使用抗PSGL-1抗体与JAK抑制剂的组合治疗T细胞介导的炎症性疾病或癌症的方法与流程

本文提供了治疗或预防有需要的受试者中t细胞介导的炎症性疾病或癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的特异性结合至人psgl-1的抗体与janus激酶(jak)抑制剂的组合。

背景技术：

1、t细胞介导的炎症性疾病如移植物抗宿主病(gvhd)、皮肤病症、多发性硬化症、类风湿性关节炎、幼年型关节炎、i型糖尿病、狼疮、炎症性肠病、克罗恩氏病、重症肌无力、免疫球蛋白肾病、心肌炎和自身免疫性甲状腺病症，以及癌症如白血病和淋巴瘤代表严重的健康状况。作为一个实例，急性gvhd(agvhd)是导致大多数非复发性死亡的造血细胞移植(hct)的主要并发症。agvhd的标准一线治疗包括剂量为1-2mg/kg的泼尼松或等效物的类固醇，完全缓解(cr)率在25％-41％的范围内。以下患者被认为是类固醇难治性患者：(a)用甲基泼尼松龙(mp)2mg/kg/天当量治疗3天后进展，(b)用mp 2mg/kg/天当量治疗7天后未改善，(c)用mp 1mg/kg/天当量治疗皮肤和上消化道gvhd后进展至新器官，或(d)在类固醇减量期间或之后复发(przepiorka等人,(2019)the oncologist,24:1-7)。

2、已知janus激酶/信号转导因子和转录激活因子(jak/stat)信号传导途径与多种血液学和实体癌的发展和进展相关[waldmann和chen(2017)annu rev immunol 35:533-550；vainchenker和constantinescu(2013)oncogene 32(21):2601-2613；thomas等人,(2015)br j cancer,113:365-71；o’shea等人,(2013)n engl j med368:161-70]，并且也是炎性细胞因子对免疫系统的影响的不可或缺的一部分(villarino等人,(2017)natimmunol,18:374-384)。stat及其上游激活因子jak正在被广泛探索作为癌症和炎症性疾病治疗的靶标(qureshy等人,(2020)j cancer metastasis treat 6:27-44；hosseini等人,(2020)j cell physiol.235(9):5903-5924)。许多jak抑制剂已经或正在积极地在临床试验中作为单一疗法或与其他剂组合在患有炎症性疾病或癌症的患者中进行测试；这些抑制剂中的至少有五种已获得美国食品与药品管理局(fda)批准用于治疗炎症性疾病或癌症，包括类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、gvhd(qureshy等人,(2020)j cancer metastasistreat 6:27-44；damsky等人,(2021)journal of allergy and clinical immunology 147(3):814-826)和骨髓纤维化。

3、鲁索替尼是一种jak 1/2抑制剂并且最近被批准用于治疗类固醇难治性急性gvhd(sr-agvhd)和慢性gvhd(cgvhd)。尽管鲁索替尼与多种类型的二级疗法已获批准，但sr-agvhd的长期结果非常差，死亡率在70％-80％之间的范围内(levine等人,(2010)bbmt,16(12):1693-1699)。二线疗法失败(治疗难治性)的受试者的结果甚至更加令人沮丧。

4、急性gvhd由识别并破坏患者组织(包括皮肤、胃肠道和肝脏)的供体来源的同种异体反应性t细胞引起。靶向和控制或消除高度增殖和高度活化的同种异体反应性t细胞是治疗gvhd的基本策略。

5、psgl-1长期以来众所周知是参与白细胞运输的粘附分子，被认为是可下调慢性增殖/活化的t细胞的免疫检查点调节剂(chen等人,(2004)blood,104(10):3233-3242；huang等人,(2005)eur j immunol,35(7):2239-2249)。neihulizumab(abgn-168h)是一种针对psgl-1的人源化igg4κ单克隆抗体(mab)，在与psgl-1结合后优先诱导晚期激活t细胞的细胞凋亡(程序性细胞死亡)。neihulizumab已在gvhd中进行了测试，获得了令人鼓舞的临床结果。

6、一些研究鉴定，psgl-1可以是多种血液系统恶性肿瘤的免疫疗法治疗的潜在靶标。例如，基因表达谱分析揭示，psgl-1由多发性骨髓瘤和间变性大t细胞淋巴瘤的细胞强烈表达，并且对由体外治疗引发的效应的进一步评价也表明psgl-1是这些恶性肿瘤的体液免疫疗法的有希望的候选物(tripodo等人,(2009)curr cancer drug targets,9(5):617-625；azab等人,(2012)blood,119(6):1468-1478；belmonte等人,(2021)cancers,13(12):2958-2973)。

7、对于t细胞介导的炎症性疾病和癌症仍然需要更有效的治疗。

8、本文引用的所有公布、专利和专利申请特此出于所有目的通过引用以其整体并入。

技术实现思路

1、为了满足这一需要，本文提供了使用抗psgl-1抗体与jak抑制剂的组合治疗或预防t细胞介导的炎症性疾病或癌症的方法。这些方法至少部分地基于本文的证明，即发现抗psgl-1抗体与jak抑制剂协同作用以促进激活的t细胞的细胞凋亡的诱导并改善患有gvhd的患者的结果。

2、因此，在一方面，本文提供了一种治疗或预防t细胞介导的炎症性疾病的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的特异性结合至人psgl-1的抗体与janus激酶(jak)抑制剂的组合。在另一方面，本文提供了一种治疗或预防癌症(例如，t细胞介导的癌症，如t细胞白血病或t细胞淋巴瘤)的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的特异性结合至人psgl-1的抗体与janus激酶(jak)抑制剂的组合。在一些实施方案中，特异性结合至人psgl-1的抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链。在一些实施方案中，vh结构域包含含有氨基酸序列sfgmh(seq id no:8)的cdr-h1、含有氨基酸序列yinggsstifyanavkg(seq id no:9)的cdr-h2和含有氨基酸序列yasygggamdy(seq id no:10)的cdr-h3；并且vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivhndgntyfe(seq id no:5)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:6)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgsyvplt(seq id no:7)的cdr-l3。在一些实施方案中，vh结构域包含含有氨基酸序列ayyih(seq id no:24)的cdr-h1、含有氨基酸序列rvnpntggtsynpkfkg(seq id no:25)的cdr-h2和含有氨基酸序列sgspyyrydd(seq id no:26)的cdr-h3；并且vl结构域包含含有氨基酸序列rasstvnstylh(seq id no:28)的cdr-l1、含有氨基酸序列gssnlas(seq id no:29)的cdr-l2和含有氨基酸序列qqysgyplt(seq idno:30)的cdr-l3。在一些实施方案中，vh结构域包含含有氨基酸序列tnamn(seq id no:32)的cdr-h1、含有氨基酸序列rirsksnnyatyyadsvkd(seq id no:33)的cdr-h2和含有氨基酸序列ggsywyfdv(seq id no:34)的cdr-h3；并且vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivnsngntyle(seq id no:36)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:37)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgshvpwt(seq id no:38)的cdr-l3。

3、在一些实施方案中，jak抑制剂抑制jak1和/或jak2。在一些实施方案中，jak抑制剂抑制jak1和/或jak3。在一些实施方案中，jak抑制剂是鲁索替尼或托法替尼。在一些实施方案中，抗体是人源化抗体。在一些实施方案中，vh结构域包含氨基酸序列evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfssfgmhwvrqapgkg lewvayinggsstifyanavkgrftisrdnakntlylqmnslraedtavyycaryasygggamdywgqgtlvtvss(seq id no:4)。在一些实施方案中，vl结构域包含氨基酸序列diqmtqspsslsasvgdrvtitcrssqsivhndgntyfewyqqkp gkapklliykvsnrfsgvpsrfsgsgsgthftltisslqpedfatyy cfqgsyvpltfgqgtkveik(seq id no:3)。在一些实施方案中，重链还包含抗体恒定结构域。在一些实施方案中，恒定结构域是人igg4恒定结构域。在一些实施方案中，恒定结构域是在位置228处包含s228p氨基酸取代的人igg4恒定结构域，其中编号是根据eu编号。在一些实施方案中，轻链是人κ或λ轻链。在一些实施方案中，重链包含seq id no:2的氨基酸序列。在一些实施方案中，vh结构域包含seq id no:27的氨基酸序列的vh结构域序列，并且/或者vl结构域包含seq id no:31的氨基酸序列的vl结构域序列。在一些实施方案中，重链包含seq id no:27的氨基酸序列，并且/或者轻链包含seq id no:31的氨基酸序列。在一些实施方案中，vh结构域包含seq id no:35的氨基酸序列的vh结构域序列，并且/或者vl结构域包含seq id no:39的氨基酸序列的vl结构域序列。在一些实施方案中，重链包含seq id no:35的氨基酸序列，并且/或者轻链包含seq id no:39的氨基酸序列。在一些实施方案中，特异性结合至人psgl-1的抗体包含seq id no:23的氨基酸序列。在一些实施方案中，轻链包含seq id no:1的氨基酸序列。

4、在一些实施方案中，t细胞介导的炎症性疾病是移植物抗宿主病(gvhd)。在一些实施方案中，t细胞介导的炎症性疾病是急性gvhd或慢性gvhd。在一些实施方案中，t细胞介导的炎症性疾病是类固醇难治性急性gvhd(sr-agvhd)或治疗难治性急性gvhd(tr-agvhd)。在一些实施方案中，t细胞介导的炎症性疾病选自由以下组成的组：皮肤病症、多发性硬化症、类风湿性关节炎、幼年型关节炎、i型糖尿病、狼疮、炎症性肠病、克罗恩氏病、重症肌无力、免疫球蛋白肾病、心肌炎和自身免疫性甲状腺病症。在一些实施方案中，癌症是t细胞介导的癌症。在一些实施方案中，癌症是t细胞白血病或t细胞淋巴瘤。在一些实施方案中，人psgl-1包含seq id no:11或seq id no:22的氨基酸序列。在一些实施方案中，受试者是人。在一些实施方案中，抗体通过静脉内输注施用。在一些实施方案中，jak抑制剂口服施用。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，jak抑制剂在施用抗体之前、之后或同时施用于受试者。在一些实施方案中，在施用抗体和jak抑制剂之前，受试者已经用皮质类固醇进行了治疗。在一些实施方案中，施用抗体和jak抑制剂使得受试者中t细胞介导的炎症性疾病的一种或多种症状减轻。

5、在另一方面，本文提供了一种特异性结合至人psgl-1的抗体，所述抗体用于治疗或预防受试者的t细胞介导的炎症性疾病或癌症的方法中，例如，根据上述实施方案中的任一个。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的抗体与janus激酶(jak)抑制剂的组合。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列sfgmh(seq id no:8)的cdr-h1、含有氨基酸序列yinggsstifyanavkg(seq id no:9)的cdr-h2和含有氨基酸序列yasygggamdy(seq id no:10)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivhndgntyfe(seq id no:5)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:6)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgsyvplt(seq id no:7)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中vh结构域包含含有氨基酸序列ayyih(seq id no:24)的cdr-h1、含有氨基酸序列rvnpntggt synpkfkg(seq id no:25)的cdr-h2和含有氨基酸序列sgspy yrydd(seq id no:26)的cdr-h3；并且所述vl结构域包含含有氨基酸序列rasstvnstylh(seq id no:28)的cdr-l1、含有氨基酸序列gssnlas(seq id no:29)的cdr-l2和含有氨基酸序列qqysgyplt(seq id no:30)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列tnamn(seq id no:32)的cdr-h1、含有氨基酸序列rirsksnnyatyyadsvkd(seq id no:33)的cdr-h2和含有氨基酸序列ggsywyfdv(se q id no:34)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivnsngntyle(seq id no:36)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:37)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgshvpwt(seq id no:38)的cdr-l3。

6、在另一方面，本文提供了特异性结合至人psgl-1的抗体在制造用于治疗或预防t细胞介导的炎症性疾病或癌症的药物中的用途；其中所述抗体将与janus激酶(jak)抑制剂组合施用。在另一方面，本文提供了特异性结合至人psgl-1的抗体和janus激酶(jak)抑制剂在制造用于治疗或预防t细胞介导的炎症性疾病或癌症的药物中的用途。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列sfgmh(seq id no:8)的cdr-h1、含有氨基酸序列yinggsstifyanavkg(seq id no:9)的cdr-h2和含有氨基酸序列yasygggamdy(seq id no:10)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivhndgntyfe(seq id no:5)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:6)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgsyvplt(seq id no:7)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中vh结构域包含含有氨基酸序列ayyih(seq id no:24)的cdr-h1、含有氨基酸序列rvnpntggtsynpkf kg(seq id no:25)的cdr-h2和含有氨基酸序列sgspyyrydd(seq id no:26)的cdr-h3；并且所述vl结构域包含含有氨基酸序列rasstvnstylh(seq id no:28)的cdr-l1、含有氨基酸序列gssnlas(seq id no:29)的cdr-l2和含有氨基酸序列qqysgy plt(seq id no:30)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列tnamn(seq id no:32)的cdr-h1、含有氨基酸序列rirsksnnyatyyadsvkd(seq id no:33)的cdr-h2和含有氨基酸序列ggsywyfdv(seq id no:34)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqs ivnsngntyle(seq id no:36)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvs nrfs(seq id no:37)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgshvpwt(seq id no:38)的cdr-l3。

7、在另一方面，本文提供了一种药盒或制品，所述药盒或制品包含特异性结合至人psgl-1的抗体和包装插页，所述包装插页包括使用所述抗体与janus激酶(jak)抑制剂的组合用于治疗或预防受试者中t细胞介导的炎症性疾病或癌症的说明书。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列sfgmh(seq id no:8)的cdr-h1、含有氨基酸序列yinggsstifyanavkg(seq id no:9)的cdr-h2和含有氨基酸序列yasygggamdy(seq id no:10)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivhndgntyfe(seq id no:5)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:6)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgsyvplt(seq id no:7)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中vh结构域包含含有氨基酸序列ayyih(seq id no:24)的cdr-h1、含有氨基酸序列rvnpntggtsynpkfkg(seq id no:25)的cdr-h2和含有氨基酸序列sgspyyrydd(seq id no:26)的cdr-h3；并且所述vl结构域包含含有氨基酸序列rasstvnstylh(seq id no:28)的cdr-l1、含有氨基酸序列gssnlas(seq id no:29)的cdr-l2和含有氨基酸序列qqysgyplt(seq id no:30)的cdr-l3。在一些实施方案中，抗体包含含有重链可变(vh)结构域的重链和含有轻链可变(vl)结构域的轻链；其中所述vh结构域包含含有氨基酸序列tnamn(seq id no:32)的cdr-h1、含有氨基酸序列rirsksnnyatyyadsvkd(seq id no:33)的cdr-h2和含有氨基酸序列ggsywyfdv(seq id no:34)的cdr-h3；并且其中所述vl结构域包含含有氨基酸序列rssqsivnsngntyle(seq id no:36)的cdr-l1、含有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no:37)的cdr-l2和含有氨基酸序列fqgshvpwt(seq id no:38)的cdr-l3。在一些实施方案中，药盒或制品还包含jak抑制剂。

8、应了解，本文所述的各个实施方案的一种、一些或所有特性可组合以形成本发明的其它实施方案。本发明的这些和其它方面对于本领域的技术人员将变得显而易见。