盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法与流程

本发明属于杂质测定，具体涉及盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法。

背景技术：

1、盐酸苯海拉明为组胺h1受体拮抗剂，竞争性地抑制h1受体介导反应，对中枢神经有较强的抑制作用，还有阿托品样作用，具有显著镇静及止吐、抗胆碱和局麻等作用。适用黏膜、皮肤过敏的反应，例如麻疹、水肿、过敏鼻炎及皮肤瘙痒症等，能有效地控制症状。外用治疗虫咬、神经性皮炎、瘙痒及多种皮炎类皮肤病等，目前各国药典均有收载此品种，2020年版《中国药典》收载了盐酸苯海拉明及其制剂，均采用高效液相法对其杂质进行研究。

2、欧洲与美国药典对已知杂质进行控制，采用美国药典色谱条件进行实验重现，结果杂质a与盐酸苯海拉明分离度小于1.5，不能有效分离。现有有关物质检查均为等度洗脱的hplc法，且仅对未知单个杂质和杂质总量有限度要求。在实际研究工作中发现，采用现有的检测方法无法对这些已知杂质进行有效的研究。

3、因此，针对上述技术问题，有必要提供盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法。

4、公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其能够准确、高敏、稳定的用于同时测定盐酸苯海拉明原料及其制剂中5种已知杂质的含量，可为该品种有关物质的测定提供新方法。

2、为了实现上述目的，本发明一具体实施例提供的了盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，所述方法采用高效液相色谱法进行测定，包括以下步骤：

3、s1、准备材料

4、仪器：watersacquityarc高效色谱液相仪、酸度计、制水机、电子天平；

5、药品与试剂：磷酸二氢钾、盐酸苯海拉明对照品、杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、盐酸苯海拉明原料药、盐酸苯海拉明注射液、乙腈、水；

6、s2、配制溶液

7、利用所述仪器以及药品与试剂分别配制以下溶液：

8、溶剂、空白溶液、对照品混合溶液、系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、空白辅料溶液；

9、s3、试验测定

10、依次进行系统适用性试验、破坏试验、线性关系和校正因子、定量限与检测限、精密度试验、重复性试验、稳定性试验、回收率试验、耐用性试验和样品测定。

11、在本发明的一个或多个实施例中，所述高效色谱液相仪采用diamonsil c8(2)(4.6mm×250mm，5μm)为色谱柱；流动相a、流动相b进行梯度洗脱；进样量为20μl；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；检测器检测。

12、在本发明的一个或多个实施例中，所述流动相a为磷酸二氢钾缓冲液，所述流动相b为乙腈。

13、在本发明的一个或多个实施例中，所述检测器的检测波长为210～230nm。

14、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制溶剂和空白溶液的具体步骤为：

15、取磷酸二氢钾16.2g，加水溶解后，再加水至3l，搅拌均匀，调节其ph值为3.0，制得浓度为5.4g/l的磷酸二氢钾缓冲液，再加1l乙腈进行混合，即得溶剂；

16、取所述溶剂即得空白溶液。

17、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制对照品混合溶液的具体步骤为：

18、取盐酸苯海拉明对照品17.5mg，称定后置于50ml量瓶中，再加入所述空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，得到预制溶液，量取预制溶液5ml，置于50ml量瓶中，用所述空白溶液稀释至刻度，摇匀，得到浓度为0.035mg/ml的盐酸苯海拉明对照品贮备液；

19、取杂质a17.5mg，杂质b、杂质c、杂质d、杂质e各10mg，称定后分别置于5个不同50ml量瓶中，再分别加入所述空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.35mg/ml的杂质a对照品贮备液，浓度为0.2mg/ml的杂质b对照品贮备液、杂质c对照品贮备液、杂质d对照品贮备液、杂质e对照品贮备液；

20、量取所述杂质对照品贮备液各5ml，置于同一50ml量瓶中，用所述空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得杂质混合溶液，量取所述杂质混合溶液1ml置于10ml量瓶中，用所述空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得对照品混合溶液。

21、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制系统适用性溶液的具体步骤为：

22、量取所述盐酸苯海拉明对照品贮备液和杂质混合溶液各1ml，置于同一10ml量瓶中，用所述空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得系统适用性溶液。

23、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制供试品溶液的具体步骤为：

24、取盐酸苯海拉明原料药14mg，称定后置于20ml量瓶中，用所述空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，得到第一供试品溶液，量取所述盐酸苯海拉明注射液0.9ml，置25ml量瓶中，用所述空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，得到第二供试品溶液。

25、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制对照溶液的具体步骤为：

26、分别量取第一供试品溶液和第二供试品溶液1ml，置于200ml量瓶中，用所述空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得第一对照溶液和第二对照溶液。

27、在本发明的一个或多个实施例中，所述s2中，配制空白辅料溶液的具体步骤为：

28、量取水0.9ml，置于25ml量瓶中，用所述空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得空白辅料溶液。

29、与现有技术相比，本发明的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法通过对盐酸苯海拉明的有关物质检测方法进行了优化，采用hplc梯度洗脱程序，提高杂质分离度和检出；

30、通过对五个已知杂质进行了校正因子研究，有效降低因同一检测器对不同物质响应值不同而导致的测定误差，且无需大量使用杂质对照品，提高检验效率，节省研究时间，保障检测准确度；

31、本方法操作简单，灵敏度高，专属性强，可准确测定盐酸苯海拉明原料及其制剂中五种已知杂质。

技术特征：

1.盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述方法采用高效液相色谱法进行测定，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述高效色谱液相仪采用diamonsil c8(2)(4.6mm×250mm，5μm)为色谱柱；流动相a、流动相b进行梯度洗脱；进样量为20μl；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；检测器检测。

3.根据权利要求2所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述流动相a为磷酸二氢钾缓冲液，所述流动相b为乙腈。

4.根据权利要求3所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述检测器的检测波长为210～230nm。

5.根据权利要求1所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制溶剂和空白溶液的具体步骤为：

6.根据权利要求5所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制对照品混合溶液的具体步骤为：

7.根据权利要求6所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制系统适用性溶液的具体步骤为：

8.根据权利要求7所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制供试品溶液的具体步骤为：

9.根据权利要求8所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制对照溶液的具体步骤为：

10.根据权利要求9所述的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，其特征在于，所述s2中，配制空白辅料溶液的具体步骤为：

技术总结本发明公开了盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法，属于杂质测定技术领域，采用Diamonsil C8(2)(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱，以磷酸二氢钾缓冲液‑乙腈为流动相，梯度洗脱，流速每分钟1.0mL，柱温30℃，检测波长220nm，进样体积20μL。与现有技术相比，本发明的盐酸苯海拉明及其制剂的杂质测定方法通过对盐酸苯海拉明的有关物质检测方法进行了优化，采用HPLC梯度洗脱程序，提高杂质分离度和检出；通过对五个已知杂质进行了校正因子研究，有效降低因同一检测器对不同物质响应值不同而导致的测定误差，且无需大量使用杂质对照品，提高检验效率，节省研究时间，保障检测准确度；本方法操作简单，灵敏度高，专属性强，可准确测定盐酸苯海拉明原料及其制剂中五种已知杂质。技术研发人员：丰丽莼,翟聪杰,吴月霞,王倩,张倩,杨雯雯,姚阳阳,惠佳佳,杨本霞,陈杰受保护的技术使用者：河南省药品医疗器械检验院（河南省疫苗批签中心）技术研发日：技术公布日：2024/7/25