一种壶瓶枣裂果多糖提取物及其制备方法和应用

本发明涉及多糖提取，特别是涉及一种壶瓶枣裂果多糖提取物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、壶瓶枣(zizyphusjujube mill.cv.hupingzao)是鼠李科枣属植物枣树的果实，个大肉厚、营养丰富。壶瓶枣中含有蛋白质、糖类、有机酸、脂肪、必需氨基酸、矿物质、维生素等多种营养成分。此外，还有环磷酸腺苷、三萜类化合物、皂苷等功能性成分。这些营养、功能成分，赋予了壶瓶枣丰富的生理功能，包括保护心血管、抗肿瘤、抗疲劳等生物活性。

2、壶瓶枣以其丰富的营养价值、独特的功能特性，作为一种药食两用的同源食品而广受关注。然而，壶瓶枣种植过程中存在裂果量大、产能过剩等问题，裂果后的壶瓶枣会失去鲜食价值，容易造成商品经济损失、环境污染和资源的浪费。壶瓶枣裂果中含有酸性多糖，利用碱液提取法可以提高多糖得率，特别是酸性多糖的得率。但是碱液会破坏多糖结构，影响其活性，且提取液中色素、杂质含量较高。传统的热水提取法操作简单，不会破坏多糖结构，但其提取率较低，周期较长。亚临界水提取、低共熔溶剂提取、超声和微波辅助提取技术等新技术和技术集成不断涌现，显著提高了多糖提取效率，具有高效省时等优点，但提取成本高、操作较复杂。为满足工业化大规模生产，需要较低成本、高得率。因此，亟需对提取方法进行改进。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种壶瓶枣裂果多糖提取物及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、本发明的技术方案之一：一种壶瓶枣裂果多糖提取物的制备方法，包括以下步骤：

4、(1)将预处理(包括脱脂脱色)后的壶瓶枣裂果粉末加入碱性电解水中，加热提取后离心，得到提取液；

5、(2)将所述提取液浓缩后进行初步纯化(包括脱蛋白和透析)，冻干后得到所述壶瓶枣裂果多糖提取物。

6、更进一步地，步骤(1)中，所述预处理的方法，具体包括：将壶瓶枣裂果清洗后去核切片，干燥、粉碎(超微粉碎)、脱脂脱色、打粉、过筛，得到壶瓶枣裂果粉末。所述干燥的方法，具体包括：先速冻至-40℃，然后在冷阱温度为-20～-40℃、加热温度为30～50℃的条件下冷冻干燥20～30h；所述脱脂脱色的方法，具体包括：将粉碎的壶瓶枣裂果加入浓度为70～90vol.％的乙醇溶液中浸泡48～80h；所述过筛的目数为80～120目。

7、更进一步地，所述干燥的方法，具体包括：先速冻至-40℃，然后在冷阱温度为-35℃、加热温度为40℃的条件下冷冻干燥24h；所述脱脂脱色的方法，具体包括：将粉碎的壶瓶枣裂果加入浓度为80vol.％的乙醇溶液中浸泡72h；所述过筛的目数为100目。

8、进一步地，步骤(1)中，所述预处理后的壶瓶枣裂果和碱性电解水的质量/体积比为1～2g:15～50ml。

9、更进一步地，步骤(1)中，所述预处理后的壶瓶枣裂果和碱性电解水的质量/体积比为1g:20～40ml。

10、进一步地，所述碱性电解水的配制，具体包括：将0.1wt.％的氯化盐溶液采用18～22v的电压电解，得到ph为11～13的碱性电解水。

11、更进一步地，所述碱性电解水的配制，具体包括：将0.1wt.％的氯化盐溶液采用19～21v的电压电解，得到ph为12.0～12.6的碱性电解水。

12、更进一步地，所述氯化盐包括氯化钠、氯化钙或氯化镁。

13、碱性电解水属于强渗透性的小分子水，具有碱性特性，可以破坏植物细胞膜和细胞壁但会保护其活性基团，在碱性条件下酸性多糖更易提出。

14、电生功能水(electrolyzedwater，ew)即电解水，是一种酸碱温和、环境友好的溶剂，是将少量nacl、cacl2或mgcl2等溶于蒸馏水中，且在一种特殊装置中经电场处理后，使水的ph、氧化还原电位、有效氯浓度等指标发生改变而产生的具有特殊功能的电解氧化水和电解还原水的总称。碱性电解水(alkaline electrolyzed water，aew)具有碱性特性，属于强渗透性的小分子水，可以破坏植物细胞膜和细胞壁，用于活性物质提取时可以保护一些活性基团，且具有较高的溶解性，与传统的碱提法相比具有不腐蚀设备、不污染环境等优点。

15、进一步地，步骤(1)中，所述加热提取的温度为50～90℃，时间为1～3h。

16、更进一步地，步骤(1)中，所述加热提取的温度为60～85℃，时间为1.5～2.5h。

17、更进一步地，步骤(2)中，所述浓缩至提取液体积的20～40％；所述浓缩的温度为65～70℃。

18、更进一步地，步骤(2)中，所述浓缩至提取液体积的25％；所述浓缩的温度为65℃。

19、进一步地，步骤(2)中，所述初步纯化的方法，具体包括：将浓缩后获得的浓缩液和三氯乙酸(tca)溶液混合，静置、离心，得到脱蛋白溶液；将脱蛋白溶液和乙醇溶液混合后静置、离心，收集沉淀后加水复溶，透析、冻干，得到所述壶瓶枣裂果多糖提取物。

20、更进一步地，制备脱蛋白溶液时，所述三氯乙酸溶液的浓度为50g/l；所述静置的温度为4℃，时间为2～6h；所述离心的转速为5500～6500r/min，时间为10～15min；所述浓缩液和三氯乙酸溶液的体积比为1:(1.5～2.5)。

21、更进一步地，制备脱蛋白溶液时，所述静置的温度为4℃，时间为5h；所述离心的转速为6500r/min，时间为12min。

22、进一步地，将脱蛋白溶液和乙醇溶液混合后静置、离心时，所述脱蛋白溶液和乙醇溶液的体积比为1:(2～4)；所述乙醇溶液的浓度为95vol.％；所述静置的温度为4℃，时间为10～20h；所述离心的转速为6000～8000r/min，时间为10～15min；所述透析的方法，具体包括：将加水复溶后获得的溶液装入截留分子量为3500da的透析袋中，留出约三分之一的空间，先用自来水流水透析20～30h，再用蒸馏水透析40～60h(期间每6h换一次水)。

23、更进一步地，将脱蛋白溶液和乙醇溶液混合后静置、离心时，所述脱蛋白溶液和乙醇溶液的体积比为1:4；所述静置的温度为4℃，时间为12h；所述离心的转速为6000r/min，时间为15min；所述透析的方法，具体包括：将加水复溶后获得的溶液装入截留分子量为3500da的透析袋中，留出约三分之一的空间，先用自来水流水透析24h，再用蒸馏水透析48h(期间每6h换一次水)。

24、更进一步地，所述冻干的方法，具体包括：先在-40～-50℃下放置24h，然后在-60～-80℃下放置24h，最后真空冷冻干燥60～80h。

25、更进一步地，所述冻干的方法，具体包括：先在-40℃下放置24h，然后在-80℃下放置24h，最后真空冷冻干燥80h。

26、本发明的技术方案之二：一种上述制备方法制备的壶瓶枣裂果多糖提取物。

27、本发明的技术方案之三：一种上述壶瓶枣裂果多糖提取物在制备改善肠道微生态、调节免疫、增强机体的食品或药品中的应用。

28、本发明公开了以下技术效果：

29、(1)本发明的制备方法制备的壶瓶枣裂果多糖可以用于制备改善肠道微生态、调节免疫、增强机体的食品或药品。

30、(2)本发明提供了一种碱性电解水提取壶瓶枣裂果多糖的方法，通过采用特定ph(采用18～22v的电压电解制备的)范围内的碱性电解水提取壶瓶枣裂果多糖，减小了对多糖结构的破坏，所得壶瓶枣裂果多糖具有较高的热稳定性；并且本发明采用超微粉碎的方式(80～100目)联合碱性电解水提取，提高了壶瓶枣裂果多糖的提取率，本发明采用的碱性电解水具有不腐蚀设备、不污染环境等优点，减少了对于成本的消耗。

31、(3)本发明壶瓶枣裂果多糖提取物可作为益生元使用，益生元可选择性地刺激特定肠道菌的生长，具有改善肠道微生态、调节免疫、增强机体健康等功能，进而有效防治疾病。

32、(4)本发明减少了壶瓶枣产业链的资源浪费和环境污染，并且提高了其商业利用价值，为壶瓶枣裂果制备高值化生物活性产品提供参考。