CD137特异性的双环肽配体的制作方法

本发明涉及cd137特异性的双环肽配体。具体地，本发明涉及与分子支架共价结合的多肽，使得两个或多个肽环在与支架的附着点之间相对(subtend)。特别地，本发明描述了作为cd137的高亲和力结合物的肽。本发明还包括包含与一个或多个效应物和/或官能团缀合的所述肽的药物缀合物、包含所述肽配体和药物缀合物的药物组合物、以及所述肽配体和药物缀合物在预防、抑制或治疗cd137介导的疾病或病症中的用途。

背景技术：

1、环肽能够以高亲和力和靶标特异性结合蛋白质靶标，因此对于开发治疗剂是有吸引力的分子类别。实际上，临床上已经成功使用了几种环肽，例如抗菌肽万古霉素、免疫抑制剂药物环孢霉素或抗癌药奥曲肽(driggers等人(2008)，nat rev drug discov 7(7)，608-24)。良好的结合特性是由于肽和靶标之间形成的相对大的相互作用表面以及环结构的构象柔韧性降低。通常，大环结合至数百平方埃的表面，例如环肽cxcr4拮抗剂cvx15(wu等人(2007)，science 330，1066-71)、具有arg-gly-asp基序与整联蛋白αvb3结合的环肽(xiong等人(2002)，science 296(5565)，151-5)或与尿激酶型纤溶酶原激活剂结合的环肽抑制剂upain-1(2；zhao等人(2007)，j struct biol 160(1)，1-10)。

2、由于其环状结构，肽大环比线性肽的柔韧性差，导致与靶标结合后熵损失较小，并导致更高的结合亲和力。与线性肽相比，降低的柔韧性还导致锁定靶标特异性构象，增加结合特异性。这种作用已通过基质金属蛋白酶8(mmp-8)的有效且选择性的抑制剂得到了例证，该抑制剂在开环时失去了对其他mmp的选择性(cherney等人(1998)，j med chem 41(11)，1749-51)。通过大环化获得的有利的结合特性在具有多于一个肽环的多环肽中更为显著，例如在万古霉素、乳链菌肽和放线菌素中。

3、不同的研究团队先前已将具有半胱氨酸残基的多肽附着到合成的分子结构上(kemp和mcnamara(1985)，j.org.chem；timmerman等人(2005)，chembiochem)。meloen及其同事已使用三(溴甲基)苯和相关分子将多个肽环快速定量地环化到合成的支架上，以结构模拟蛋白质表面(timmerman等人(2005)，chembiochem)。在wo 2004/077062和wo 2006/078161中公开了产生候选药物化合物的方法，其中所述化合物通过将含半胱氨酸的多肽连接至分子支架(例如三(溴甲基)苯)而产生。

4、已经开发了基于噬菌体展示的组合方法来产生和筛选针对感兴趣靶标的双环肽的大文库(heinis等人(2009)，nat chem biol 5(7)，502-7和wo2009/098450)。简而言之，在噬菌体上展示包含三个半胱氨酸残基和两个区域的六个随机氨基酸的线性肽(cys-(xaa)6-cys-(xaa)6-cys)的组合文库，并通过将半胱氨酸侧链共价连接至小分子(三(溴甲基)苯)而环化。

技术实现思路

1、根据本发明的第一方面，提供了cd137特异性的肽配体，其包含多肽以及分子支架，所述多肽包含至少三个被至少两个环序列隔开的反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。

2、根据本发明的另一方面，提供了一种药物缀合物，其包含与一个或多个效应物和/或官能团缀合的本文定义的肽配体。

3、根据本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的本文所定义的肽配体或药物缀合物。

4、根据本发明的另一方面，提供了如本文所定义的肽配体或药物缀合物，其用于预防、抑制或治疗由cd137介导的疾病或病症。

技术特征：

1.一种cd137特异性肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在所述分子支架上形成至少两个多肽环。

2.根据权利要求1所述的cd137特异性肽配体，其中所述反应性基团包括半胱氨酸残基或青霉胺。

3.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其中所述环序列包含5或6个氨基酸，例如6个氨基酸。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的cd137特异性肽配体，其包含选自以下的氨基酸序列：

5.根据权利要求1至4中任一项所述的cd137特异性肽配体，其包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，所述两个环序列均由6个氨基酸组成，并且所述cd137特异性肽配体包含选自以下的氨基酸序列：

6.根据权利要求1至4中任一项所述的cd137特异性肽配体，其包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，所述两个环序列中的第一个由6个氨基酸组成，所述两个环序列中的第二个由5个氨基酸组成，并且所述cd137特异性肽配体包含选自以下的氨基酸序列：

7.根据权利要求4或5所述的cd137特异性肽配体，其中，ci-i-e-e-g-q-y-cii-x1-x2-d-x3-y/q-x4-ciii(seq id no：20)所示肽配体包含选自seq id no：1至14中任何一个的氨基酸序列：

8.根据权利要求4或5所述的cd137特异性肽配体，其中ci-d-i-g-p-p-y-cii-y-r/a-d-m/p-y-m-ciii(seq id no：21)所示肽配体包含选自以下的氨基酸序列：

9.根据权利要求4或6所述的cd137特异性肽配体，其中ci-d-e-w-g-l-f/y-cii-i/f-p/a-h-s/p-d-ciii(seq id no：22)所示肽配体包含选自以下的氨基酸序列：

10.根据权利要求4或5所述的cd137特异性肽配体，其中ciiepgpfciiyadpymciii(seq idno：19)所示肽配体包含以下氨基酸序列：

11.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其选自：

12.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其包含n和c末端修饰，并包含选自以下的氨基酸序列：

13.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其包含以下氨基酸序列：

14.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，所述两个环序列均由6个氨基酸组成，并且所述cd137特异性肽配体包含以下氨基酸序列：

15.根据权利要求1或2所述的cd137特异性肽配体，其包含表1、3、4和5中所列的氨基酸序列，但不包括bcy7238、bcy7241、bcy7243和bcy7246的肽。

16.根据权利要求1至3中任一项所述的cd137特异性肽配体，其包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，所述两个环序列均由6个氨基酸组成，并且所述cd137特异性肽配体包含以下氨基酸序列：

17.根据权利要求16所述的cd137特异性肽配体，其中seq id no：266的肽配体选自以下肽的ci至ciii序列(即不存在任何n-末端和c-末端添加)：

18.根据权利要求1至3中任一项所述的cd137特异性肽配体，其包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，所述两个环序列均由6个氨基酸组成，并且所述cd137特异性肽配体包含选自以下的氨基酸序列：

19.根据权利要求18所述的cd137特异性肽配体，其中seq id no：267的肽配体选自以下肽的ci至ciii序列(即不存在任何n-末端和c-末端添加)：

20.根据权利要求1至19中任一项所述的cd137特异性肽配体，其中所述分子支架选自1,1',1”-(1,3,5-三嗪烷-1,3,5-三基)三丙-2-烯-1-酮(tata)。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的cd137特异性肽配体，其中所述药学上可接受的盐选自游离酸或钠、钾、钙、铵盐。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的cd137特异性肽配体，其中所述cd137为人cd137。

23.一种药物缀合物，其包含与一个或多个效应物和/或官能团缀合的权利要求1至22中任一项所定义的cd137特异性肽配体。

24.一种药物缀合物，其包含与一种或多种细胞毒性剂缀合的权利要求1至22中任一项所定义的cd137特异性肽配体。

25.一种药物组合物，其包含权利要求1至22中任一项所述的cd137特异性肽配体或权利要求23或24所定义的药物缀合物，以及联合一种或多种药学上可接受的赋形剂。

26.权利要求1至22中任一项所定义的cd137特异性肽配体或权利要求23或24所定义的药物缀合物，用于预防、抑制或治疗cd137介导的疾病或病症。

技术总结本发明涉及CD137特异性的双环肽配体。具体地，本发明涉及与分子支架共价结合的多肽，使得两个或多个肽环在与支架的附着点之间相对。特别地，本发明描述了作为CD137的高亲和力结合物的肽。本发明还包括药物缀合物，其包含与一个或多个效应物和/或官能团缀合的所述肽，涉及包含所述肽配体和药物缀合物的药物组合物，以及涉及所述肽配体和药物缀合物在预防、抑制或治疗CD137介导的疾病或病症中的用途。技术研发人员：L·陈,R·拉尼,K·麦克唐纳,G·马德,P·帕克受保护的技术使用者：拜斯科技术开发有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/17