一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白

本发明涉及生物，尤其是涉及一种结合ny-eso-1抗原的蛋白和应用。

背景技术：

1、纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)是一种癌-睾丸抗原1b，由位于x染色体xq28区域的ctgag1b基因编码。ny-eso-1其限制性表达于生殖细胞，胎盘细胞和肿瘤细胞。

2、ny-eso-1在多种肿瘤类型中表达，包括神经母细胞瘤、骨髓瘤、黑色素瘤、滑膜肉瘤、膀胱癌、食管癌、肝细胞癌、头颈部癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌。在这些肿瘤类型中，ny-eso-1的表达频率有很大差异，最常见的表达肿瘤为神经母细胞瘤(82％)、滑膜肉瘤(80％)、黑色素瘤(46％)和卵巢癌(43％)。其他类型的肿瘤中ny-eso-1蛋白的表达在20-40％之间。因此ny-eso-1是一个重要的免疫治疗靶点。

3、ny-eso-1属于癌-睾丸抗原家族，是家族成员中免疫原性最强的肿瘤相关抗原之一。ny-eso-1在健康成人组织中的限制性表达，由治疗引起的脱靶毒性风险比较低，ny-eso-1已成为肿瘤免疫治疗的最有前途的靶点之一。针对此靶点，通过对识别结合此靶标蛋白的结合蛋白进行改造，可以达到治疗肿瘤的目的。目前的双抗蛋白药(kimmtrak)产品，也是将识别结合该靶标蛋白的结合蛋白与t细胞表面cd3受体的抗体连接。

4、但目前，双抗蛋白药种类少，因此，亟需更多的结合ny-eso-1抗原的蛋白用于制备双抗蛋白药。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种结合ny-eso-1抗原的蛋白。

2、本发明的第二个目的是提供编码上述蛋白的核苷酸序列。

3、本发明的第三个目的是提供一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的制备方法。

4、本发明的第四个目的是提供上述蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

5、本发明的技术方案概述如下：

6、一种结合ny-eso-1抗原的蛋白，所述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

7、编码上述蛋白的核苷酸序列。

8、一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的制备方法，包括如下步骤：

9、1)将一种结合ny-eso-1抗原的前体蛋白的氨基酸序列进行大肠杆菌宿主密码子优化，得到编码所述前体蛋白的核苷酸序列，将编码所述前体蛋白的核苷酸序列构建到pet21b质粒上，得到质粒1；

10、所述一种结合ny-eso-1抗原的前体蛋白的氨基酸序列如seq id no.8所示；所述编码所述前体蛋白的核苷酸序列如seq id no.9所示；

11、2)将质粒1转化到表达菌e.coli bl21(de3)中，在含有抗生素的lb平板上培养；

12、3)挑取单菌落进行诱导培养；

13、4)纯化，收集蛋白，加入凝血酶透析过夜酶切；

14、5)进一步纯化，得到一种结合ny-eso-1抗原的蛋白。

15、上述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

16、本发明具有如下有益效果：

17、实验证明，本发明的结合ny-eso-1抗原的蛋白可以高亲和力识别结合ny-eso-1抗原，kd＝6.65μm。

技术特征：

1.一种结合ny-eso-1抗原的蛋白，其特征在于所述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述蛋白的核苷酸序列。

3.权利要求1的一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的制备方法，其特征是包括如下步骤：

4.权利要求1的一种结合ny-eso-1抗原的蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

技术总结本发明公开了一种结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白，其制备方法包括如下步骤：将一种结合NY‑ESO‑1抗原的前体蛋白的氨基酸序列进行大肠杆菌宿主密码子优化，将所述前体蛋白的核苷酸序列构建到pET21b质粒上，得到质粒1；将质粒1转化到大肠杆菌；诱导培养；纯化，收集蛋白，加入凝血酶透析过夜酶切；进一步纯化，得到一种结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白，实验证明，本发明的结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白可以高亲和力识别结合NY‑ESO‑1抗原K<subgt;D</subgt;＝6.65μM。技术研发人员：叶升,许家钰,关凤慧受保护的技术使用者：天津大学技术研发日：技术公布日：2024/12/23