聚多卡醇在构建视网膜静脉阻塞的动物模型中的用途以及一种视网膜静脉阻塞的动物模型的构建方法与流程

本发明涉及聚多卡醇在构建视网膜静脉阻塞的动物模型中的用途以及一种视网膜静脉阻塞的动物模型的构建方法，属于医药。

背景技术：

1、视网膜静脉阻塞（retinal vein occlusion, rvo）是导致视力丧失的第二大血管性疾病，其发病率仅次于糖尿病性视网膜病变。在疾病早期常表现为受累静脉迂曲、淤血、扩张、视网膜出血水肿和大片无灌注区形成，进展到后期常因黄斑囊样水肿、玻璃体积血和新生血管性青光眼等并发症导致视力急剧下降甚至失明。临床上，按照血管阻塞部位，rvo可分为视网膜中央静脉阻塞（central retinal vein occlusion, crvo）和视网膜分支静脉阻塞（branch retinal vein occlusion, brvo）。rvo的发病机制尚不完全明确，无确切用于治疗血管内血栓的药物。目前眼科临床常用的治疗方法主要为对症治疗（如视网膜激光光凝、玻璃体切割术、玻璃体腔注射激素或抗血管内皮生长因子药物等），但这些治疗会造成视网膜受损，增加眼内炎、白内障、青光眼等的患病风险。

2、现有rvo模型的建立方法主要有以下几种：血管结扎法、透热法、玻璃体腔内注射内皮素-1（et-1）法、激光光凝封闭视网膜静脉法、光敏药物静脉注射联合激光光凝法。血管结扎法通过灼烧并结扎视网膜中央静脉造成视网膜静脉回流不畅，其血管再通时间久，但是造模过程复杂，技术难度高、破坏性大且术后易发生感染致动物死亡。透热法可精准的定位血管，通过电热引起血管收缩、损伤血管，即刻阻塞血管，但该法是利用电热能将血管封闭，破坏血管内皮，与人rvo形成机制不同，对临床的指导意义尚需进一步研究。内皮素-1是一种强有力的血管收缩肽，玻璃体腔内注射不同浓度的et-1引发的血管反应不同。适当浓度的et-1造成的rvo是由于血管严重痉挛造成的，仅适合进行视网膜缺血猴电生理改变的研究。激光光凝封闭视网膜静脉法是一种无创操作，经三面镜将激光直接击射在拟阻塞的血管处，利用热能使照射的血管阻塞，但阻塞的血管再通率较高、再通时间较早，需多次反复光凝，易造成视网膜色素上皮细胞和感光细胞严重的热损伤，常伴有因血管壁损伤造成的玻璃体出血而影响眼底观察。光敏药物静脉注射联合激光光凝法，是将光敏药物注入静脉后，激光照射欲阻断的视网膜血管，在光敏药物与照射激光的共同作用下形成rvo模型，该法即刻成模，阻塞血管约7天左右再通，但激光光凝对眼球的损伤与眼底色素的多少有关，受照射组织色素含量越高，对光能的吸收越强，越易受到激光损伤。无色素动物眼底由于无色素组织的遮挡作用，脉络膜血管可直接吸收外界激光能量产生光化学反应，导致脉络膜血管的阻塞。

3、总的来说，现有的rvo模型血管再通时间较短，不能维持较长的时间，此外还可能会造成除血管阻塞外的视网膜色素上皮细胞和感光细胞的损伤，因此基于上述现状，建立具有良好可重复性、并能呈现与该疾病病理过程相类似的动物模型来进行病因学、病理学和治疗学方面的研究非常必要。

4、申请号：cn202011557373.0，发明名称：新型视网膜静脉阻塞小鼠模型的构建方法，涉及新型视网膜静脉阻塞小鼠模型的构建方法。该新型视网膜静脉阻塞小鼠模型的构建方法包括采用光动力方法干预小鼠后行玻璃体内给予muller细胞代谢抑制剂注射的步骤。采用该构建方法制得的视网膜静脉阻塞小鼠模型稳定、可实现持久的视网膜水肿，便于验证药物靶点及候选药物注射后作用机制。该方法需进行两次操作才能建立模型，步骤相对较复杂，同时适用动物种属为小鼠，小鼠视网膜结构与人差异仍较大。

5、选择合适的试验动物并构建接近于人类疾病的动物模型是医学研究的基础和前提，目前试验动物的选择以哺乳动物为主，其中啮齿类动物用量最多，但与人类在组织结构、代谢特征、发病机制等方面还存在一定差距。近年来国内外越来越多的学者开始应用小型猪构建疾病模型，由于其在生理生化指标、解剖结构、饮食特点、药物代谢和疾病发展等方面显示出的独特优势，因此认为是用于医学研究的理想动物种类。目前已将巴马小型猪应用于心血管、皮肤整形、内分泌及代谢、消化、口腔医学、器官移植领域，将小型猪用于眼科疾病领域的研究较少。（邹迪莎，等，巴马小型猪动物模型在医学领域的研究进展，中国畜牧兽医2017，44（4）：1128-1134）。

6、临床上，泡沫硬化剂是一种安全、有效治疗血管疾病的药物，主要用于治疗静脉曲张、血管瘤等疾病。聚多卡醇注射液为一种泡沫硬化剂，临床上用来治疗蜘蛛网样静脉的中心静脉、网状静脉及小静脉曲张。聚多卡醇主要通过破坏血管内皮细胞细胞膜上的表面活性分子，破坏细胞膜结构，裂解血管内皮细胞，使血管纤维化、闭塞及形成血栓，从而达到临床治疗静脉曲张的目的。静脉曲张和视网膜静脉阻塞是两种不同的疾病，它们分别影响血管系统的不同部位。静脉曲张主要影响下肢的浅表静脉，而视网膜静脉阻塞则影响眼睛的视网膜血管。目前尚无将聚多卡醇注射液用于视网膜静脉阻塞的动物模型的构建的相关文献报道。

技术实现思路

1、本发明提供了一种新的视网膜静脉阻塞的动物模型，它是聚多卡醇在构建视网膜静脉阻塞的动物模型中的用途以及一种视网膜静脉阻塞的动物模型的构建方法。

2、本发明提供了聚多卡醇在构建视网膜静脉阻塞的动物模型中的用途。

3、其中，所述的动物是哺乳类动物。

4、其中，所述的聚多卡醇施用于视网膜静脉，施用量为：0.4-0.5 mg/眼/次。

5、本发明提供了一种视网膜静脉阻塞的动物模型的构建方法，它包括如下步骤：

6、a、制备造模剂：取聚多卡醇注射液与空气混合反复推打形成绵密泡沫，所述的聚多卡醇注射液与空气的体积比为：1:3-4（v/v），其中，聚多卡醇注射液的浓度为1%w/v，与空气混合后，每ml含聚多卡醇2~2.5 mg；

7、b、将造模剂施于视网膜静脉中，即制备成视网膜静脉阻塞动物模型。

8、其中，所述的动物是哺乳类动物。

9、其中，所述的动物是巴马小型猪。

10、其中，所述的聚多卡醇注射液与空气的体积比为：1:3（v/v）。

11、其中，所述的制备造模剂的装置为：含有2个螺纹注射器、三通阀；一个螺纹注射器抽取聚多卡醇注射液，另一个螺纹注射器抽取空气，将两个螺纹注射器分别接入三通阀的两端，将三通阀开关旋至使接有注射器两端连通处，先后推动两端注射器，使聚多卡醇注射液与空气充分混合，快速抽打直至形成绵密泡沫。

12、本发明还提供了所述的构建方法构建的视网膜静脉阻塞的动物模型在筛选预防或/和治疗视网膜静脉阻塞的药物中的用途。

13、本发明提供了一种筛选预防或/和治疗视网膜静脉阻塞的候选药物的方法，将候选药物施用于所述的构建方法构建的视网膜静脉阻塞的动物模型。

14、临床上，泡沫硬化剂是一种安全、有效治疗血管疾病的药物，主要用于治疗静脉曲张等疾病。泡沫硬化剂为液体制剂，与一定比例的空气混合后可以形成绵密泡沫，将其注射入静脉中，绵密泡沫不会随血液回流，在注射部位会刺激损伤血管内皮细胞，进而阻塞血液回流。因此，借助泡沫硬化剂的这一特性，本发明利用48g针头将其注射入视网膜静脉，以期阻塞血管形成稳定且维持时间较长的rvo模型，为相关药物的临床前研究提供新的可靠的动物模型。

15、本发明的有益效果是：

16、本发明只需要一次注射给药就能建立较稳定的模型，使用的药物、器械等均可在市场上获得；同时适用种属为巴马小型猪，该种属眼球大小与人接近，同时视网膜上存在视觉条纹区（即视觉敏感部位，可与人视网膜黄斑区相对应），因此可更好的用于验证药物靶点及候选药物注射后的作用机制。