苹果酸酶2在制备肿瘤的诊断和/或治疗试剂的应用

本发明属于生物医药，具体涉及苹果酸酶2在制备肿瘤的诊断和/或治疗试剂的应用。

背景技术：

1、

2、在癌症治疗中免疫治疗一直处于前沿领域，现有细胞因子治疗，免疫检查点抑制，抗肿瘤单克隆抗体，car-t细胞疗法，双特异性抗体，疫苗以及溶瘤病毒等治疗方法。免疫检查点治疗最早应用于il-2治疗，随后ctla-4，pd-1/pd-l1等免疫检查点的研究成为了肿瘤治疗的热点。2011年，ipilimumab用于阻断ctla-4获批用于转移性黑色素瘤的治疗，成为第一个检查点抑制剂，为下游t细胞的活化、增殖和最终的肿瘤破坏开辟了途径。nivolumab为首个以pd-1为靶点的肺癌免疫疗法药物，实现了从理论到临床的应用。目前，市场上已经有多种pd-1抑制剂，pd-1、pd-l1抑制剂成为了肿瘤免疫领域的基石。

3、研究表明，大多数肿瘤细胞高表达pd-l1抑制宿主免疫细胞功能，促使免疫逃逸，具有不良预后。pd-l1的表达可由多种细胞因子(包括ifn-γ、egf、白细胞介素(ils)和tnf-α)诱导jak/stat1/irf1、pi3k/akt/mtor、nf-κb和jak/stat3信号通路激活，调节下游转录调节因子增强pd-l1转录。内源性致癌变化，例如dna损伤，能量代谢紊乱也可诱导pd-l1表达。探索肿瘤细胞pd-l1的调控机制，有助于为靶向pd-l1治疗提供更多的思路。

4、苹果酸酶2(me2)催化苹果酸生成丙酮酸伴随nda(p)h产生，me2在大部分在肿瘤细胞中异常表达，参与细胞增殖，衰老及肿瘤发生、发展。me2能够感知代谢物水平，调节细胞功能，me2可以与延胡索酸盐结合促进me2二聚体的形成，从而激活脱氧尿苷5'-三磷酸核苷酸水解酶(dut)，促进胸苷生成和mtdna的生物合成。me2过表达抑制p53的活性和表达，降低细胞衰老。me2缺失引起代谢紊乱促进磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(pdk1)和张力蛋白同源物(pten)的表达来抑制akt信号通路，从而抑制肿瘤细胞增殖。在胰腺癌中，敲除线粒体苹果酸降低了nadph水平，导致活性氧ros升高激活amp活化蛋白激酶(ampk)，降低从头核苷酸合成。同时，nadph的水平下降会降低组蛋白乙酰化修饰，下调下游基因转录。

5、然而，苹果酸酶me2是否介导肿瘤的免疫反应从未被研究。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供苹果酸酶2在制备肿瘤的诊断和/或治疗试剂的应用，在肿瘤细胞中敲低苹果酸酶me2表达，可以显著抑制肿瘤细胞pd-l1的表达，提高肿瘤的免疫治疗。

2、本发明提供了一种检测苹果酸酶2的试剂在制备肿瘤免疫治疗标志物的检测工具中的应用。

3、优选的，所述肿瘤免疫治疗标志物包括pd-l1。

4、本发明还提供了一种抑制苹果酸酶2的表达的试剂在制备抗肿瘤免疫药物中的药物。

5、优选的，所述抑制苹果酸酶2的表达的试剂包括敲降苹果酸酶2的shrna的慢病毒质粒或干扰rna。

6、优选的，所述shrna的核苷酸序列如seq id no.1所示；

7、所述干扰rna包括sime2-1和sime2，所述sime2-1的核苷酸序列如seq id no.2所示，sime2的核苷酸序列如seq id no.3所示。

8、优选的，所述抗肿瘤免疫药物的抗肿瘤类型包括抗结直肠癌。

9、本发明还提供了一种降低肿瘤细胞成瘤能力的药剂，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂。

10、本发明还提供了一种降低肿瘤细胞成瘤能力的药物组合物，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂和anti-ctla4。

11、本发明还提供了一种治疗结直肠癌的药物，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂。

12、优选的，还包括anti-ctla4。

13、有益效果：本发明提供了一种检测苹果酸酶2的试剂在制备肿瘤免疫治疗标志物的检测工具中的应用，在肿瘤细胞中敲低me2明显降低了结直肠癌在野生c57bl/6小鼠上的肿瘤生长。在结直肠癌患者中分析，me2的高表达的患者肿瘤细胞表达pd-l1较高，具有肿瘤免疫抑制。因此，me2可以作为肿瘤免疫治疗的标志物，用于预测肿瘤组织中的pd-l1的表达。通过敲降肿瘤细胞me2的表达，降低肿瘤细胞的成瘤能力，恢复小鼠肿瘤浸润淋巴细胞的效应性功能，提高抗肿瘤免疫。通过me2抑制和anti-ctla4联合使用有效的降低肿瘤细胞的成瘤能力。因此，me2抑制和anti-ctla4联合治疗成为治疗结直肠癌的新策略。

技术特征：

1.一种检测苹果酸酶2的试剂在制备肿瘤免疫治疗标志物的检测工具中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述肿瘤免疫治疗标志物包括pd-l1。

3.一种抑制苹果酸酶2的表达的试剂在制备抗肿瘤免疫药物中的药物。

4.根据权利要求3所述药物，其特征在于，所述抑制苹果酸酶2的表达的试剂包括敲降苹果酸酶2的shrna的慢病毒质粒或干扰rna。

5.根据权利要求4所述药物，其特征在于，所述shrna的核苷酸序列如seq id no.1所示；

6.根据权利要求3所述药物，其特征在于，所述抗肿瘤免疫药物的抗肿瘤类型包括抗结直肠癌。

7.一种降低肿瘤细胞成瘤能力的药剂，其特征在于，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂。

8.一种降低肿瘤细胞成瘤能力的药物组合物，其特征在于，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂和anti-ctla4。

9.一种治疗结直肠癌的药物，其特征在于，包括抑制苹果酸酶2的表达的试剂。

10.根据权利要求9所述药物，其特征在于，还包括anti-ctla4。

技术总结本发明公开了苹果酸酶2(ME2)在制备肿瘤的诊断和/或治疗试剂的应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了一种检测苹果酸酶2的试剂在制备肿瘤免疫治疗标志物的检测工具中的应用。在结直肠癌患者中ME2的高表达的患者肿瘤细胞表达PD‑L1较高，具有肿瘤免疫抑制。因此，ME2可以作为肿瘤免疫治疗的标志物，用于预测肿瘤组织中的PD‑L1的表达。通过敲降肿瘤细胞ME2的表达，降低肿瘤细胞的成瘤能力，恢复小鼠肿瘤浸润淋巴细胞的效应性功能，提高抗肿瘤免疫。通过ME2抑制和anti‑CTLA4联合使用有效的降低肿瘤细胞的成瘤能力。因此，ME2抑制和anti‑CTLA4联合治疗成为治疗结直肠癌的新策略。技术研发人员：杜文静,张振西受保护的技术使用者：中国医学科学院基础医学研究所技术研发日：技术公布日：2024/8/1