红色诺卡氏菌细胞壁骨架在提高脂肪移植物存活率中的用途的制作方法

本发明涉及脂肪移植的。具体地，本发明涉及源自红色诺卡氏菌的细胞壁骨架在提高脂肪移植物存活率中的用途。

背景技术：

1、自体脂肪移植来源丰富，移植操作简单、价格相对低廉，是一种理想的填充剂，在整形外科中应用广泛。相关研究表明移植的脂肪组织，对缺血缺氧不耐受，在受体区域易吸收，脂肪组织具有特殊的组织结构和血供系统，移植后因血供不足而导致成活率低下，是一直备受关注的问题。成熟脂肪组织中仅有10％单房脂肪细胞如“葡萄串”样排列于血管支架上，却占据了90％的空间体积，其耗能高，血供要求高，而移植早期脂肪组织仅靠浸润和渗透维持营养供应。因此，移植后所处微环境的血管化程度与移植脂肪成活率息息相关。

2、2014年日本的kato等(plastic and reconstructive surgery.2014；113:303-313)通过实验证实了脂肪移植后的动态重塑，大多数脂肪细胞在移植后第一周死亡，通过免疫组织化学检测周脂蛋白计数小新脂肪细胞，发现它们在移植后至第4周达到高峰。证实了再生区域的大多脂肪是由脂肪干细胞活化形成。

3、在脂肪移植过程中，如何能够提高脂肪移植成活率，是一个需要解决的问题。

4、红色诺卡氏菌(nocardia rubra)是一种放线菌，该生物拥有非常强的细胞毒活性以及机体免疫增强作用，红色诺卡氏菌细胞壁骨架(n-cws)是从革兰氏阳性菌红色诺卡氏菌提取获得的细胞壁骨架，该骨架的部分由诺卡氏菌酸、阿拉伯半乳聚糖和粘肽组成。

5、红色诺卡氏菌细胞壁骨架已用于治疗宫颈糜烂、宫颈癌前病变(cn101073583a)、抗人乳头瘤病毒(cn1935262a)、皮肤损伤或皮肤溃疡(cn101209267a)、真菌感染、单纯疱疹、带状疱疹(cn1879661a)。已经证实了红色诺卡氏细胞壁骨架拥有降低炎症反应、促进皮肤组织再生的优势。

技术实现思路

1、本发明人惊奇地发现，红色诺卡氏菌细胞壁骨架可以通过促进血管生成、提高脂肪干细胞的活性及增殖，来提高移植后脂肪的存活率。

2、基于上述意想不到的发现，在第一方面，本发明提供了红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备用于提高脂肪移植物存活率的药物中的用途。

3、根据本发明第一方面的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过促进血管生成、提高脂肪干细胞的活性及增殖，来提高脂肪移植物存活率。

4、根据本发明第一方面的用途，其中所述脂肪移植物包括脂肪组织、脂肪细胞和/或脂肪源干细胞。

5、根据本发明第一方面的用途，其中所述脂肪移植物选自自体脂肪移植物和非自体脂肪移植物，优选地，所述非自体脂肪移植物为同种异体脂肪移植物或异种脂肪移植物，所述非自体脂肪移植来自哺乳动物。

6、根据本发明第一方面的用途，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架在脂肪移植物之后、或与脂肪移植物同时施用于移植部位，或者，在施用脂肪移植物前，使所述脂肪移植物与所述药物一起孵育。

7、在本发明的一个实施方案中，本发明的红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过以下步骤获得：

8、1)提供红色诺卡氏菌；

9、2)破碎所述红色诺卡氏菌，得到破碎产物；

10、3.1)对所述破碎产物去除脂质；

11、3.2)对所述破碎产物去除核酸；

12、3.3)对所述破碎产物去除蛋白质；

13、3.4)对所述破碎产物去除细胞膜；

14、3.5)得到红色诺卡氏菌细胞壁骨架；

15、4)任选地，分装；

16、5)任选地，对所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架进行冷冻干燥；

17、其中，

18、步骤3.1)、3.2)、3.3)、3.4)能够互换或并行，

19、步骤4)和步骤5)能够互换；

20、所述破碎的平均粒度为10nm至1000nm，优选10nm至800nm，更优选10nm至500nm。

21、在本发明的一个实施方案中，本发明的红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字s20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。

22、在第二方面，本发明提供了一种体外增强脂肪来源干细胞的成脂能力的方法，所述方法包括将脂肪来源干细胞与红色诺卡氏菌细胞壁骨架一起培养的步骤。

23、在本发明第二方面的方法中，将脂肪来源干细胞与红色诺卡氏菌细胞壁骨架在成脂诱导完全培养基中一起培养，优选地，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架的终浓度为0.3-30μg/ml；优选地，为3-30μg/ml。

24、在第三方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含脂肪移植物和红色诺卡氏菌细胞壁骨架，优选地，所述脂肪移植物可以是脂肪组织、脂肪细胞或脂肪源干细胞。

25、根据本发明第三方面所述的药物组合物，其进一步包含药学上可接受的载体或赋形剂。

26、根据本发明第三方面所述的药物组合物，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架的剂量为约每注入每1,000,000个脂肪细胞0.3-30μg/ml；优选地，为3-30μg/ml。

27、根据本发明的第四方面，提供了一种提高对其有需要的受试者中脂肪细胞存活率的方法，所述方法包括：

28、(a)将脂肪细胞、脂肪组织或脂肪源干细胞植入所述受试者；和

29、(b)给予所述受试者红色诺卡氏菌细胞壁骨架，从而提高所述受试者中的脂肪细胞存活率；或者

30、本发明提供了一种提高对其有需要的受试者中脂肪细胞存活率的方法，所述方法包括：

31、(a)将脂肪细胞、脂肪组织或脂肪源干细胞与红色诺卡氏菌细胞壁骨架一起孵育；和

32、(b)将所述脂肪细胞、脂肪组织或脂肪源干细胞植入所述受试者中，从而提高所述受试者中的脂肪细胞存活率。

技术特征：

1.红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备用于提高脂肪移植物存活率的药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过促进血管生成、提高脂肪干细胞的活性及增殖，来提高脂肪移植物存活率。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述脂肪移植物选自脂肪组织、脂肪细胞和脂肪源干细胞。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述脂肪移植物选自自体脂肪移植物和非自体脂肪移植物，优选地，所述非自体脂肪移植物为同种异体脂肪移植物或异种脂肪移植物，所述非自体脂肪移植来自哺乳动物。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架在施用所述脂肪移植物之后、或与脂肪移植物同时施用于移植部位；或者，在施用脂肪移植物前，使所述脂肪移植物与所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架一起孵育。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过以下步骤获得：

7.根据权利要求1所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字s20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。

8.一种体外增强脂肪来源干细胞的成脂能力的方法，所述方法包括将脂肪来源干细胞与红色诺卡氏菌细胞壁骨架一起培养的步骤，优选地，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字s20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。

9.根据权利要求8所述的方法，其中将脂肪来源干细胞与红色诺卡氏菌细胞壁骨架在成脂诱导完全培养基中一起培养，优选地，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架的终浓度为0.3-30μg/ml；优选地，为3-30μg/ml。

10.一种药物组合物，其包含脂肪移植物和红色诺卡氏菌细胞壁骨架，优选地，所述脂肪移植物选自脂肪组织、脂肪细胞或脂肪源干细胞，优选地，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字s20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。

11.根据权利要求10所述的药物组合物，其进一步包含药学上可接受的载体或赋形剂。

12.根据权利要求10所述的药物组合物，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架的剂量为约每注入每1,000,000个脂肪细胞0.3-30μg/ml；优选地，为3-30μg/ml。

技术总结本发明涉及红色诺卡氏菌细胞壁骨架在提高脂肪移植物存活率中的用途。具体地，本发明涉及红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备用于提高脂肪移植物存活率的药物中的用途。本发明还涉及一种体外增强脂肪来源干细胞的成脂能力的方法，以及包含脂肪移植物和红色诺卡氏菌细胞壁骨架的药物组合物。技术研发人员：金培生,盖波,张爱君,李强,张轶受保护的技术使用者：辽宁天安生物制药股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/11