从艾叶中分离的化合物及其制备方法和应用

本发明属于抗肿瘤药物领域，尤其涉及从艾叶中分离的化合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、本部分的陈述仅是提供了与本发明相关的背景技术信息，不必然构成在先技术。

2、卵巢癌(ovarian cancer，oc)是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，在所有癌症中占2.1％，卵巢癌复发率和死亡率位于女性生殖道恶性肿瘤之首；子宫颈癌(cervicalcancer，cc)，简称宫颈癌，是最常见的妇科恶性肿瘤之一，是女性恶性肿瘤死亡的第四大原因。尽管临床上卵巢癌和宫颈癌手术、放疗、化疗等治疗技术取得较大进展，但年轻女性卵巢癌和宫颈癌患病率仍在持续增加，严重威胁女性生命健康，因此，寻找新的有效的抗肿瘤药物是当今医学领域的研究重点之一。相关研究发现倍半萜、黄酮类等结构化合物具有不同的生物活性，如抗肿瘤、抗炎、抗疟疾、抗菌等药理作用，是一组有效、低毒的天然小分子。

3、艾artemisia argyi lévl.et.vant.为菊科蒿属植物。蕲艾是来源于湖北省蕲春县的艾叶，是著名道地药材。李时珍在《本草纲目》中记载，“近代惟汤阴者谓之北艾，四明者谓之海艾。自成化以来，则以蕲州者为胜，用充方物，天下重之，谓之蕲艾。”研究发现蕲艾含有萜类、黄酮类、酚酸类、多糖类及香豆素类等多种化学成分，其中萜类化合物具有重要的生理活性和药用价值。

4、但目前从艾叶中分离化合物用于预防或治疗肿瘤相关疾病的研究较少。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供从艾叶中分离的化合物及其制备方法和在制备预防或治疗肿瘤相关疾病中的应用。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明的第一个方面，提供了一种从艾叶中分离的化合物，选自具有以下结构式的化合物：

4、

5、本发明的第二个方面，提供了一种上述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，包括：

6、将艾叶采用60％v/v-80％v/v乙醇溶液加热浸提，将提取液浓缩，得到粗提物；

7、将所述粗提物用水溶解后，依次采用石油醚、乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液浓缩，得粗浸膏；

8、将所述粗浸膏经柱层析和高效液相色谱分离纯化，得到式1-7任一所示的化合物。

9、在一些实施方式中，所述加热浸提的温度为55-65℃，加热提取的时间为8-12h；

10、在一些实施方式中，所述加热浸提的次数为2-4次。

11、在一些实施方式中，所述艾叶和乙醇溶液的固液比为1：14-20，优选的，为1：17。

12、优选的，所述乙醇溶液的浓度为70％v/v。

13、在一些实施方式中，所述柱层析采用正相硅胶柱层析、反相d101型大孔树脂柱层析和凝胶柱层析中的一种或两种。

14、在一些实施方式中，所述柱层析的洗脱体系包括甲醇、二氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯或甲醇-水。

15、在一些实施方式中，所述柱层析的具体方法为：首先将乙酸乙酯萃取部分流经正相硅胶柱层析，然后采用二氯甲烷-甲醇体系按100:0→0:100梯度洗脱，收集各梯度的梯度洗脱液并合并，得到7个组分fr.1-7，分别为fr.1、fr.2、fr.3、fr.4、fr.5、fr.6、fr.7；

16、fr.6经硅胶柱色谱，采用二氯甲烷-甲醇体系按100：0→0：100梯度洗脱后得到6个馏分fr.6-1～fr.6-6；fr.6-5经过凝胶柱色谱分离得到5个馏分fr.6-5-1～fr.6-5-5，fr.6-5-1经hplc制备色谱纯化，得到式1所示的化合物；

17、或，fr.7经硅胶柱色谱，采用二氯甲烷-甲醇体系按100：0→0：100梯度洗脱后得到5个馏分fr.7-1～fr.7-5；

18、fr.7-1经过凝胶柱色谱分离得到3个馏分fr.7-1-1～fr.7-1-3，fr.7-1-1重结晶后，得到式2所示的化合物；

19、或，fr.7-1-2经硅胶柱色谱，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱后，得到式3所示的化合物；

20、或，fr.7-1-3经hplc制备色谱纯化，得到式4所示的化合物；

21、或，fr.7-2经过凝胶柱色谱去除色素后，再经硅胶柱色谱，采用石油醚-乙酸乙酯体系按7：1→1：1梯度洗脱后得到3个馏分fr.7-2-1～fr.7-2-3；

22、fr.7-2-1经hplc制备色谱纯化，得到式5-7所示的化合物。

23、在一些实施方式中，高效液相色谱采用反相c18柱，洗脱体系为甲醇-水或乙腈-水，流速为2-3ml/min，柱温：20-30℃，每次进样量：20-100μl，采用紫外检测器，检测波长为210nm和254nm。

24、本发明的第三个方面，提供了上述的化合物或上述的方法制备的化合物在制备预防或治疗肿瘤相关疾病的药物中的应用。

25、在一些实施方式中，所述肿瘤包括：卵巢癌、宫颈癌；

26、在一些实施方式中，肿瘤细胞包括人卵巢癌a2780细胞、人卵巢癌skov3细胞、人子宫颈癌c-33a细胞、人子宫颈鳞癌siha细胞。

27、本发明的有益效果

28、(1)本发明提供7种新的艾叶中分离的化合物5-hydroxymellein、artecanin、3-o-methyl-iso-secotanapartholide、3-methoxytanapartholide、canin、artanomalide c、guaianolide，结构分别如式1-7所示，填补了现有技术的空白，也进一步拓展了蕲艾的新应用。

29、(2)本发明提供该类化合物的制备方法操作简单，稳定性良好；原料易得，易于操作，收率高，适于工业化生产。

30、(3)本发明提供的艾叶中分离的化合物在40μm的情况下，有效抑制卵巢癌、宫颈癌细胞的生长，可以用作制备抗肿瘤的药物。

31、本发明附加方面的优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

技术特征：

1.一种从艾叶中分离的化合物，其特征在于，选自具有以下结构式的化合物：

2.一种权利要求1所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，包括：

3.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，所述加热浸提的温度为55-65℃，加热提取的时间为8-12h；

4.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，所述艾叶和乙醇的固液比为1：14-20，或1：17；

5.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，所述柱层析采用正相硅胶柱层析、反相d101型大孔树脂柱层析和凝胶柱层析中的一种或两种。

6.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，所述柱层析的洗脱体系包括甲醇、二氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯或甲醇-水。

7.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，所述柱层析的具体方法为：首先将乙酸乙酯萃取部分流经正相硅胶柱层析，然后采用二氯甲烷-甲醇体系按100:0→0:100梯度洗脱，收集各梯度的梯度洗脱液并合并，得到7个组分fr.1-7，分别为fr.1、fr.2、fr.3、fr.4、fr.5、fr.6、fr.7；

8.如权利要求2所述的从艾叶中分离的化合物的制备方法，其特征在于，高效液相色谱采用反相c18柱，洗脱体系为甲醇-水或乙腈-水，流速为2-3ml/min，柱温：20-30℃，每次进样量：20-100μl，采用紫外检测器，检测波长为210nm和254nm。

9.权利要求1所述的化合物或权利要求2-8任一项所述的方法制备的化合物在制备预防或治疗肿瘤相关疾病的药物中的应用。

10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括：卵巢癌、宫颈癌；

技术总结本发明属于抗肿瘤药物领域，涉及从艾叶中分离的化合物及其制备方法和应用。本发明中提供的从艾叶中分离的化合物1‑7，具有以下结构式：从艾叶中分离的化合物1‑7对多种癌细胞具有抑制作用，表现为40μM浓度的情况下可有效抑制肿瘤细胞的生长，具有良好的实际应用之价值。技术研发人员：刘大会,刘贻天,桂春,喻天平受保护的技术使用者：湖北中医药大学技术研发日：技术公布日：2024/11/14