一种微生物制剂载体液、微生物及酶制剂固体颗粒以及提高冬虫夏草寄主感染率的方法与流程

本发明涉及食药用菌栽培，尤其涉及一种微生物制剂载体液、微生物及酶制剂固体颗粒以及提高冬虫夏草寄主感染率的方法。

背景技术：

1、冬虫夏草是我国传统的名贵中药材，与人参、鹿茸被誉为中华医学三大宝。冬虫夏草是由冬虫夏草菌侵染蝙蝠蛾幼虫形成的僵虫与真菌子座复合体。冬虫夏草生境特殊(仅在高海拔高寒草甸环境自然繁衍)，生长速度缓慢，周期较长，自然资源极为有限。

2、近年来，通过模拟青藏高原生态环境，利用冬虫夏草菌侵染蝙蝠蛾幼虫成功培育出冬虫夏草。目前冬虫夏草主要是通过液体发酵制备冬虫夏草菌芽生孢子，经过喷洒、饲喂和注射等方式感染蝙蝠蛾幼虫，其中喷洒和饲喂的操作最为简便，然而感染所需周期较长，原因可能与菌种单一有关。在自然环境中冬虫夏草的形成并不是由单一的冬虫夏草菌侵染导致，而是由多种微生物协同病原真菌浸染寄主昆虫。比如，李玉玲等在接种时添加蝙蝠蛾幼虫肠道真菌混合菌种(ch1和ch2)可以提高侵染率和缩短僵化时间(李玉玲,姚艺桑,张宗豪,刘欣,徐海峰,马少丽,吴子媺,朱佳石,蝙蝠蛾幼虫肠道真菌复合体中的多菌种与中国被毛孢分生孢子联合侵染蝙蝠蛾幼虫提高侵染效能.[j].菌物研究,2016,14(2):96-112.)。谢放等研究2个菌株进行混合侵染试验，结果表明联合侵染并不能提高侵染率和缩短死亡时间(谢放,陈照禾,朱玉兰等.六株冬虫夏草相关菌对蝙蝠蛾幼虫侵染特性的研究[j].应用昆虫学报,2021,58(06):1312-1321.)。因此冬虫夏草相关菌的侵染还处于探索之中。

3、现有技术中公开的常用侵染方式为喷洒和饲喂的方式，但由于中国被毛孢直接暴露于空气及土壤中，菌种的活力不能很好维持，加之菌种单一，导致芽生孢子停滞蝙蝠蛾幼虫体内的时间短、感染概率低，无法短时间内稳定寄生。

4、基于此，提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种微生物制剂载体液、微生物及酶制剂固体颗粒以及提高冬虫夏草寄主感染率的方法，该微生物及酶制剂固体颗粒可以缩短感染周期，提高对蝙蝠蛾幼虫的感染率。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种微生物制剂载体液，包括如下质量份数的组分：琼脂粉0.1～0.2份，蔗糖0.05～0.25份，蕨麻提取物0.1～0.5份，水4～7份。

4、本发明还提供了所述的微生物制剂载体液的制备方法，包括如下步骤：将琼脂粉、蔗糖、蕨麻提取物、水混合，得到微生物制剂载体液。

5、本发明还提供了一种微生物及酶制剂固体颗粒，包括如下组分：微生物制剂载体液、冬虫夏草菌芽生孢子泥和酶制剂；

6、所述微生物制剂载体液为所述的微生物制剂载体液。

7、作为优选，冬虫夏草菌芽生孢子泥和微生物制剂载体液的质量体积比为0.003～0.007g：1ml；

8、酶制剂和微生物制剂载体液的质量体积比为0.005～0.015g：1ml。

9、作为优选，所述酶制剂为脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶和溶菌酶中的一种或多种。

10、作为优选，所述冬虫夏草菌芽生孢子泥的制备方法包括如下步骤：将冬虫夏草菌接种到液体培养基中，暗培养30～50d，过滤，得到冬虫夏草菌芽生孢子液；将冬虫夏草菌芽生孢子液进行离心，取沉淀，得到冬虫夏草菌芽生孢子泥。

11、本发明还提供了所述的微生物及酶制剂固体颗粒的制备方法，包括如下步骤：

12、(1)在35～45℃下，将微生物制剂载体液和酶制剂混合，得到混合物；

13、(2)在28～30℃下，将混合物和冬虫夏草菌芽生孢子泥混合，冷却至15～20℃，粉碎，得到微生物及酶制剂固体颗粒。

14、作为优选，所述粉碎的温度为10～15℃；所述粉碎的粒径为0.5～2.0mm。

15、本发明还提供了一种提高冬虫夏草寄主感染率的方法，包括如下步骤：

16、1)将微生物及酶制剂固体颗粒和饲料混合，得到复合饲料；

17、2)使用所述的复合饲料喂养蝙蝠蛾幼虫进行感染；

18、所述微生物及酶制剂固体颗粒为所述的微生物及酶制剂固体颗粒。

19、作为优选，所述微生物及酶制剂固体颗粒和饲料混合的质量比为1～5：100；

20、所述饲料包括珠芽蓼、圆穗蓼、胡萝卜和小大黄中的一种或多种。

21、本发明的有益效果：

22、本发明的微生物及酶制剂固体颗粒可以避免菌种及酶制剂直接暴露于空气及土壤中，与现有技术将冬虫夏草菌种直接喷淋虫体或者拌入饲料相比，本发明将微生物制剂载体液，酶制剂和冬虫夏草菌进行复配，有助于保持菌种及酶制剂的活性，从而有效解决冬虫夏草菌对蝙蝠蛾幼虫感染率低下的问题；

23、冬虫夏草菌和酶制剂的协同使用，不仅可以快速突破幼虫体壁屏障，达到缩短感染周期及提高幼虫感染率的目的；还有助于冬虫夏草菌快速定殖于寄主幼虫体腔内，从而降低损耗，提高感染效率；

24、本发明的微生物及酶制剂固体颗粒可以直接与饲料混合进行饲喂，在使用上更为方便，适合规模养殖场使用，而且包装和生产成本较低。因此，本发明实施简便、经济，适合大规模应用推广。

技术特征：

1.一种微生物制剂载体液，其特征在于，包括如下质量份数的组分：琼脂粉0.1～0.2份，蔗糖0.05～0.25份，蕨麻提取物0.1～0.5份，水4～7份。

2.权利要求1所述的微生物制剂载体液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将琼脂粉、蔗糖、蕨麻提取物、水混合，得到微生物制剂载体液。

3.一种微生物及酶制剂固体颗粒，其特征在于，包括如下组分：微生物制剂载体液、冬虫夏草菌芽生孢子泥和酶制剂；

4.根据权利要求3所述的微生物及酶制剂固体颗粒，其特征在于，冬虫夏草菌芽生孢子泥和微生物制剂载体液的质量体积比为0.003～0.007g：1ml；

5.根据权利要求4所述的微生物及酶制剂固体颗粒，其特征在于，所述酶制剂为脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶和溶菌酶中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的微生物及酶制剂固体颗粒，其特征在于，所述冬虫夏草菌芽生孢子泥的制备方法包括如下步骤：将冬虫夏草菌接种到液体培养基中，暗培养30～50d，过滤，得到冬虫夏草菌芽生孢子液；将冬虫夏草菌芽生孢子液进行离心，取沉淀，得到冬虫夏草菌芽生孢子泥。

7.权利要求3～6任意一项所述的微生物及酶制剂固体颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述粉碎的温度为10～15℃；所述粉碎的粒径为0.5～2.0mm。

9.一种提高冬虫夏草寄主感染率的方法，其特征在于，包括如下步骤：

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述微生物及酶制剂固体颗粒和饲料混合的质量比为1～5：100；

技术总结本发明涉及食药用菌栽培技术领域，尤其涉及一种微生物制剂载体液、微生物及酶制剂固体颗粒以及提高冬虫夏草寄主感染率的方法。本发明提供了一种微生物制剂载体液，包括如下组分：琼脂粉，蔗糖，蕨麻提取物，水；该微生物制剂载体液和冬虫夏草菌芽生孢子泥、酶制剂可以制备得到一种微生物及酶制剂固体颗粒。使用本发明的微生物及酶制剂固体颗粒不仅可以快速突破蝙蝠蛾幼虫体壁屏障，达到缩短感染周期及提高蝙蝠蛾幼虫感染率的目的；还有助于冬虫夏草菌快速定殖于寄主蝙蝠蛾幼虫体腔内，从而降低损耗，提高感染效率。技术研发人员：陶军,张仲军,雷小刚受保护的技术使用者：天水众兴菌业科技股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/12/2