一种植物乳杆菌NFLT-21及其应用

本发明属于微生物领域，涉及一种益生菌，特别是指一种植物乳杆菌nflt-21及其应用。

背景技术：

1、胃肠道疾病是指影响胃和肠道的各种疾病，包括胃炎、胃溃疡、消化性溃疡、肠易激综合征等。胃肠道疾病对身体和健康状况带来多重危害，如果得不到及时的治疗和管理，还可能会发展为慢性疾病并导致胃出血、炎症性肠病或胃癌等严重并发症。目前的胃肠道疾病治疗方案虽然有一定效果，但疾病的复杂性和不确定性使得对其治疗的研究仍然不够充分，需要进一步研究和开发新的治疗方法，以提高患者的治疗效果和生活质量。最新研究表明，胃肠道疾病与肠道菌群关系密切，肠道菌群的失调可能影响胃肠道疾病的治疗效果和患者的预后。通过调控肠道菌群辅助治疗胃肠道疾病，有助于提高治疗效果，提升患者的生命质量。

2、肠道菌群是指居住在人体肠道中的各类微生物，包括细菌、真菌和病毒等，这些微生物与人体共同构成复杂的生态系统。研究表明，肠道菌群可以影响药物的疗效，一些菌群可能降低药物的有效浓度，降低治疗效果；相反，其他有益菌群可能增强药物的治疗效果；其次，肠道菌群的失调与药物耐药性的发展相关，通过调节菌群可以干预患者对药物的耐药性；此外，肠道菌群与宿主免疫系统之间存在复杂的相互作用，菌群可以调节免疫细胞的发育和功能，影响免疫系统对炎症细胞的反应。因此，通过调节肠道菌群治疗胃肠道疾病有望成为一种新的治疗策略，进而实现更加个体化和有效的治疗。

3、目前，肠道菌群主要通过膳食、抗生素等方式调控，但长期的膳食调整可能会对个体饮食结构和生活方式造成一定影响，抗生素滥用则会导致体内有益菌数量下降，进一步促进肠道菌群失调。因此，人们越来越重视更加个性化和有效的治疗方案。益生菌是指当摄取足够数量时，对宿主健康有益的活性微生物。它们主要通过在肠道中定植并繁殖，调节和维护肠道菌群的平衡，从而对宿主的健康产生积极影响。益生菌剂是由一种或多种益生菌组成的活菌制剂。筛选安全有效的益生菌并开发益生菌剂，能够辅助治疗胃肠道疾病，提高诊疗水平、改善胃肠道疾病患者的生活质量，是一种安全有效的新型胃肠道疾病治疗方案，具有广阔的市场应用前景。专利cn1754545a公开了一种可用于减肥的植物乳杆菌，公开了一种可用于降低胆固醇的乳杆菌；专利cn114317353a公开了一种缓解2型糖尿病的乳杆菌；专利cn109234182a公开了一种具有缓解便秘功能的乳杆菌；可见不同的乳杆菌发挥的作用，并不相同；目前具有益生性功能且能够运用于胃肠道疾病治疗的植物乳杆菌较少，需要更多的菌株分离和功能验证实验，为了寻找能在人体内充分发挥植物乳杆菌功能的菌株，本发明进行了大量的菌株筛选实验。

技术实现思路

1、本申请从发酵蔬菜中进行菌株的分离培养和筛选，检测其人体胃肠液适应性、人体益生性等，通过一系列体内和体外实验，发现一株能够高产短链脂肪酸、耐酸耐胆盐、抑制幽门螺旋杆菌繁殖、抑制胃癌、结肠癌细胞增殖的益生菌菌株，提出了一种植物乳杆菌nflt-21及其应用。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、一种植物乳杆菌nflt-21，其保藏编号为cctcc no：m 20232719，分类名为lactiplantibacillus plantarum nflt-21，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2023年12月29日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

4、该菌株在酸性条件(ph2.5)下处理12h活菌数几乎不变，而本发明其它植物乳杆菌活菌数在酸性条件下处理12h后，活菌数较初始活菌数下降了约10-25倍。还具有耐酸耐胆盐特性。

5、植物乳杆菌nflt-21的培养方法，步骤为：将植物乳杆菌nflt-21接种于培养基中，37±1℃厌氧培养12-24h。

6、上述培养基为mrs液体培养基或与mrs液体培养基营养组分相同的培养基。

7、含有上述植物乳杆菌nflt-21的菌剂，其中植物乳杆菌nflt-21的活菌量≥1×109cfu/g。

8、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在发酵制备短链脂肪酸中的应用；总短链脂肪酸为9063.31±54.63μg/ml，而本发明其它植物乳杆菌的产短链脂肪酸能力均低于植物乳杆菌nflt-21。

9、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在制备抑制幽门螺旋杆菌药物中的应用；抑菌圈直径显著大于空白mrs培养基及本发明其它植物乳杆菌菌株。

10、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在制备治疗胃肠道炎症药物中的应用。

11、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在制备提高免疫力药物中的应用。

12、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在制备胃癌抑制剂中的应用；胃癌细胞增殖抑制率达到了98.83±0.74％，胃癌细胞的迁移率也只有3.76±0.51％。

13、上述的植物乳杆菌nflt-21或上述的菌剂在制备结肠癌抑制剂中的应用；结肠癌细胞增殖抑制率达到了97.35±2.51％，结肠癌细胞的迁移率也只有4.65±1.03％。

14、上述植物乳杆菌nflt-21能够有效地预防胃癌、结肠癌的发生发展，gc模型组小鼠在长期幽门螺杆菌感染后，胃黏膜、结肠黏膜中的mvd水平出现显著性的提高，微血管密度mvd水平升高，而植物乳杆菌nflt-21干预后，mvd水平降低至正常水平。

15、本发明具有以下有益效果：

16、1、本申请新发现了一株耐酸耐胆盐的植物乳杆菌nflt-21，该菌株在酸性条件(ph2.5)下处理12h活菌数保持稳定，而本发明其它植物乳杆菌活菌数在酸性条件下处理12h后，活菌数较初始活菌数下降了约10-25倍。本发明植物乳杆菌活菌数高，且具有耐酸耐胆盐特性。植物乳杆菌nflt-21的上清液对dpph自由基、abts自由基、羟基自由基的清除率分别为98.12±0.31％、97.61±1.25％、99.62±0.22％。

17、2、植物乳杆菌nflt-21能够有效地预防胃癌、结肠癌的发生发展，gc模型组小鼠在长期幽门螺杆菌感染后，胃黏膜、结肠黏膜中的mvd水平出现显著性的提高，微血管密度mvd水平升高，而植物乳杆菌nflt-21干预后，mvd水平降低至正常水平。

18、3、本发明开发了一株保藏编号为cctcc m 20232719的植物乳杆菌lactiplantibacillus plantarumnflt-21菌株的益生菌制剂新用途，其能够显著提高胃肠道疾病治疗效果，为治疗胃肠道疾病提供了新的策略，将其用于制备预防、缓解或治疗胃肠道疾病的产品，具有良好的应用前景。另外，关于本发明的植物乳杆菌是一种益生菌，其在用于制备预防、缓解或治疗胃肠道疾病的相关产品时，安全性高，且不易产生抗药性。

技术特征：

1. 一种植物乳杆菌nflt-21，其保藏编号为cctcc no：m 20232719，分类名为lactiplantibacillus plantarum nflt-21，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2023年12月29日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

2. 权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21的培养方法，其特征在于，步骤为：将植物乳杆菌nflt-21接种于培养基中，37±1℃厌氧培养12-24 h。

3.根据权利要求2所述的植物乳杆菌nflt-21的培养方法，其特征在于：所述培养基为mrs液体培养基或与mrs液体培养基营养组分相同的培养基。

4. 含有权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21的菌剂，其特征在于：所述菌剂中植物乳杆菌nflt-21的活菌量≥1×109 cfu/g。

5.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在发酵制备短链脂肪酸中的应用。

6.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在制备抑制幽门螺旋杆菌药物中的应用。

7.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在制备治疗胃肠道炎症药物中的应用。

8.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在制备提高免疫力药物中的应用。

9.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在制备胃癌抑制剂中的应用。

10.权利要求1所述的植物乳杆菌nflt-21或权利要求4所述的菌剂在制备结肠癌抑制剂中的应用。

技术总结本发明属于微生物领域，涉及一种益生菌，特别是指一种植物乳杆菌NFLT‑21及其应用。该菌株从发酵蔬菜样本中分离得到，其保藏编号为CCTCC M 20232719，分类名为Lactiplantibacillus plantarum NFLT‑21，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2023年12月29日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。上述植物乳杆菌NFLT‑21具有耐酸、耐胆盐等特点，能在消化道中较好的存活和生长；同时该菌株可高产短链脂肪酸，并具有抑制幽门螺旋杆菌繁殖、抑制胃癌细胞增殖、抑制结肠癌细胞增殖、高效降低胆固醇、高效清除自由基等能力，是一株预防和治疗胃肠道疾病的潜在益生菌。技术研发人员：魏勇军,李甜,占闽宁,朱丹丹受保护的技术使用者：郑州大学技术研发日：技术公布日：2024/9/2