基于FASI-MSS在线富集检测抗高血压药物的方法

本发明涉及抗高血压药物富集检测领域，特别是涉及基于fasi-mss在线富集检测抗高血压药物的方法。

背景技术：

1、血管紧张素转化酶抑制剂(acei)具有降压作用，可以延缓和逆转心室重构，阻止心肌肥厚的进一步发展，改善血管内皮功能和心功能，减少心律失常的发生，还能提高生存率，改善预后。

2、卡托普利、贝那普利和赖诺普利均属于血管紧张素转换酶抑制剂类抗高血压药物，它们通过阻止血管紧张素i向血管紧张素ii的转化，降低血管紧张素ii的产生从而起到治疗效果。

3、目前，对于血管紧张素转换酶抑制剂类抗高血压药物检测已有不少文献报道。常用检测方法有基于高效液相色谱(hplc)分离技术联用紫外(uv)检测、电化学方法、毛细管电泳法(ce)等。在这些检测方法中，基于hplc的方法分析灵敏度高且性能较好，但在使用时样品和有机溶剂的消耗量很大，不符合绿色化学观念。电化学方法的检测灵敏度也很高，但无法用于混合药物的分离检测。毛细管的光程较短且样品注入体积较小，当与uv及dad(二极管阵列)检测器进行联用时，会导致检测灵敏度相对较低，这在实际样品检测中是一个劣势，限制了ce在痕量分析中的应用。

4、因此，开发一种不仅符合绿色化学观念，还具有高灵敏度，而且能用于抗高血压混合药物的分离检测的方法，则显得尤为重要。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明的目的在于提供基于fasi-mss在线富集检测抗高血压药物的方法，该方法不仅符合绿色化学观念，还具有高灵敏度，而且能用于抗高血压混合药物的分离检测。

2、为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、第一方面，提供基于fasi-mss在线富集检测抗高血压药物的方法，所述方法包括以下步骤：

4、s1.目标分析物样品制备：

5、取空白尿样置于离心管中，加入卡托普利、贝那普利和赖诺普利的混合标准溶液，加入乙酸乙酯萃取，离心分离后将上层的乙酸乙酯层取出，空气流吹干，最后用水溶解，得到目标分析物样品；

6、s2.毛细管柱预处理：

7、新的毛细管柱在使用前，先用超纯水冲洗，再用naoh过夜处理；

8、毛细管柱在首次进样前，在20psi的压力下依次用超纯水冲洗和1mol/lnaoh冲洗、用超纯水冲洗、用hdmb溶液冲洗、用超纯水冲洗、用bge冲洗；

9、s3.目标分析物样品富集：

10、先在压力为0.5psi、时间为60s的条件下注入胶束溶液；

11、再在压力为0.5psi、时间为5s的条件下进样第一量的目标分析物样品；

12、最后在压力为-10kv、时间为90s的条件下电动进样第二量的目标分析物样品；

13、s4.目标分析物样品检测：

14、在分离电压为-20kv、毛细管柱温度为25℃、检测波长为214nm的条件下进行目标分析物样品的分离和检测。

15、优选的，所述第一量可根据公式计算，其中，r为毛细管内半径，△p为通过毛细管截面的压差，c为目标分析物样品浓度，η为bge的粘度，l为毛细管长度，t为目标分析物样品的迁移时间。

16、所述第二量可根据公式计算，其中，r为毛细管内半径，einj为进样电压，tinj为进样时间，esep为分离电压，l为毛细管长度，t为目标分析物样品的迁移时间。

17、优选的，还包括以下步骤：

18、冲洗毛细管柱：

19、毛细管柱在两次进样之间，在20psi的压力下依次用超纯水冲洗3min、用hdmb溶液冲洗3min、用超纯水冲洗3min、用bge冲洗3min。

20、优选的，所述bge为含有体积百分比为40％甲醇的75mmol/l nh4hco3溶液，所述bge的ph值由hcl和naoh调节。

21、优选的，所述胶束溶液为含有[c14mim]br的nh4hco3溶液。

22、更优选的，所述胶束溶液为含有8mmol/l[c14mim]br的25mmol/lnh4hco3溶液。

23、在本发明中，hdmb表示海美溴铵，bge表示背景电解质。

24、优选的，所述抗高血压药物为血管紧张素转换酶抑制剂，所述血管紧张素转换酶抑制剂包括卡托普利、贝那普利和赖诺普利。

25、优选的，所述卡托普利的富集倍数为130，所述贝那普利的富集倍数为155，所述赖诺普利的富集倍数为250。

26、第二方面，提供本发明所述的方法在富集检测抗高血压药物中的应用。

27、第三方面，提供本发明所述的方法在富集检测血管紧张素转换酶抑制剂中的应用。

28、第四方面，提供本发明所述的方法在富集检测卡托普利、贝那普利和/或赖诺普利中的应用。

29、相对于现有技术，本发明的有益效果在于：

30、本发明建立了一种场放大进样(fasi)结合胶束溶剂堆积(mss)的在线双富集方法，用于毛细管电泳法分离检测三种血管紧张素转换酶抑制剂(卡托普利、贝那普利、赖诺普利)。本发明方法对卡托普利的富集倍数为130，对卡托普利的检出限为13.9ng·ml-1，对卡托普利的定量限为30ng·ml-1；对贝那普利的富集倍数为155，对贝那普利的检出限为4.8ng·ml-1，对贝那普利的定量限为7.5ng·ml-1；对赖诺普利的富集倍数为250，对赖诺普利的检出限为16.1ng·ml-1，对赖诺普利的定量限为30ng·ml-1。

31、本发明方法将fasi-mss在线双重富集技术用于ce-uv法中，对三种血管紧张素转化酶抑制剂(卡托普利、贝那普利、赖诺普利)类抗高血压药物进行分离和检测，详细考察了影响在线富集、分离和检测的因素，与常规的进样方法相比，富集倍数分别达到133、155和250，显著提高了检测的灵敏度。同时，该方法具有简单、灵敏度高、快速的优点，还能够用于实际样品的分析，这为临床药物分析提供了一种可能的新方法。

32、本发明方法可成功应用于尿样中卡托普利、贝那普利和赖诺普利的富集检测，回收率在88.7％-110.4％范围内，迁移时间和峰面积的日内和日间重现性低于6.0％(rsds，n＝5)，验证了本发明方法的适用性和可行性。

33、此外，本发明基于fasi-mss在线富集检测抗高血压药物的方法在使用时样品和有机溶剂的消耗量很小，符合绿色化学观念。

技术特征：

1.基于fasi-mss在线富集检测抗高血压药物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述bge为含有体积百分比为40％甲醇的75mmol/l nh4hco3溶液，所述bge的ph值由hcl和naoh调节。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胶束溶液为含有[c14mim]br的nh4hco3溶液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述胶束溶液为含有8mmol/l[c14mim]br的25mmol/l nh4hco3溶液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗高血压药物为血管紧张素转换酶抑制剂，所述血管紧张素转换酶抑制剂包括卡托普利、贝那普利和赖诺普利。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述卡托普利的富集倍数为130，所述贝那普利的富集倍数为155，所述赖诺普利的富集倍数为250。

8.权利要求1所述的方法在富集检测抗高血压药物中的应用。

9.权利要求1所述的方法在富集检测血管紧张素转换酶抑制剂中的应用。

10.权利要求1所述的方法在富集检测卡托普利、贝那普利和/或赖诺普利中的应用。

技术总结本发明涉及抗高血压药物富集检测领域，特别是涉及基于FASI‑MSS在线富集检测抗高血压药物的方法。本发明提供基于FASI‑MSS在线富集检测抗高血压药物的方法，包括以下步骤：S1.目标分析物样品制备；S2.毛细管柱预处理；S3.目标分析物样品富集；S4.目标分析物样品检测。本发明方法不仅符合绿色化学观念，还具有高灵敏度，而且能用于抗高血压混合药物的分离检测。技术研发人员：徐蕾,袁思宇,李奕萱,赵明,时志春,李军受保护的技术使用者：齐齐哈尔大学技术研发日：技术公布日：2024/11/21