一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法及其应用与流程

本发明属于检测，尤其涉及一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法及其应用。

背景技术：

1、鬼针草为菊科鬼针草属一年生草本植物，又名鬼钗草、粘身草、三叶鬼针草，是我国民间常用药，具有清热解毒、活血散瘀之功效，多用于上呼吸道感染、咽喉肿痛、疟疾、急性黄疸型肝炎等。鬼针草所含成分复杂多样，主要活性成分为黄酮类化合物。

2、目前，目前鬼针草药材及其复方制剂相关的质量研究较少，从未见在高效液相分析检测及含量测定方面的相关报道，缺少一种有效手段对其进行质量控制。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法及其应用，该测定方法首次以4-香豆酸为指标成分建立含量的测定方法，为鬼针草药材、饮片、标准汤剂及配方颗粒的质量提供更为科学的鉴别依据。

2、本发明提供了一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法，包括以下步骤：

3、s1、将鬼针草和溶剂混合，超声处理，得到供试品溶液；

4、s2、取4-香豆酸对照品和甲醇混合，得到10μg/ml的4-香豆酸溶液；

5、s3、采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得步骤s1中所述供试品溶液和步骤s2中所述对照品溶液中化学成分的色谱图，具体的色谱参数如下：色谱柱为c18柱；流动相a为乙腈，流动相b为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱；

6、s4、根据所述对照品溶液的浓度、所述对照品溶液在色谱图中的峰面积以及鬼针草中与所述对照品溶液相对应的成分在色谱图中的峰面积，且基于步骤s3中的检测条件，以外标法计算鬼针草中4-香豆酸的含量。

7、优选地，所述鬼针草选自鬼针草药材、鬼针草饮片、鬼针草配方颗粒或鬼针草标准汤剂中至少一种；

8、若鬼针草选自鬼针草药材和/或鬼针草饮片时，溶剂为水；所示鬼针草的质量和水的体积比为1g:(24～26)ml；

9、鬼针草选自溶剂鬼针草配方颗粒或鬼针草标准汤剂时，溶剂为70％甲醇；所述鬼针草的质量和70％甲醇的体积比为1g:(24～26)ml。

10、优选地，所述超声处理的功率为580～620w，超声处理的频率为35～45khz，超声处理的时间为20～30min。

11、优选地，所述梯度洗脱包括:

12、0～10min，a相：10～17％，b相：90～83％；

13、10～20min，a相：17％，b相83％；

14、20～25min，a相：17～28％，b相83～72％。

15、优选地，4-香豆酸溶液的进样浓度0.0068～0.0888μg/ml，4-香豆酸的回归方程为y＝48690.4286x-6386.0，r2＝0.9999。

16、优选地，色谱柱的规格为zorbax sb c18 4.6×250mm；

17、柱温为30～35℃。

18、优选地，检测波长309nm；

19、流动相的流速0.8～1.2ml/min；

20、理论板数按4-香豆酸峰计算不低于5000。

21、优选地，供试品溶液和4-香豆酸溶液的注入量为4～5μl。

22、本发明提供了一种鬼针草的鉴别方法，采用上述技术方案所述测定方法进行检测，分析检测结果。

23、本发明提供了一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法，包括以下步骤：s1、将鬼针草和溶剂混合，超声处理，得到供试品溶液；s2、取4-香豆酸对照品和甲醇混合，得到10μg/ml的4-香豆酸溶液；s3、采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得步骤s1中所述供试品溶液和步骤s2中所述对照品溶液中化学成分的色谱图，具体的色谱参数如下：色谱柱为c18柱；流动相a为乙腈，流动相b为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱；s4、根据所述对照品溶液的浓度、所述对照品溶液在色谱图中的峰面积以及鬼针草中与所述对照品溶液相对应的成分在色谱图中的峰面积，且基于步骤s3中的检测条件，以外标法计算鬼针草中4-香豆酸的含量。本发明首次建立高效液相含量测定方法用于鬼针草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒等相关制剂的检测；确立了以4-香豆酸为指标成分，能从整体上、宏观上控制鬼针草及其相关制剂的内在质量，保证了药物的疗效，使药材及其相关制剂得到了更为正规的质量控制。该方法稳定性好、精密度高、重现性好、便捷且易于掌握。

技术特征：

1.一种鬼针草中4-香豆酸含量的测定方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述鬼针草选自鬼针草药材、鬼针草饮片、鬼针草配方颗粒或鬼针草标准汤剂中至少一种；

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述超声处理的功率为580～620w，超声处理的频率为35～45khz，超声处理的时间为20～30min。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括:

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，4-香豆酸溶液的进样浓度0.0068～0.0888μg/ml，4-香豆酸的回归方程为y＝48690.4286x-6386.0，r2＝0.9999。

6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，色谱柱的规格为zorbaxsb c18 4.6×250mm，5μm；

7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，检测波长309nm；

8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，供试品溶液和4-香豆酸溶液的注入量为4～5μl。

9.一种鬼针草的鉴别方法，其特征在于，采用权利要求1～8任一项所述测定方法进行检测，分析检测结果。

技术总结本发明提供一种鬼针草中4‑香豆酸含量的测定方法及其应用，S1.将鬼针草和溶剂混合，超声处理，得到供试品溶液；S2.取4‑香豆酸对照品和甲醇混合，得到对照品溶液；S3.采用高效液相色谱法，在相同检测条件下分别获得供试品溶液和对照品溶液中化学成分的色谱图:色谱柱为C18柱；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱；S4.根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及鬼针草中与对照品溶液相对应的成分在色谱图中的峰面积，且基于S3的检测条件，以外标法计算4‑香豆酸的含量。本发明首次建立以4‑香豆酸为指标成分的高效液相含量测定方法用于鬼针草的检测，稳定性好、精密度高、重现性好等。技术研发人员：黄宇,毛效贤,李果,叶强蔺,费文波,钟磊,张阳受保护的技术使用者：四川新绿色药业科技发展有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/20