一种小发夹RNA及其应用

本申请涉及基因工程，尤其涉及一种小发夹rna及其应用。

背景技术：

1、灰葡萄孢菌是一种世界范围的植物灰霉病病原菌，能导致500多种植物病害，其中受影响的植物超过200种。目前对灰葡萄孢菌的主要防治手段是通过喷施化学杀菌剂，但是化学杀菌剂(农药)的长期大量使用，不仅造成生态环境污染，影响食品安全，还会导致病原真菌抗药性逐渐增强，因此，现有技术还有待改进。

技术实现思路

1、鉴于上述现有技术的不足，本申请的目的在于提供一种小发夹rna及其应用，旨在利用本申请中的小发夹rna对灰葡萄孢菌的抑制效果解决现有技术中通过喷施化学杀菌剂防治灰葡萄孢菌容易造成环境污染、影响食品安全以及随着致病原真菌抗药性增强效果防治减弱的问题。

2、本申请的技术方案如下：

3、本申请的第一方面，提供一种小发夹rna，所述小发夹rna的序列包括茎环序列以及位于所述茎环序列两侧的第一序列和第二序列，所述第一序列和所述第二序列反向互补；所述第一序列为由具有如seq id no.1所示的氨基酸序列的蛋白的编码基因转录得到的rna序列。

4、优选地，所述第一序列为由具有如seq id no.1所示的氨基酸序列的蛋白的编码基因中第1695-2015位核苷酸序列转录得到的rna序列。

5、优选地，所述茎环序列如seq id no.2所示，所述第一序列如seq id no.3所示，所述第二序列如seq id no.4所示。

6、本申请的第二方面，提供一种由上述的小发夹rna衍生的小干扰rna。

7、本申请的第三方面，提供一种含有上述的小发夹rna的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌株或重组病毒。

8、本申请的第四方面，提供一种上述的小发夹rna或上述的小干扰rna在制备灰葡萄孢菌抑制剂中的应用。

9、本申请的第五方面，提供一种灰葡萄孢菌抑制剂，所述灰葡萄孢菌抑制剂包括本上述的小发夹rna或上述的小干扰rna。

10、优选地，所述灰葡萄孢菌抑制剂包括细胞穿膜肽。

11、优选地，所述细胞穿膜肽包括细胞穿膜肽kh9-bp100。

12、本申请的第六方面，提供一种上述的灰葡萄孢菌抑制剂在防治植物灰霉病中的应用。

13、本申请的有益效果：

14、本申请中的小发夹rna，通过沉默灰葡萄孢菌果胶甲基酯酶基因，特异性靶向抑制灰葡萄孢菌果胶甲基酯酶的表达，使灰葡萄孢菌死亡或丧失侵染能力，进而能够稳定、特异且高效地杀灭灰葡萄孢菌，可作为防治灰葡萄孢菌的有效成分，起到防治灰霉病的作用，绿色环保，安全无害。

技术特征：

1.一种小发夹rna，其特征在于，所述小发夹rna的序列包括茎环序列以及位于所述茎环序列两侧的第一序列和第二序列，所述第一序列和所述第二序列反向互补；

2.根据权利要求1所述的小发夹rna，其特征在于，所述第一序列为由具有如seq idno.1所示的氨基酸序列的蛋白的编码基因中第1695-2015位核苷酸序列转录得到的rna序列。

3.根据权利要求1所述的小发夹rna，其特征在于，所述茎环序列如seq id no.2所示，所述第一序列如seq id no.3所示，所述第二序列如seq id no.4所示。

4.由权利要求1至3任一项所述的小发夹rna衍生的小干扰rna。

5.含有权利要求1至3任一项所述的小发夹rna的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌株或重组病毒。

6.一种权利要求1至3任一项所述的小发夹rna或权利要求4所述的小干扰rna在制备灰葡萄孢菌抑制剂中的应用。

7.一种灰葡萄孢菌抑制剂，其特征在于，所述灰葡萄孢菌抑制剂包括权利要求1至3任一项所述的小发夹rna或权利要求4所述的小干扰rna。

8.根据权利要求7所述的灰葡萄孢菌抑制剂，其特征在于，所述灰葡萄孢菌抑制剂包括细胞穿膜肽。

9.根据权利要求8所述的灰葡萄孢菌抑制剂，其特征在于，所述细胞穿膜肽包括细胞穿膜肽kh9-bp100。

10.一种权利要求7至9任一项所述的灰葡萄孢菌抑制剂在防治植物灰霉病中的应用。

技术总结本申请涉及基因工程技术领域，公开一种小发夹RNA及其应用。其中小发夹RNA的序列包括茎环序列以及分别位于所述茎环序列两侧的第一序列和第二序列，所述第一序列和所述第二序列反向互补；所述第一序列为由具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的蛋白的编码基因转录得到的RNA序列。本申请中的小发夹RNA，通过沉默灰葡萄孢菌果胶甲基酯酶基因，特异性靶向抑制灰葡萄孢菌果胶甲基酯酶的表达，使灰葡萄孢菌死亡或侵染能力丧失，能够稳定、特异且高效地杀灭灰葡萄孢菌，可作为防治灰霉病的有效成分，绿色环保，安全无害。技术研发人员：陈俞彤,陈若瑜,龙欣姁,冯晓程,莫蓓莘,刘学东,陈伟钊受保护的技术使用者：深圳大学技术研发日：技术公布日：2024/9/9