一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法

本发明涉及高活性功能食品，特别涉及一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法。

背景技术：

1、黄精属(polygonatum)为百合科中的一个属，全球大约有50种，其中中国有31种，分布广泛，其根药性平和润燥，味甘而淡，无毒且能杀虫，可补中益气、定肝胆、润心肺。现代研究证明，黄精具有多糖、皂苷、生物碱、黄酮等活性成分，具有提高免疫、抗氧化、延缓衰老、抗炎、抗肿瘤等多种功效。黄精属具有多成分、弱效应、协调整合作用特点，其药理作用是多种成分共同产生的综合效应。云南省是一个天然的药源库，云南省黄精品种甚多，境内黄精属有12种，常以滇黄精(polygonatum kingianum)为主。滇黄精是富含多糖、皂苷、黄酮、生物碱等活性成分，在调节免疫力、抗氧化、降血糖、抗衰老、抗炎等方面效果良好。当前，可供食用的微生物菌种资源十分丰富，包括真菌类、细菌类以及微型藻类和放线菌等，其中一些具有优异代谢功能和保健作用的微生物具备广阔的开发前景，通过对新功能菌株的不断筛选，极大得丰富了可食用微生物菌种资源。目前，已有植物活性物质与菌株联合使用以提高功效的相关研究。如sorrenti等(beneficial effects of pomegranate peelextract and probiotics on pre-adipocyte differentiation)发现益生菌和含多酚石榴提取物的协同作用可能影响体外脂肪形成，并可能有助于开发新的营养/益生菌疗法来预防和治疗肥胖。但是，不同菌株和植物提取物的免疫激活和调节机制各异，若植物提取物和菌株组合恰当，能达到改善肠道微生态群系平衡和提高机体的免疫力的目的；若是组合不当，可能产生拮抗作用。本发明从常见食源发酵菌中筛选得到具优异活性的三种食用菌株，将其发酵上清液与滇黄精提取物复配，制备具有抗炎作用的滇黄精后生元，对滇黄精资源的开发利用和后生元产品的发展具有较重要的意义。

技术实现思路

1、对此，本发明提供了一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，制备步骤包括：

2、(1)滇黄精提取物的制备：将滇黄精鲜样洗净切片后冻干粉碎，过60目筛；过筛粉末加入乙醇水溶液中，60℃超声提取，提取完成后抽滤，取上清液，滤渣重复上述抽提工序，合并两次滤液，减压浓缩，冷冻干燥，得滇黄精提取物，2℃低温避光保存；

3、(2)无细胞上清液的制备：将菌株在培养基中培养后离心收集菌体，菌体用磷酸缓冲盐溶液洗涤2～3次，再重悬于磷酸缓冲盐溶液中，孵育；然后菌悬液离心，滤膜过滤，取上清液，得无细胞上清液；

4、(3)将所述滇黄精提取物与所述无细胞上清液复配，复配液2℃保存，获得所述滇黄精后生元。

5、进一步地，所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为80％，所述过筛粉末加入乙醇水溶液中的质量比为过筛粉末：乙醇水溶液＝1:20。

6、进一步地，60℃超声提取60min以上。

7、进一步地，所述菌株为嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌按1:1复配菌株，或红色红曲霉菌株。

8、进一步地，菌体重悬于磷酸缓冲盐溶液中的浓度为：细菌浓度为1×109cfu/ml，真菌浓度为1×109个/ml；孵育24h。

9、进一步地，采用0.22μm滤膜过滤。

10、进一步地，所述滇黄精提取物与所述无细胞上清液复配比例为：滇黄精提取物与嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌培养无细胞上清液按体积比滇黄精提取物：无细胞上清液＝3:1的比例复配；滇黄精提取物与红色红曲霉培养无细胞上清液按体积比滇黄精提取物：无细胞上清液＝2:1的比例复配。

11、本发明的有益效果在于：本发明所述复配物的dpph自由基清除能力、abts阳离子自由基清除能力、对no的抑制作用和促吞噬能力，均强于单一样品。复配物功能活性增强的原因可能是羧酸及其衍生物、脂肪酰基类、苯及其衍生物、甘油磷脂等类别中的代谢物发现了显著变化。

技术特征：

1.一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，制备步骤包括：

2.根据权利要求1所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为80％，所述过筛粉末加入乙醇水溶液中的质量比为过筛粉末：乙醇水溶液＝1:20(g:ml)。

3.根据权利要求1所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，60℃超声提取60min以上。

4.根据权利要求1所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，所述菌株为嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌按1:1复配菌株，或红色红曲霉菌株。

5.根据权利要求1所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，菌体重悬于磷酸缓冲盐溶液中的浓度为：细菌浓度为1×109cfu/ml，真菌浓度为1×109个/ml；孵育24h。

6.根据权利要求1所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，采用0.22μm滤膜过滤。

7.根据权利要求4所述的一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，其特征在于，所述滇黄精提取物与所述无细胞上清液复配比例为：滇黄精提取物与嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌培养无细胞上清液按体积比滇黄精提取物：无细胞上清液＝3:1的比例复配；滇黄精提取物与红色红曲霉培养无细胞上清液按体积比滇黄精提取物：无细胞上清液＝2:1的比例复配。

技术总结本发明公开了一种具抗炎作用的滇黄精后生元的制备方法，步骤包括：(1)将滇黄精鲜样洗净切片后冻干粉碎，过60目筛；过筛粉末加入乙醇水溶液中，60℃超声提取，提取完成后抽滤，取上清液，滤渣重复上述抽提工序，合并两次滤液，减压浓缩，冷冻干燥，得滇黄精提取物，2℃低温避光保存；(2)将菌株在培养基中培养后离心收集菌体，菌体用磷酸缓冲盐溶液洗涤2～3次，再重悬于磷酸缓冲盐溶液中，孵育；然后菌悬液离心，滤膜过滤，取上清液，得无细胞上清液；(3)将滇黄精提取物与无细胞上清液复配，复配液2℃保存，获得滇黄精后生元。本发明所述复配物的DPPH自由基清除能力、ABTS阳离子自由基清除能力、对NO的抑制作用和促吞噬能力，均强于单一样品。技术研发人员：王振兴,何霞红,方越,张雪春,杨金梅,孙健,何雪梅受保护的技术使用者：西南林业大学技术研发日：技术公布日：2024/11/18