使用HLA-A2/WT1xCD3双特异性抗体和4-1BB(CD137)激动剂治疗癌症的制作方法

本发明涉及癌症的治疗，特别地涉及使用hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体和4-1bb(cd137)激动剂对癌症的治疗。

背景技术：

1、t细胞活化双特异性抗体是一类有前景的癌症疗法，旨在让细胞毒性t细胞对抗肿瘤细胞。这种抗体与t细胞上的cd3以及与肿瘤细胞上表达的抗原的同时结合将迫使肿瘤细胞与t细胞之间产生暂时的相互作用，从而引起t细胞的活化和随后的肿瘤细胞的裂解。

2、wt1(wilms肿瘤1，wilms肿瘤蛋白)是一种致癌转录因子，涉及细胞增殖、分化以及细胞凋亡和器官发育，其在正常成人组织中的表达很少(hinrichs和restifo，natbiotechnol(2013)31,999-1008)。然而，据报道，wt1在几种类型的血液恶性肿瘤和广泛的实体瘤中过度表达(van driessche等人，oncologist(2012)17,250-259)。wt1为核蛋白，位于细胞内。细胞内蛋白质可以在蛋白酶体中降解，加工并通过主要组织相容性复合体(mhc)i作为t细胞表位呈递在细胞表面上，并由t细胞受体(tcr)识别。因此，wt1衍生肽在hla-a2环境中呈递在细胞表面上，并且可以触发t细胞识别。

3、wo 2019/122052中已经描述靶向hla-a2/wt1的t细胞活化双特异性抗体。此类t细胞活化双特异性抗体可用于例如治疗急性骨髓性白血病(aml)。hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体("wt1-tcb")目前正在复发性/难治性(r/r)aml患者的i期临床试验中进行研究(augsberger等人,blood(2021)doi:10.1182/blood.2020010477；nct04580121)。

4、针对基于t细胞的免疫疗法的可能的免疫逃逸机制是由骨髓的肿瘤微环境(tme)通过共抑制t细胞或基质细胞，保护白血病细胞免受免疫效应细胞的影响并减少t细胞活化。

5、为了最大限度地提高hla-a2/wt1靶向t细胞活化抗体的治疗效果，例如在aml中，因此需要克服tme的免疫抑制作用。

技术实现思路

技术特征：

1.一种在个体的癌症的治疗中供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体，其中所述治疗包括施用所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体与4-1bb(cd137)激动剂的组合。

2.一种在个体的癌症的治疗中供使用的4-1bb(cd137)激动剂，其中所述治疗包括施用所述4-1bb(cd137)激动剂与hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的组合。

3.hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体在制造用于治疗个体的癌症的药物中的用途，其中所述治疗包括施用所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体与4-1bb(cd137)激动剂的组合。

4.4-1bb(cd137)激动剂在制造用于治疗个体的癌症的药物中的用途，其中所述治疗包括施用所述4-1bb(cd137)激动剂与hla-a2/wt1x cd3双特异性抗体的组合。

5.一种用于治疗个体的癌症的方法，所述方法包括向所述个体施用hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体和4-1bb(cd137)激动剂。

6.一种试剂盒，其包括含有hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的第一药物和含有4-1bb(cd137)激动剂的第二药物，并且任选地进一步包括包装插页，所述包装插页包括针对施用所述第一药物与所述第二药物的组合以用于治疗个体的癌症的说明。

7.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体包含

8.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、用途、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体包含与hla-a2/wt1特异性结合的第三抗原结合部分和/或由第一亚基和第二亚基构成的fc结构域。

9.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体包含

10.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、用途、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的所述第一抗原结合部分包含重链可变区序列和轻链可变区序列，所述重链可变区序列与seq id no:7的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同，所述轻链可变区序列与seq id no:8的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同，且/或所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的所述第二抗原结合部分和(在存在时的)所述第三抗原结合部分包含重链可变区序列和轻链可变区序列，所述重链可变区序列与seq id no:15的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同，所述轻链可变区序列与seq id no:16的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。

11.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的所述第一抗原结合部分为交叉fab分子，其中所述fab轻链和所述fab重链的所述可变区发生交换，并且其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的所述第二抗原结合部分和(在存在时的)所述第三抗原结合部分为常规fab分子，其中在恒定结构域cl中，位置124处的氨基酸独立地被赖氨酸(k)、精氨酸(r)或组氨酸(h)取代(根据kabat编号)，且位置123处的氨基酸独立地被赖氨酸(k)、精氨酸(r)或组氨酸(h)取代(根据kabat编号)，并且在恒定结构域ch1中，位置147处的氨基酸独立地被谷氨酸(e)或天冬氨酸(d)取代(根据kabateu索引编号)，且位置213处的氨基酸独立地被谷氨酸(e)或天冬氨酸(d)取代(根据kabateu索引编号)。

12.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体的所述fc结构域包含促进所述fc结构域的所述第一亚基和所述第二亚基的缔合的修饰，且/或所述fc结构域包含降低与fc受体的结合和/或效应子功能的一个或多个氨基酸取代。

13.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述4-1bb(cd137)激动剂包含4-1bbl的胞外域或其片段，特别是4-1bbl的三个胞外域或其片段。

14.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中4-1bbl的胞外域或其片段包含与选自由seq id no:31、seq id no:32、seq id no:33、seq id no:34、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37和seq id no:38所组成的组的氨基酸序列、特别是seq idno:35的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

15.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述4-1bb(cd137)激动剂包含与肿瘤相关抗原、特别是成纤维细胞活化蛋白(fap)特异性结合的抗原结合部分。

16.根据权利要求15所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中与fap特异性结合的所述抗原结合部分包含：重链可变区(vh)，其包含seq id no:39的重链cdr(hcdr)1、seq id no:40的hcdr2和seqid no:41的hcdr3；以及轻链可变区，其包含seq id no:42的轻链cdr(lcdr)1、seq id no:43的lcdr2和seq id no:44的lcdr3。

17.根据权利要求15或16所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中与fap特异性结合的所述抗原结合部分包含：与seq id no:45的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的重链可变区序列，以及与seq id no:46的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的轻链可变区序列。

18.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述4-1bb(cd137)激动剂包含由第一亚基和第二亚基构成的fc结构域。

19.根据权利要求18所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中4-1bb(cd137)激动剂的所述fc结构域包含促进所述fc结构域的所述第一亚基和所述第二亚基的缔合的修饰，且/或所述fc结构域包含降低与fc受体的结合和/或效应子功能的一个或多个氨基酸取代。

20.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述4-1bb(cd137)激动剂为抗原结合分子，所述抗原结合分子包含

21.根据权利要求20所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中在所述第一多肽的cl结构域中，位置124处的氨基酸独立地被赖氨酸(k)、精氨酸(r)或组氨酸(h)取代(根据kabat编号)，且位置123处的氨基酸独立地被赖氨酸(k)、精氨酸(r)或组氨酸(h)取代(根据kabat编号)；并且在所述第二多肽的ch1结构域中，位置147处的氨基酸独立地被谷氨酸(e)或天冬氨酸(d)取代(根据kabat eu索引编号)，且位置213处的氨基酸独立地被谷氨酸(e)或天冬氨酸(d)取代(根据kabat eu索引编号)。

22.根据权利要求20或21所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述第一多肽包含与seq id no:48的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，所述第二多肽包含与seq id no:49的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，所述第三多肽包含与seq id no:50的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，且所述第四多肽包含与seq id no:51的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

23.根据权利要求1至12中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述4-1bb(cd137)激动剂为抗4-1bb抗体，特别是抗fap/抗4-1bb双特异性抗体。

24.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述癌症为wt1阳性癌症。

25.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的hla-a2/wt1 x cd3双特异性抗体、供使用的4-1bb(cd137)激动剂、用途、用途、方法或试剂盒，其中所述癌症为急性骨髓性白血病(aml)。

26.如前所述的本发明。

技术总结本发明涉及癌症的治疗，特别地涉及使用HLA‑A2/WT1x CD3双特异性抗体和4‑1BB(CD137)激动剂对癌症的治疗。技术研发人员：G·哈内尔,C·克莱因,A-S·诺伊曼,S·M·索布克莱韦受保护的技术使用者：豪夫迈·罗氏有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/18