负载有干细胞外泌体的海藻酸钠和明胶衍生物的复合物及其在治疗溃疡型结肠炎中的应用的制作方法

本发明涉及生物医药领域，具体而言，涉及负载有干细胞外泌体的海藻酸钠和明胶衍生物的复合物及其在治疗溃疡型结肠炎中的应用。

背景技术：

1、溃疡型结肠炎是一种慢性非特异性的炎症性疾病，其特征为反复发作与缓解交替的肠道黏膜炎症，病变多始于直肠并向近端结肠延伸，可累及全结肠甚至回肠末端，临床主要表现为腹泻、粘液脓血便、体重减轻、里急后重等。其中免疫应答与免疫耐受之间的平衡的破坏导致的免疫功能失衡认为是溃疡性结肠炎的重要因素。

2、越来越多的研究表明人类脐血间充质干细胞（human umbilical cordmesenchymal stem cell，hucmsc）移植治疗溃疡性结肠炎有效的方法，hucmsc不仅来源丰富，而且不受伦理限制，研究表明mscs可以通过调节巨噬细胞的极化来调节炎症，但是间充质干细胞移植体内仍然存在排斥反应及不良分化等风险，而其外泌体（human umbilicalcord mesenchymal stem cell derived exosomes, hucmsc-exo）可以避免这些风险。hucmsc-exo由hucmsc主动分泌的脂质双分子层结构囊泡，直径约为40~200 nm，包含多种功能性生物分子，可以通过胞吐作用与临近细胞间进行细胞通讯，发挥抗炎、抗氧化生物作用。

3、目前，hucmsc-exo对于治疗溃疡型结肠炎的药效有限，如何进一步提高hucmsc-exo的药效是本领域待解决的问题之一。

4、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供负载有干细胞外泌体的海藻酸钠和明胶衍生物的复合物及其在治疗溃疡型结肠炎中的应用。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明实施例提供了一种负载有干细胞外泌体的水凝胶的制备方法，其包括：将明胶衍生物和海藻酸钠混合，获得混合溶液；将所述混合溶液与干细胞外泌体混合；

4、其中，所述明胶衍生物的结构式如下：

5、。

6、第二方面，本发明实施例提供了如前述实施例所述的制备方法制备获得的负载有干细胞外泌体的水凝胶在制备治疗或辅助治疗溃疡型结肠炎的产品中的应用。

7、第三方面，本发明实施例提供了组合物在制备治疗或辅助治疗溃疡型结肠炎的产品中的应用，所述组合物包括：用于实施前述实施例所述的制备方法的试剂。

8、第四方面，本发明实施例提供了一种负载有干细胞外泌体的水凝胶，其由前述实施例所述的制备方法制备获得。

9、本发明具有以下有益效果：

10、本申请采用的明胶衍生物，在明胶分子中引入了醛基和咪康唑，具有良好的表面活性，能够与细胞、活性因子很好的相容，相对于现有的其他明胶水凝胶而言，本发明的明胶衍生物携带更多的正电荷，与具有阴离子的海藻酸钠容易形成稳定的复合物，采用该复合物对干细胞外泌体进行包被，既起到对干细胞外泌体的保护作用，既可以防治胃酸对外泌体的破坏，又可以在肠道中溶解，从而释放出外泌体，从而极大的提高了干细胞外泌体对于溃疡型结肠炎的治疗效果。

技术特征：

1.一种负载有干细胞外泌体的水凝胶的制备方法，其特征在于，其包括：将明胶衍生物和海藻酸钠混合，获得混合溶液；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述混合的条件包括：40~60℃，10~60min；

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述咪康唑衍生物的制备包括：

4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，在将明胶衍生物和海藻酸钠于40~60℃混合10~60min后，所述制备方法还包括将混合后的溶液于5~35℃静置10~60min，以获得最终的所述混合溶液。

5.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述混合溶液与所述干细胞外泌体的混合量为：每1ml所述混合溶液，混合200~600μg所述干细胞外泌体。

6.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：将所述混合溶液与干细胞外泌体混合后的产物喷射至氯化钙溶液中，获得负载有干细胞外泌体的水凝胶微球。

7.如权利要求1~6任一项所述的制备方法制备获得的负载有干细胞外泌体的水凝胶在制备治疗或辅助治疗溃疡型结肠炎的产品中的应用。

8.组合物在制备治疗或辅助治疗溃疡型结肠炎的产品中的应用，其特征在于，所述组合物包括：用于实施权利要求1~6任一项所述的制备方法的试剂。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述组合物包括：明胶衍生物或制备所述明胶衍生物的原料、干细胞外泌体和海藻酸钠。

10.一种负载有干细胞外泌体的水凝胶，其特征在于，其由权利要求1~6任一项所述的制备方法制备获得。

技术总结本发明公开了负载有干细胞外泌体的海藻酸钠和明胶衍生物的复合物及其在治疗溃疡型结肠炎中的应用。本申请采用的明胶衍生物，在明胶分子中引入了醛基和咪康唑，具有良好的表面活性，能够与细胞、活性因子很好的相容，相对于现有的其他明胶水凝胶而言，本发明的明胶衍生物携带更多的正电荷，与具有阴离子的海藻酸钠容易形成稳定的复合物，采用该复合物对干细胞外泌体进行包被，既起到对干细胞外泌体的保护作用，既可以防治胃酸对外泌体的破坏，又可以在肠道中溶解，从而释放出外泌体，从而极大的提高了干细胞外泌体对于溃疡型结肠炎的治疗效果。技术研发人员：颜浩为受保护的技术使用者：吉林省汇融生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/13