一种调味品中氯丙醇的快速测定方法与流程

本发明涉及食品检测，尤其涉及一种调味品中氯丙醇的快速测定方法。

背景技术：

1、氯丙醇是丙三醇上的羟基被氯取代所产生的一类化合物，用盐酸水解大豆蛋白制备酸水解植物蛋白液的过程极易产生以3-氯-1,2-丙二醇和2-氯-1,3-丙二醇为主的氯丙醇类物质。3-氯-1,2-丙二醇是2a类致癌物，包括中国在内的多个国家和组织均对其含量进行了严格的限制。液体调味品往往添加了酸水解植物蛋白液，有被氯丙醇污染的风险，测定其中氯丙醇的含量，对控制产品质量，保护消费者健康意义重大。

2、目前，对于液体调味品中氯丙醇的检测往往使用液液萃取法和固相支持液液萃取法，液液萃取法使用乙醚、乙酸乙酯等与水不互溶的非极性溶剂进行液液萃取，应液体调味品往往含有丰富的蛋白质，在提取过程中极易发生乳化。固相支持液液萃取采用大孔硅藻土作为样品的吸附剂，将样品吸附在大孔硅藻土的表面，再用乙醚、乙酸乙酯等溶剂进行洗脱，避免了乳化的发生。但蚝油等调味品含有胶质成分，质地粘稠，难以被大孔硅藻土吸附，因而无法使用固相支持液液萃取方式处理。3-氯1,2-丙二醇和2-氯-1,3-丙二醇均含有两个羟基，易与色谱系统中的活性位点发生相互作用，导致色谱峰拖尾，响应较差。检测中往往使用七氟丁酰基咪唑进行衍生，大大降低氯丙醇的极性。但是七氟丁酰基咪唑价格昂贵，且遇水迅速反应，若操作不当或环境湿度较大时很容易衍生失败。

技术实现思路

1、针对上述问题，现提供一种前处理操作简单、速度快的调味品中氯丙醇的快速测定方法，以有效解决现有技术中存在的问题。

2、具体技术方案如下：

3、一种调味品中氯丙醇的快速测定方法，包括如下步骤：

4、1)称取氯代丙二醇标准品，以乙腈溶解并定容形成标准中间溶液；

5、2)称取d5-氯代丙二醇标准品，以乙腈溶解并定容形成内标中间溶液；

6、3)移取标准中间溶液及适量内标中间溶液，以乙腈梯度稀释成系列标准工作溶液；

7、4)称取适量样品，依次加入适量内标中间溶液、纯水、氢氧化钠溶液，混匀，加入乙腈，涡旋使其充分混匀，再加入无水硫酸镁和氯化钠粉末，涡旋提取、离心，取上清液，得待测溶液；

8、5)分别在标准工作溶液和待测溶液中加入一定量的d-山梨糖醇的乙腈溶液，混匀；将标准工作溶液注入气相色谱-质谱/质谱仪中进行测定，绘制标准曲线，再将待测溶液按照相同的仪器参数进行检测，获得试样中氯代丙二醇的质量色谱图，以保留时间和离子比率对目标物进行定性分析，以质量色谱图的相对峰面积和线性回归方程，计算得到待测物的浓度。

9、进一步的，步骤1)标准中间溶液中氯代丙二醇的浓度为mμg/ml，1≤m≤5；优选的，m＝2.5。

10、进一步的，步骤2)内标中间溶液中d5-氯代丙二醇的浓度为nμg/ml，10≤n≤15；优选的，n＝10。

11、进一步的，步骤3)系列标准工作溶液中氯代丙二醇浓度分别为5.0、10、50、100、200、400、1000和2000ng/ml；d5-氯代丙二醇浓度为q ng/ml，10≤q≤15；优选的，q＝100。

12、进一步的，步骤4)中称取1-5g混合均匀的试样，加入适量内标中间溶液，再依次加入1-5ml纯水、0.2-1ml浓度为0.8-1mol/l的氢氧化钠溶液，混匀，加入2-10ml乙腈，涡旋振荡并超声提取一段时间，加入0.5-2g无水硫酸镁和0.1-0.5g氯化钠，剧烈震荡，离心，过微孔滤膜，备用。

13、进一步的，步骤5)中气相色谱条件为：色谱柱为hp-innowax毛细管色谱柱，30m×0.25mm，膜厚0.25μm；进样口温度220-235℃；不分流进样；进样体积1-3μl；柱温25-30℃；载气为高纯氦气，流速1.0-1.5ml/min；传输线温度210-225℃。

14、进一步的，步骤5)中质谱条件为：电子轰击离子源；多反应监测；mrm参数如下表所示：

15、 化合物名称 前体离子(m/z) 产物离子(m/z) 碰撞能量(ev) 3-mcpd 81 43 5 3-mcpd 79 43 5 <![cdata[d₅-3-mcpd]]> 84 46 5 <![cdata[d₅-3-mcpd]]> 82 46 5 2-mcpd 64 27 10 2-mcpd 62 27 10 <![cdata[d₅-2-mcpd]]> 67 30 10 <![cdata[d₅-2-mcpd]]> 65 30 10

16、。

17、进一步的，步骤1)中氯代丙二醇为3-氯-1,2-丙二醇或2-氯-1,3-丙二醇中的一种或多种。

18、进一步的，步骤2)中d5-氯代丙二醇为d5-3-氯-1,2-丙二醇或d5-2-氯-1,3-丙二醇中的一种或多种。

19、上述方案的有益效果是：

20、1)液体调味品含有大量的有机酸、蛋白质和胶质，本发明中通过加入纯水增加样品分散度，加入氢氧化钠中和有机酸、加入乙腈以沉淀蛋白、加入无水硫酸镁和氯化钠盐析，使乙腈与水相分层，上述前处理简单高效、操作速度快，可以有效去除样品中的酸性干扰物，并可以有效防止因产生乳化而导致的回收率降低等问题；

21、2)本发明中加入d-山梨糖醇作为分析保护剂，以掩蔽色谱系统中的活性位点，避免氯丙醇中的羟基与活性位点发生相互作用，可以在不经衍生的情况下有效改善目标物的峰型，提高检测灵敏度。