一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的LC-MS/MS方法与流程

本发明属于药物检测，具体涉及一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法。

背景技术：

1、胆汁反流性胃炎(bile reflux gastritis，brg)为消化科多发病、常见病，不仅会损害胃黏膜，还会增加胃癌发生风险，严重危害患者生命健康。现阶段临床常以胃动力药、抑酸药物进行治疗，以减轻临床症状，提高患者生活质量，但单一用药整体疗效并不理想，同时不良反应风险较高。因此积极探讨科学有效的联合治疗方案，对修复、保护胃黏膜，预防病情反复有重要意义。

2、多潘立酮(domperidone)是一种合成的苯丙咪唑类衍生物，为外周多巴胺受体阻滞药，直接作用于胃肠壁，可增加食道下部括约肌张力，防止胃-食道反流，增强胃蠕动，促进胃排空，协调胃与十二指肠运动，抑制恶心、呕吐，并能有效地防止胆汁反流，不影响胃液分泌。多潘立酮主要用于治疗由胃排空延缓、胃食道反流、食道炎引起的消化不良症或者功能性、器质性、感染性、饮食性、放射性治疗或化疗所引起的恶心、呕吐。临床推荐的成人治疗剂量为3次/d，10mg/次，由于多潘立酮血浆浓度较低，因此需要建立一个灵敏高且能准确定量的检测方法，用以分析样本中的多潘立酮含量。

3、埃索美拉唑(esomeprazole，emz)为奥美拉唑的s-异构体，是一种抑酸类药物，可以抑制胃酸分泌减少胃酸，对胃黏膜的刺激起到保护胃黏膜的作用。抑酸药物包括质子泵抑制剂(ppis)以及钾离子竞争型酸阻断剂，其中ppis包括奥美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑、埃索美拉唑、艾普拉唑等，以ppis为代表的抑酸药物短期普遍耐受良好且对大多患者有效，但是ppis在临床应用中也存在一定的局限性。ppis大多为前体药物，半衰期大多为1～2小时，作用持续时间较短，且易引起患者因胃酸抑制不足而产生的夜间胃酸突破现象；其次ppis在体内主要经cyp2c19代谢，该酶的活性在人群中存在显著的遗传多态性，使得ppis的抑酸效果呈现出较大的个体间差异，因此需要建立一个专属性强、灵敏度高的检测方法用于样品中埃索美拉唑的定性定量分析。

技术实现思路

1、要解决的技术问题：本发明的目的是提供一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，该方法具有简便、灵敏、精确的特点，并通过了方法学验证，适用于胆汁反流性胃炎患者血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的定性定量分析。

2、技术方案：一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，具体包括以下步骤：

3、s1.对照品储备液配制：精密称取多潘立酮和埃索美拉唑对照品各10mg，分别置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；再分别移取1ml对照品溶液置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得对照品储备液；

4、s2.混合标准对照溶液配制：分别移取多潘立酮和埃索美拉唑对照品储备液各1ml，置于同一10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为10μg/ml的混合标准对照溶液；

5、s3.样品溶液配制：人血浆样品室温解冻后量取100μl于1.5ml离心管中，加入100μl甲醇，涡流振荡2-3min，低温离心取上清，微孔滤膜过滤后待测；

6、s4.采用超高效液相色谱-串联质谱进行进样分析。

7、进一步的，所述步骤s3中低温离心条件为：温度为4℃，离心转速为10000-12000r/min，离心时间为5-10min。

8、进一步的，所述步骤s3中微孔滤膜为0.22μm滤膜。

9、进一步的，所述步骤s4中超高效液相色谱条件为：

10、色谱柱：shim-packxr-ods柱，2.1mm×100mm,2.7μm；

11、扫描波长范围：190-400nm；

12、流动相：a-0.1％甲酸水、b-乙腈；

13、流速：0.3-0.4ml/min；

14、柱温：30-35℃；

15、样品室温度：室温；

16、进样量：2-5μl；

17、洗脱梯度程序：0-1.0min 5％b；1.0-13.0min，5％b→95％b；13.0-15.0min 95％b；15.0-15.1min，95％b→5％b；15.1-20.0min，5％b。

18、进一步的，所述步骤s4中质谱条件为：

19、离子源：电喷雾正离子模式；

20、雾化气：55psi；

21、辅助气：55psi；

22、气帘气：30psi；

23、离子源温度：550℃；

24、电喷雾电压：4000v；

25、监测模式：多反应监测mrm；

26、多潘立酮m/z 426.2→175.2；埃索美拉唑m/z 346.2→198.2。

27、有益效果：

28、1.本发明建立了一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，能够在同一方法体系中起到同时检测多潘立酮和埃索美拉唑含量的效果，具有简便、灵敏、稳定的特点，并通过了方法学验证，适用于胆汁反流性胃炎患者血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的定性定量分析。

技术特征：

1.一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，其特征在于，所述步骤s3中低温离心条件为：温度为4℃，离心转速为10000-12000r/min，离心时间为5-10min。

3.根据权利要求1所述的一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，其特征在于：所述步骤s3中微孔滤膜为0.22μm滤膜。

4.根据权利要求1所述的一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，其特征在于，所述步骤s4中超高效液相色谱条件为：

5.根据权利要求1所述的一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的lc-ms/ms方法，其特征在于，所述步骤s4中质谱条件为：

技术总结本发明提供了一种检测人血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的LC‑MS/MS方法，检测条件为：流动相：A‑0.1％甲酸水、B‑乙腈；流速：0.3‑0.4mL/min；洗脱梯度程序：0‑1.0min 5％B；1.0‑13.0min，5％B→95％B；13.0‑15.0min 95％B；15.0‑15.1min，95％B→5％B；15.1‑20.0min，5％B；质谱条件：电喷雾正离子模式；离子源温度：550℃；电喷雾电压：4000V；多反应监测MRM。本发明方法具有简便、灵敏、稳定的特点，并通过了方法学验证，适用于胆汁反流性胃炎患者血浆中多潘立酮和埃索美拉唑的定性定量分析。技术研发人员：朱晶,谢婧,王晗琰受保护的技术使用者：苏州国辰生物科技股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/20