抗菌肽KW20及其应用的制作方法

本发明属于生物医药，具体涉及抗菌肽kw20及其应用。

背景技术：

1、

2、抗菌肽是生物在长期进化过程中为顺应环境、寻求生存而产生的免疫活性分子，是自然免疫的重要介质，在宿主对病原体入侵的免疫防御中起着极为重要的作用，被形象地称为“天然抗菌剂”。相比传统小分子抗生素，抗菌肽具有杀菌速度快、不易产生耐药性和具有多种抗感染机制等优点，在新型抗生素研发方面有着广阔的应用前景。

技术实现思路

1、本发明第一方面的目的，在于提供抗菌肽kw20或其盐。

2、本发明第二方面的目的，在于提供一种缀合物。

3、本发明第三方面的目的，在于提供一种融合蛋白。

4、本发明第四方面的目的，在于提供与本发明第一方面的抗菌肽kw20、本发明第二方面的缀合物、和/或本发明第三方面的融合蛋白相关的生物材料。

5、本发明第五方面的目的，在于提供一种组合物。

6、本发明第六方面的目的，在于提供本发明第一方面的抗菌肽或其盐、第二方面的缀合物、第三方面的融合蛋白、第四方面的生物材料、第五方面的组合物的应用。

7、本发明第七方面的目的，在于提供一种产品。

8、为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

9、本发明的第一个方面，提供抗菌肽kw20或其盐，所述抗菌肽kw20的氨基酸序列为：

10、a1)seq id no.1；或

11、a2)将seq id no.1经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且与seqid no.1具有相同功能的氨基酸序列；或

12、a3)与seq id no.1具有99％、98％、97％、96％、95％、94％、93％或92％的同源性且与seq id no.1具有相同功能的氨基酸序列。

13、本发明的第二个方面，提供一种缀合物，包含修饰部分和本发明第一个方面的抗菌肽kw20。

14、优选地，所述修饰部分位于所述抗菌肽kw20的n端和/或c端；进一步位于所述抗菌肽kw20的c端。

15、优选地，所述修饰部分包含化学修饰、靶向部分、荧光染料和蛋白标签中的至少一种；进一步包含化学修饰。

16、优选地，所述化学修饰包含酰胺化、乙酰化、氨基化、甲基化、磷酸化、糖基化、泛素化中的至少一种；进一步包含酰胺化。

17、优选地，所述靶向部分包含配体、受体、抗体中的至少一种。

18、优选地，所述荧光染料包含fitc。

19、优选地，所述蛋白标签包含his、flag、gst、mbp、ha、myc、gfp、生物素中的至少一种。

20、本发明的第三个方面，提供一种融合蛋白，包含其他多肽和本发明第一个方面的抗菌肽kw20。

21、优选地，所述其他多肽位于所述抗菌肽kw20的n端和/或c端。

22、优选地，所述其他多肽和本发明第一个方面的抗菌肽kw20通过接头连接至所述抗菌肽kw20的n端和/或c端。

23、本发明的第四个方面，提供与本发明第一个方面的抗菌肽kw20、本发明第二个方面的缀合物、或本发明第三个方面的融合蛋白相关的生物材料，所述生物材料包含b1)～b8)中至少一种：

24、b1)编码本发明第一个方面的抗菌肽kw20、本发明第二个方面的缀合物、或本发明第三个方面的融合蛋白的核酸分子；

25、b2)包含b1)所述核酸分子的表达盒；

26、b3)包含b1)所述核酸分子的载体；

27、b4)包含b2)所述表达盒的载体；

28、b5)包含b1)所述核酸分子的转基因细胞系；

29、b6)包含b2)所述表达盒的转基因细胞系；

30、b7)包含b3)所述载体的转基因细胞系；

31、b8)包含b4)所述载体的转基因细胞系。

32、优选地，所述转基因细胞系不包含繁殖材料。

33、本发明的第五个方面，提供一种组合物，包含c1)～c3)中至少一种：

34、c1)本发明第一个方面的抗菌肽kw20或其盐；

35、c2)本发明第二个方面的缀合物；

36、c3)本发明第三个方面的融合蛋白。

37、优选地，所述组合物还包含其他活性抗菌成分。

38、优选地，所述其他活性抗菌成分包含青霉素类抗生素(如氨苄西林、苯唑西林等)、头孢类抗生素(如头孢拉定、头孢呋辛、头孢哌酮等)、碳青霉烯类抗生素(如亚胺培南，美罗培南等)、脂(糖)肽类抗生素(如多粘菌素类和万古霉素等)、氨基糖苷类抗生素、四环素类抗生素(如多西环素、土霉素等)、林可酰胺类抗生素(林可霉素，克林霉素)、大环内酯类抗生素(如阿奇霉素、罗红霉素、红霉素等)、氟喹诺酮类抗生素(如环丙沙星、洛美沙星等)和夫西地酸中的至少一种。

39、优选地，所述其他活性抗菌成分包含四环素类抗生素(如多西环素、米诺环素、土霉素等)、林可酰胺类抗生素(林可霉素，克林霉素)、大环内酯类抗生素(如阿奇霉素、罗红霉素、红霉素等)和夫西地酸中的至少一种。

40、优选地，所述菌包含细菌、真菌中的至少一种；进一步包含细菌；更进一步包含粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、痤疮丙酸杆菌中的至少一种；再进一步包含痤疮丙酸杆菌。

41、本发明的第六个方面，提供本发明第一个方面的抗菌肽kw20或其盐、本发明第二个方面的缀合物、本发明第三个方面的融合蛋白、本发明第四个方面的生物材料、和/或本发明第五个方面的组合物在e1)～e2)中任意一种中的应用：

42、e1)制备抗菌的产品；

43、e2)制备防治痤疮的产品。

44、优选地，e1)中所述产品包含药物、饲料、饲料添加剂、防腐剂、日化用品、织物、纸制品、医用材料、细胞培养基中的至少一种。

45、优选地，所述日化用品包含洗面奶、洗手液、沐浴液、洗发香波、漱口水、牙膏、香皂、化妆品、女性护理洗液、洗衣皂、洗衣液、洗衣粉、洗涤灵、消毒液、洁厕液中的至少一种。

46、优选地，所述织物包含衣物、床上用品、消毒纸巾、辅料、绷带中的至少一种。

47、优选地，所述纸制品包含卫生巾、卫生护垫、尿不湿、尿垫中的至少一种。

48、优选地，所述医用材料包含组织再生材料、组织修复材料、医用水凝胶材料、医用抗菌材料中的至少一种。

49、优选地，e1)中所述菌包含细菌、真菌中的至少一种；进一步包含细菌；更进一步包含粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、痤疮丙酸杆菌中的至少一种；再进一步包含痤疮丙酸杆菌。

50、优选地，e2)中所述产品包含药物、日化用品、医疗器械、保健品中的至少一种。

51、优选地，所述日化用品包含洗面奶、沐浴液、香皂、化妆品中的至少一种。

52、优选地，所述药物的剂型包含注射剂、口服剂、外用剂中的至少一种。

53、本发明的第七个方面，提供一种产品，包含d1)～d4)中至少一种：

54、d1)本发明第一个方面的抗菌肽kw20或其盐；

55、d2)本发明第二个方面的缀合物；

56、d3)本发明第三个方面的融合蛋白；

57、d4)本发明第五个方面的组合物。

58、优选地，所述产品为f1)～f2)中任意一种：

59、f1)抗菌的产品；

60、f2)防治痤疮的产品。

61、优选地，f1)中所述产品包含药物、饲料、饲料添加剂、防腐剂、日化用品、织物、纸制品、医用材料、细胞培养基中的至少一种。

62、优选地，所述日化用品包含洗面奶、洗手液、沐浴液、洗发香波、漱口水、牙膏、香皂、化妆品、女性护理洗液、洗衣皂、洗衣液、洗衣粉、洗涤灵、消毒液、洁厕液中的至少一种。

63、优选地，所述织物包含衣物、床上用品、消毒纸巾、辅料、绷带中的至少一种。

64、优选地，所述纸制品包含卫生巾、卫生护垫、尿不湿、尿垫中的至少一种。

65、优选地，所述医用材料包含组织再生材料、组织修复材料、医用水凝胶材料、医用抗菌材料中的至少一种。

66、优选地，f1)中所述菌包含细菌、真菌中的至少一种；进一步包含细菌；更进一步包含粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、痤疮丙酸杆菌中的至少一种；再进一步包含痤疮丙酸杆菌。

67、优选地，f2)中所述产品包含药物、日化用品、医疗器械、保健品中的至少一种。

68、优选地，所述日化用品包含洗面奶、沐浴液、香皂、化妆品中的至少一种。

69、优选地，所述药物的剂型包含注射剂、口服剂、外用剂中的至少一种。

70、本发明的有益效果是：

71、本发明首次公开了抗菌肽kw20或其盐，该抗菌肽kw20对标准菌株和临床耐药菌株具有较好的抗菌活性，并且杀菌速度与多粘菌素e相当，同时相比多粘菌素e杀菌作用持续时间更长。