑制剂的联合免疫疗法来提高iii-iv期卵巢癌患者的生存可能性的方法，更具体地涉及单克隆抗体mab-b43.13(奥戈伏单抗(奥戈伏单抗))和parp抑制剂尼拉帕尼(niraparib)的组合物。

3、(b)相关现有技术

4、卵巢癌是卵巢的恶性肿瘤，是继宫颈癌之后第二大最常见的性生殖器官癌症。卵巢癌中最常见的类型是上皮性卵巢癌，发生在覆盖卵巢外层的上皮细胞中，约占所有卵巢癌的90％。由于没有特异性症状，超过60％的病例在诊断时已处于3期或更高阶段，并且大多数病例往往同时发生在两个卵巢中[matsuo,k等(2010)；hamanishi j.等(2015)]。现实情况是，由于目前的卵巢癌手术或标准细胞毒性化疗无法完全治愈癌症，因此复发的可能性很高。卵巢癌手术旨在无论疾病进展阶段如何，尽可能多地清除体内的癌细胞，但卵巢癌的癌细胞小且转移快，因此很难在手术中完全清除癌细胞。此外，目前使用的抗癌药物无法完全清除癌细胞。一些卵巢癌细胞具有抗癌药物耐药性。因此，即使经过化疗，一些肿瘤也不会消失，而是继续生长，因此许多患者会出现抗癌药物耐药性或复发。此外，为弥补细胞毒性抗癌药物的局限性而开发的靶向治疗在预防频繁复发方面也存在局限性，因为与标准抗癌治疗相比，它们只能将复发延迟4个月[burger ra等(2011)；perren tj等(2015)]。

5、奥戈伏单抗是一种具有κ轻链的鼠igg1单克隆抗体(mab)。它在血液循环过程中与癌抗原125(ca-125)的结合力小于纳米单位。奥戈伏单抗给药的治疗目的是其在抗原提呈细胞(尤其是树突状细胞)在ca-125抗原对淋巴细胞的识别中起重要作用(图1)。这种机制与其他抗癌疫苗的机制相似[berek j等(2009)]。ca-125是一种大型膜糖蛋白，称为粘蛋白16或muc16，由muc16基因编码。ca-125是已知的卵巢癌肿瘤相关抗原(taa)之一，在上皮癌细胞中表达良好。在超过80％的上皮卵巢癌患者的血液中，ca-125的检测频率很高，这种肿瘤相关抗原(ca-125)会随着癌症进展而增加。ca-125是一种经过验证的肿瘤标志物，可用于评估治疗反应以及预测疾病复发。使用奥戈伏单抗的基础研究已经产生了几项研究，这些研究描述了肿瘤特异性免疫的诱导作用。在具有ca-125表达肿瘤的重度复杂免疫缺陷小鼠模型中，奥戈伏单抗的给药抑制了腹水的产生并缩小了肿瘤大小，从而实现了长期生存。奥戈伏单抗最有效的生物学机制是通过允许树突状细胞表达ca-125抗原来激活t辅助细胞(th)1细胞或细胞毒性t淋巴细胞(ctl)，从而提高对ca-125过表达癌症的抗癌作用。超过90％的患者对奥戈伏单抗的免疫球蛋白恒定区产生了抗体反应，对奥戈伏单抗可变域部分也诱导了抗体反应。奥戈伏单抗的给药在血液和外周组织中形成免疫抗体复合物(ca-125-奥戈伏单抗复合物)。这种免疫抗体复合物的诱导会引发治疗性免疫反应[brewer,m.等(2020)]。

6、聚(adp-核糖)聚合酶(parp)，特别是parp 1和2，是锌指脱氧核糖核酸(dna)结合酶，在dna修复中起着至关重要的作用(fong等2009)。dna断裂形成后，parp会与断裂的dna链末端结合，这一过程会激活其酶活性。

7、将活化的parp催化腺苷二磷酸(adp)-核糖的长聚合物添加到parp和与染色质相关的其他几种蛋白质上，包括组蛋白和各种dna修复蛋白(de lorenzo等2013，jones等2015)。这会导致染色质松弛、dna修复蛋白的快速募集和dna断裂的有效修复。通过这种方式，parp在感知dna损伤并将其转化为激活碱基切除修复(ber)和单链断裂修复途径的细胞内信号方面发挥着关键作用。

8、正常细胞每天修复多达10,000个dna缺陷，单链断裂是最常见的dna损伤形式。无法修复这种dna损伤负担的细胞，例如同源重组或ber途径存在缺陷的细胞，有积累多个病变的风险，最终会引发细胞凋亡。它们进入细胞周期的s期(dna复制)，单链和双链断裂未修复。复制机制通过时，预先存在的单链断裂会转化为双链断裂。s期存在的累积的双链断裂通过同源重组进行修复。同源重组是首选修复途径，因为它的错误率比其他形式的修复低得多。

9、无法通过同源重组进行dna修复的细胞(例如，由于同源重组所需基因的失活，如乳腺癌[brca1]或乳腺癌2[brca2]突变细胞)面临累积多个病变的风险，这些病变最终将引发细胞凋亡。这些细胞在s期积累停滞的复制叉，更有可能使用容易出错的非同源末端连接(nhej)或替代(alt)-nhej途径来修复dna中的双链断裂。nhej在dna中积累错误会导致突变负担，从而促进癌症的发展。随着时间的推移，过多的dna错误的积累加上由于复制叉停滞而无法完成s期，导致细胞死亡(de lorenzo等2013，jones等2015)。这样，使用parp抑制剂治疗代表了选择性杀死癌细胞的新机会。例如，brca突变(brcam)患者体内出现的肿瘤具有缺陷的同源重组dna修复途径，并且越来越依赖nhej、alt-nhej和ber来维持基因组完整性。parp抑制剂阻断alt-nhej和ber，迫使brca缺陷的肿瘤使用容易出错的nhej来修复双链断裂(fong等，2013)。同源重组dna修复基因中的非brca缺陷也可能增强肿瘤细胞对parp抑制剂的敏感性(gelmon等，2011)。非brcam肿瘤亚群中抗癌活性的原理是它们与brcam携带者具有独特的dna修复缺陷，这种现象被广泛描述为“brcaness”(turner等，2004)。dna修复缺陷可能是由同源重组dna修复途径的生殖系或体细胞改变引起的。在最近对约500例高级别浆液性卵巢腺癌肿瘤的分析中，约50％含有hrd(cga2011)。这些肿瘤中有一部分具有生物学上合理的分子改变，可能使它们对尼拉帕尼的parp抑制敏感。对三阴性乳腺癌的类似分析表明，这些受试者中有43％至44％患有hrd肿瘤(timms等，2014)。同源重组是一种复杂的途径，除brca1和brca2之外，还需要几种基因通过同源重组途径感知或修复dna双链断裂。因此，parp抑制剂还对缺乏除brca1和brca2以外的dna修复蛋白的癌细胞具有选择性细胞毒性(turner等，2011)。最近的临床研究表明，parp抑制剂对乳腺癌和卵巢癌以及可能地其他类型的肿瘤均有效(pilié等，2019)。parp抑制剂的临床抗癌活性在brcam受试者和非brcam受试者中均有发现；然而，在具有种系突变的受试者中活性更稳健(kummar等，2012)。

10、总之，使用parp1/2抑制剂治疗代表着一种机会，通过利用其dna修复中的缺陷来选择性地杀死一组癌细胞类型。由于dna修复存在潜在缺陷，人类癌症表现出基因组不稳定性，突变率增加。这些缺陷使得癌细胞更加依赖剩余的dna修复途径，而靶向这些途径预计对肿瘤细胞的存活率的影响远大于对正常细胞的影响。

11、尼拉帕尼是一种强效的口服活性parp1和parp2抑制剂，正在开发作为用于在同源重组dna修复途径中存在缺陷或由parp介导的转录因子驱动的肿瘤受试者的治疗和维持疗法，并且正在对hrd阴性和非brca突变癌症受试者进行评估。

12、因此，存在给药可以选择性识别卵巢癌的奥戈伏单抗和parp抑制剂疗法的需要。

技术实现思路

1、根据一实施方式，提供了一种用于提高iii-iv期卵巢癌患者的生存可能性的方法，该方法至少包括步骤(a)和(b)：

2、(a)每天向iii-iv期卵巢癌患者给药治疗有效剂量的尼拉帕尼，持续至少12周；

3、(b)在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周期间向患者给药治疗有效剂量的单克隆抗体mab-b43.13，

4、其中首先执行步骤(a)，然后执行步骤(b)，从而与已经被诊断为iii-iv期卵巢癌并且已经接受护理化疗治疗标准的对照患者相比，增加患者的生存可能性。

5、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以为约200至约300mg，或为200mg或为300mg。

6、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以经口服给药。

7、单克隆抗体mab-b43.13的治疗有效剂量可以在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周的第1天给药。

8、治疗期可以是24周。

9、可以给药2mg的mab-b43.13。

10、mab-b43.13可以50ml的体积通过20分钟输注给药。

11、根据另一实施方式，提供了一种用于抑制患者的iii-iv期卵巢癌肿瘤生长的治疗剂，该治疗剂包括mab-b43.13(奥戈伏单抗)和parp抑制剂；

12、其中所述parp抑制剂是尼拉帕尼；

13、其中所述治疗剂按照以下方案使用：

14、(a)iii-iv期卵巢癌患者每天使用治疗有效剂量的尼拉帕尼，持续至少12周；

15、(b)患者在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周期间使用治疗有效剂量的单克隆抗体mab-b43.13，

16、其中步骤(a)为第一步，步骤(b)为第二步，从而与已经被诊断为iii-iv期卵巢癌并且已经接受护理化疗治疗标准的对照患者相比，增加患者的生存可能性。

17、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以是约200至约300mg，或者是200mg或300mg。

18、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以是口服使用。

19、单克隆抗体mab-b43.13的治疗有效剂量可以在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周的第1天使用。

20、使用期可以是24周。

21、可以使用2mg的mab-b43.13。

22、mab-b43.13可以50ml的体积通过20分钟输注使用。

23、根据另一实施方式，提供了一种治疗剂在抑制患者的iii-iv期卵巢癌肿瘤生长中的用途，该治疗剂包括mab-b43.13(奥戈伏单抗)和parp抑制剂；

24、其中所述parp抑制剂是尼拉帕尼；

25、其中所述治疗剂按照以下方案使用：

26、(a)iii-iv期卵巢癌患者每天使用治疗有效剂量的尼拉帕尼，持续至少12周；

27、(b)患者在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周期间使用治疗有效剂量的单克隆抗体mab-b43.13，

28、其中步骤(a)为第一步，步骤(b)为第二步，从而与已经被诊断为iii-iv期卵巢癌并且已经接受护理化疗治疗标准的对照患者相比，增加患者的生存可能性。

29、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以是约200至约300mg，或者是200mg或者是300mg。

30、尼拉帕尼的治疗有效剂量可以是口服使用。

31、单克隆抗体mab-b43.13的治疗有效剂量可以在治疗期的第1周、第4周、第7周、第12周和第20周的第1天使用。

32、使用期可以是24周。

33、可以使用2mg的mab-b43.13。

34、可以50ml的体积通过20分钟输注使用mab-b43.13。

35、以下术语定义如下。

36、术语“给药(administration)”和/或“给药(administering)”旨在表示向需要治疗的受试者提供根据本发明的抗体、化疗和/或它们的组合。

37、术语“组合物”旨在表示包含指定量的特定成分的产品，以及直接或间接地由指定量的特定成分组合而产生的任何产品。与药物组合物相关的该术语旨在包含活性成分和组成药学上可接受的载体的惰性成分的产品，以及直接或间接地由任何两种或更多种成分的组合、络合或聚集，或由一种或多种成分的解离，或由一种或多种成分的其他类型的反应或相互作用而产生的任何产品。因此，本发明的药物组合物包括通过将本发明的抗体与药学上可接受的载体混合而制成的任何组合物。“药学上可接受的”是指载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其他成分相容并且对其接受者无害。

38、术语“化疗方案”旨在表示几种化疗剂的组合。这种化疗方案背后的原理是，不同的化疗药物通过不同的细胞毒性机制发挥作用，使用多种药物的结果在某种程度上会有协同作用。由于它们具有不同的剂量限制性不良作用，因此可以在化疗方案中以全剂量一起给药。化疗方案可以包括诱导和维持方案。

39、术语“诱导方案”旨在表示用于疾病初始治疗的化疗方案。

40、术语“维持方案”旨在表示持续使用化疗来降低癌症复发的机会或防止现有癌症继续生长。

41、在一些实施方式中，术语“药学上可接受的”是指由联邦或州政府的监管机构批准或在美国药典或其他普遍认可的药典中列出的用于动物，尤其是人类。术语“载体”是指与治疗剂一起给药的稀释剂、佐剂、赋形剂或溶媒。此类药物载体可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当药物组合物通过静脉内给药时，水是优选的载体。盐溶液及水性葡萄糖和甘油溶液也可用作液体载体，特别是用于注射溶液。合适的药用赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱脂奶、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，组合物还可以含有少量润湿剂或乳化剂，或ph缓冲剂。这些组合物可以采用溶液、悬浮液、乳剂、片剂、丸剂、胶囊、粉末、缓释制剂等形式。该组合物可以使用传统粘合剂和载体，例如甘油三酯配制成栓剂。口服制剂可以包括标准载体，例如药用级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。合适的药用载体的实例在e.w.martin的《雷明顿药学》(remington's pharmaceutical sciences)中有所描述。此类组合物将包含治疗有效量的抗体或其片段(优选纯化形式)，以及适量的载体，以便提供用于向患者适当给药的形式。制剂应适合给药方式。

42、本文在本发明上下文中使用的术语“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibition)”或“抑制(inhibiting)”是指减缓、阻碍、抑制、减少或防止。例如，本文使用的术语“抑制肿瘤细胞的生长”是指减缓、阻碍、抑制、减少或防止肿瘤细胞生长。

43、本文所用的术语“给药”是指导致暴露或接触含有本发明的治疗性单克隆抗体的组合物与所公开的化疗方案组合的任何行为。本文所用的给药可在体内、体外或离体进行。具体地，给药于卵巢癌患者，例如iii-iv期卵巢癌患者，更具体地说，是铂敏感的brca野生型iii-iv期卵巢癌患者。例如，可以通过注射或通过内窥镜给药组合物。给药还包括将本发明的组合物直接应用于细胞。例如，在手术过程中，肿瘤细胞可能会暴露。根据本发明的一实施方式，这些暴露的细胞(或肿瘤)可直接暴露于本发明的组合物，例如通过清洗或冲洗手术部位和/或细胞，或通过直接肿瘤内注射对肿瘤相关抗原特异性的治疗性单克隆抗体与至少一种免疫刺激化合物和至少一种免疫稳态检查点抑制剂单独或混合使用。

44、本文使用的术语“受试者”是人类患者或其他动物，例如具有功能性肥大细胞、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和朗格汉斯细胞的另一种哺乳动物。在人类中，适当的细胞表达对本发明的给药的igg抗体的igg，以及对本发明的给药的ige抗体的ige(fcεri)的高亲和力受体。具体而言，受试者可以是卵巢癌患者，例如iii-iv期卵巢癌患者，更具体地说，是铂敏感的brca野生型iii-iv期卵巢癌患者。

45、如本文所用，癌症肿瘤或转移细胞或肿瘤的生长动力学降低或完全消除定义为本领域所理解的意思。例如，生长动力学降低是指原发性实体肿瘤、转移细胞或转移肿瘤的指数增长、比生长率或倍增时间相对于给定肿瘤类型在体内或体外通常观察到的指数增长、比生长率或倍增时间的减少。完全消除肿瘤是指在存在对肿瘤相关抗原特异性的治疗性单克隆抗体与至少一种免疫刺激化合物和至少一种免疫稳态检查点抑制剂的情况下，通过症状、身体检查或放射影像学检查发现肿瘤不存在，其中通过这些检测方法之前曾发现肿瘤存在。

46、术语“足以进行治疗的时间”旨在表示适合用免疫佐剂进行治疗的任何时间段。在实施方式中，该时间段可以是用于护理免疫佐剂(例如化疗)的标准中使用的周期的时间。护理治疗标准的实例可以在例如妇科肿瘤组化疗程序手册(gynecologic oncology groupchemotherapy procedures manual)中找到，该手册通过引用并入本文。化疗治疗的长短由多种因素决定。这些因素包括癌症类型、癌症程度、所给予的药物类型以及药物的预期毒性和从这些毒性中恢复所需的时间。许多化疗治疗方案(通常称为护理标准(soc)，包括化疗治疗的类型和长短)都是通过临床试验确定的，这些临床试验对它们进行比较，并确定哪种方案最有益且耐受性最好。一般来说，周期性给予化疗。这可以让癌细胞在最脆弱的时候受到攻击，并让身体的正常细胞有时间从损伤中恢复过来。关于周期时间，实际上有三个问题：周期持续时间、周期频率和周期数。周期持续时间：化疗治疗可以是单一药物或药物组合。药物可以在一天、连续几天或连续作为门诊或住院患者给药。具体取决于具体方案，治疗可能持续几分钟、几小时或几天。周期频率：化疗可以每周、每两周或每月重复一次。通常，周期以每月为间隔来定义。例如，两个每两周一次的化疗疗程可归类为一个周期。周期数：在大多数情况下，周期数(或从开始到结束的化疗时长)已由研究和临床试验确定。当治愈是治疗目标时。辅助化疗(手术切除所有可见癌症后的治疗)可能持续4-6个月。辅助化疗在乳腺癌和结肠癌中很常见。在睾丸癌、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤以及白血病中，化疗治疗时长可能长达一年。当有可见疾病时，化疗治疗时长将取决于疾病对治疗的反应。如果疾病完全消失，化疗可能会在此观察期之后继续进行1-2个周期，以最大限度地提高攻击所有微观疾病的机会。如果疾病缩小但没有消失，只要可以耐受并且疾病没有生长，化疗将继续进行。如果疾病生长，化疗将停止。由于患者会出现毒性反应和血细胞计数，因此根据每位患者情况的需要，有时会推迟治疗周期的实际时间。根据患者的健康状况和意愿，可以给予不同的药物来尝试杀死癌症，或者停止化疗，并将目标改为关注患者的舒适度。

47、术语“parp抑制剂”是指酶聚adp核糖聚合酶(parp)的药理学抑制剂组。已获准上市的parp抑制剂包括奥拉帕尼(olaparib)、卢卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼和他拉唑帕尼(talazoparib)。正在试验的parp抑制剂包括他拉唑帕尼、维利帕尼(veliparib)、帕米帕尼(pamiparib)、卢卡帕尼和维利帕尼。

48、术语“护理化疗治疗标准”旨在表示iii-iv期卵巢癌患者接受的化疗治疗的类型和长度，作为目前接受的标准治疗，其涉及例如几个周期的紫杉醇和卡铂治疗，并且不涉及免疫疗法。

49、在详细描述本发明之前，将定义一些术语。如本文所用，单数形式“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“这个(the)”包括复数指代，除非上下文另有明确规定。

50、需要注意的是，本文使用“优选”、“通常”和“典型”等术语并不是为了限制所要求保护的发明的范围或暗示某些特征对于所要求保护的发明的结构或功能是关键的、必要的甚至重要的。相反，这些术语仅旨在强调在本发明的特定实施方式中可以或不可以使用的替代或附加特征。

51、为了描述和定义本发明，需要注意的是，本文使用术语“基本上”来表示可归因于任何定量比较、值、测量或其他表示的固有不确定性程度。本文还使用术语“基本上”来表示定量表示可以与所述参考值不同的程度，而不会导致所讨论主题的基本功能发生变化。

52、根据以下所选实施方式的详细描述，本文主题的特征和优势将变得更加明显，如附图所示。正如将认识到的，所公开和要求保护的主题能够在各个方面进行修改，所有这些都不会偏离权利要求的范围。因此，附图和描述应被视为说明性的，而不是限制性的，并且主题的全部范围在权利要求中阐明。