一种脐带间充质干细胞培养基的制作方法

本发明涉及细胞培养，具体为一种脐带间充质干细胞培养基。

背景技术：

1、脐带间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，并且相较于传统的从骨髓中提取间充质干细胞，其能够避免骨髓提取所带来的一系列问题，诸如随着年龄的老化，骨髓干细胞数目显著降低、增殖分化能力大幅度衰退；骨髓干细胞制备过程不容易质控；移植给异体可能引起免疫反应；取材时对患者有损伤，患者有骨髓疾病时不能采集，即使是健康供者，亦不能抽取太多的骨髓；因此，目前脐带间充质干细胞相较于传统的骨髓间充质干细胞具有更加良好的前景，脐带间充质干细胞的连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。

2、目前的脐带间充质干细胞无血清培养由于营养不如血清全面，可能存在潜在的营养不足，用于培养人脐带间充质干细胞时，存在随着传代、培养时间的延长，会表现增殖、黏附能力下降的问题。

技术实现思路

1、鉴于现有技术中所存在的问题，本发明公开了一种脐带间充质干细胞培养基，采用的技术方案是，包括rpmi培养基、amecell标准培养基、芦可替尼、正常人ab血清、海藻提取物以及小分子化合物perifosine。

2、作为本发明的一种优选技术方案，rpmi培养基和amecell标准培养基的体积比为1:2-3。

3、作为本发明的一种优选技术方案，rpmi培养基包含必须氨基酸、非必须氨基酸、有机物、无机物以及微量元素；amecell标准培养基包含生长因子、激素、微量矿物质、有机化合物、无机化合物、维生素以及必须氨基酸。

4、作为本发明的一种优选技术方案，芦可替尼在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100nm。

5、作为本发明的一种优选技术方案，正常人ab血清占脐带间充质干细胞培养基总体积的百分之22至百分之30之间。

6、作为本发明的一种优选技术方案，海藻提取物在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100g/l，海藻含有一种特殊的蛋白质称为亲糖蛋白，它对特定糖类具有亲和性而与之非共价结合，亲糖蛋白和细胞膜糖分子结合后会造成细胞沉降现象，因此是一种凝集素。

7、作为本发明的一种优选技术方案，小分子化合物perifosine在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100nm。

8、本发明的有益效果：该培养基能够制备脐带间充质干细胞，增殖速度快，数量多，表型稳定，多次传代后，仍能保持多潜能分化能力，通过对培养基组成的调整，有效克服了生长因子半衰期短，体内容易被降解的问题，芦可替尼、海藻提取物以及perifosine具有较好的协同作用，促进培养基对脐带间充质干细胞的体外传代连续培养。

技术特征：

1.一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：包括rpmi培养基、amecell标准培养基、芦可替尼、正常人ab血清、海藻提取物以及小分子化合物perifosine。

2.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述rpmi培养基和amecell标准培养基的体积比为1:2-3。

3.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述rpmi培养基包含必须氨基酸、非必须氨基酸、有机物、无机物以及微量元素。

4.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述amecell标准培养基包含生长因子、激素、微量矿物质、有机化合物、无机化合物、维生素以及必须氨基酸。

5.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述芦可替尼在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100nm。

6.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述正常人ab血清占脐带间充质干细胞培养基总体积的百分之22至百分之30之间。

7.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述海藻提取物在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100g/l。

8.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞培养基，其特征在于：所述小分子化合物perifosine在脐带间充质干细胞培养基中的浓度为50-100nm。

技术总结本发明公开了一种脐带间充质干细胞培养基，该培养基能够制备脐带间充质干细胞，增殖速度快，数量多，表型稳定，多次传代后，仍能保持多潜能分化能力，通过对培养基组成的调整，有效克服了生长因子半衰期短，体内容易被降解的问题，芦可替尼、海藻提取物以及Perifosine具有较好的协同作用，促进培养基对脐带间充质干细胞的体外传代连续培养。技术研发人员：王开聚,王端贺,杨程,杨怀军受保护的技术使用者：上海循源生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/17