一种油菜素活性物质提取的方法

本发明属于油菜花提取，更具体的涉及一种油菜素活性物质提取的方法。

背景技术：

1、油菜素活性物质如油菜素内酯(brassinolide,bl)和油菜素甾酮(castasterone,cs)是一类重要的内源性植物激素，在植物生长发育的各个阶段发挥重要的作用，同时帮助植物抵御外界不良影响。bl和cs在植物中的含量较低，但在不同植物及植物组织中种类和含量差异较大。与成熟组织相比，内源brs一般在幼嫩植物组织中的含量较高。此外，花粉及萌发的种子比其他组织中的含量高，幼根和叶中brs的含量仅为0.01-0.1ng/g fw，种子中约为1-100ng/g fw，而油菜花粉中brs的含量可达682ng/g，为根和叶中含量的1000-10000倍。

2、油菜花中bl和cs含量较其他物质少的多，用提取溶剂提取植物中bl和cs时也不可避免的提取出其他杂质，使植物提取溶剂中富含大量色素等杂质，严重影响后续检测。因此在进行提取步骤之后，需要对植物提取溶剂做进一步处理，即bl和cs的纯化与富集。目前，纯化富集常用的方法有液液萃取、固相萃取法、固相微萃取等。液液萃取是利用目标物质在互不相溶的两相溶剂体系中溶解度不同而实现纯化的目的，通常包含水溶性杂质去除和有机溶剂去除两步，但因其除杂效率差、样品易乳化、有机溶剂消耗量大等缺陷，在纯化富集中逐渐被淘汰；固相萃取法是利用目标物质在固液两相作用力强弱不同，从而使其在固相萃取剂中选择性吸附、选择性洗脱，进而达到分离纯化目的的一种方法；固相萃取法是利用目标物质在固液两相作用力强弱不同，从而使其在固相萃取剂中选择性吸附、选择性洗脱，进而达到分离纯化目的的一种方法；固相微萃取原理是利用“相似相溶”的特点，在集体支持物表面涂渍不同性质的高分子固定相薄层，通过直接或顶空方式，对待测物进行提取、富集、进样和解析，然后将富集了待测物的纤维直接转移到仪器(gc或hplc)中，通过一定的方式解吸附(一般是热解吸，或溶剂解吸)，然后进行分离分析。

3、目前，从油菜花中提取bl和cs常用到的方法是浸渍提取法，所得溶液是粗提溶液，然后将粗提溶液进行固相萃取是bl和cs的纯化过程，将大部分杂质去除，但不能保证将杂质完全去除；其提取纯化方法的步骤复杂性、效率低、制备周期长，基于此，本发明提供了一种油菜素活性物质提取的方法。

技术实现思路

1、为了解决现有油菜素内酯提取纯化方法的步骤复杂性、效率低、制备周期长的问题，本发明提供了一种油菜素活性物质提取的方法，从油菜花中高效提取bl和cs，并利用固相萃取技术纯化提取溶剂中的油菜素内酯，同时完成纯化工艺的优化，工艺简单、生产效率高、生产周期短。

2、本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的。

3、本发明的目的在于提供一种油菜素活性物质提取的方法，包括以下步骤：

4、将研磨后的油菜花粉末和提取溶剂以固液比1g：10-15ml混合，放入提取装置中在2-6℃下转动提取，离心得到提取液；将提取液经溶剂稀释形成吸附液体，经解吸液以固相萃取吸附方式萃取得到油菜素活性物质。

5、进一步的，转动提取过程中，所述提取溶剂为甲醇水溶液，甲醇溶液中甲醇的体积浓度为95-100％。

6、进一步的，转动提取过程中，转动提取的时间为20-25h，转动提取的转速为200-300rpm。

7、进一步的，转动提取过程中，采用提取溶剂对油菜花粉末进行2-5次循环提取，混合得到提取溶剂。

8、进一步的，固相萃取吸附过程中，吸附剂为c18和psa，c18和psa的用量比为4:1。

9、进一步的，固相萃取吸附过程中，将浓缩浸膏经甲醇稀释形成吸附液体，吸附液体中甲醇的体积分数为60％。

10、进一步的，固相萃取吸附过程中，解吸液为体积分数80％的甲醇水溶液，采用解吸液对吸附液体进行解吸3次以上。

11、进一步的，固相萃取吸附过程中，萃取得到的萃取液浓缩至无萃取剂、过滤得到油菜素活性物质。

12、进一步的，转动提取过程后，离心的转速为10000-12000rpm，离心时间8-15min，离心温度为1-4℃。

13、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

14、本发明提供了一种油菜素活性物质提取的方法，从油菜花中高效提取bl和cs，通过单因素和响应面试验设计优化了油菜花中bl和cs的提取和纯化过程，寻求一种快速、便捷、绿色节约、能获得更多更纯bl和cs的方法。为bl和cs以较低成本进行提取纯化的工业化生产提供一种方法，也为植物生长调节、杀菌剂等制作复配制剂时所用bl和cs提供一种获取途径，工艺简单、生产效率高、生产周期短。

技术特征：

1.一种油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，转动提取过程中，所述提取溶剂为甲醇溶液，甲醇溶液中甲醇的体积浓度为95-100％。

3.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，转动提取过程中，转动提取的时间为20-25h，转动提取的转速为200-300rpm。

4.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，转动提取过程中，采用提取溶剂对油菜花粉末进行2-5次循环提取，混合得到提取溶剂。

5.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，固相萃取吸附过程中，吸附剂为c18和psa，c18和psa的用量比为4:1。

6.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，固相萃取吸附过程中，将浓缩浸膏经甲醇稀释形成吸附液体，吸附液体中甲醇的体积分数为60％。

7.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，固相萃取吸附过程中，解吸液为体积分数80％的甲醇水溶液，采用解吸液对吸附液体进行解吸3次以上。

8.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，固相萃取吸附过程中，萃取得到的萃取液浓缩至无萃取剂、过滤得到油菜素活性物质。

9.根据权利要求1所述的油菜素活性物质提取的方法，其特征在于，转动提取过程后，离心的转速为10000-1200rpm，离心时间8-15min，离心温度为1-4℃。

技术总结本发明公开了一种油菜素活性物质提取的方法，属于油菜花提取技术领域。提取方法包括：将研磨后的油菜花粉末和提取溶剂以固液比1g：10‑15mL混合，放入提取装置中在2‑6℃下转动提取，离心得到提取液；将提取液经溶剂稀释形成吸附液体，经解吸液以固相萃取吸附方式萃取得到油菜素活性物质。本发明提供了一种油菜素活性物质提取的方法，从油菜花中高效提取油菜素内酯和油菜素甾酮，并利用固相萃取技术纯化提取溶剂中的油菜素内酯，同时完成纯化工艺的优化，工艺简单、生产效率高、生产周期短。技术研发人员：惠竹梅,崔静雯,梁艳英,曾桂花,王雪飞,王现行,李莹,王晓受保护的技术使用者：西北农林科技大学技术研发日：技术公布日：2024/9/9