一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌及其应用的制作方法

本发明涉及真菌内生细菌，尤其涉及一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌及其应用。

背景技术：

1、内生菌是一定阶段或全部阶段生活于植物的组织和器官内部的真菌或细菌，普遍存在于高等植物中，木本、草本植物，单子叶植物和双子叶植物内均有内生细菌，已成为生物防治中有潜力的微生物农药、增产菌或作为潜在的生防载体菌而加以利用。

2、生物肥料发展过程中遇到的主要问题之一是缺少高效菌种资源挖掘，生物肥料企业亟待更新高效菌种。而菌株的来源一般为根际土壤，动植物内生菌等；玉米黑粉菌虽然作为一种致病菌引起玉米瘤黑粉病在玉米的各个部位侵染形成瘤状物，但是它也可以作为一种美食，对人无害，对固氮菌菌株资源的挖掘与开发具有重要意义。

3、因此，有必要提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌扩展植物培育菌株资源。

技术实现思路

1、有鉴于此，本申请提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌及其应用，用于解决固氮菌菌株资源不足的问题。

2、为达到上述技术目的，本申请采用以下技术方案：

3、第一方面，本申请提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌，其保藏编号为cctcc m2022708，于2022年5月24日保藏于中国典型培养物保藏中心。

4、第二方面，本申请提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂，其含有保藏编号为cctcc m 2022708的真菌内生密歇根克雷伯氏菌。

5、第三方面，本申请提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌的分离方法，包括以下步骤：

6、s1.将玉米黑粉菌体接种于yepsl液体培养基培养，得发酵液，将发酵液转接至新鲜的yepsl液体培养基中培养后，离心、重悬，收集菌体，将菌体加入于裂解液中孵育，离心后，得原生质体；

7、s2.将原生质体研磨并于无氮培养基中培养，再挑取单菌落纯化培养，即得密歇根克雷伯氏菌。

8、优选的，玉米黑粉菌体的体内含有内生细菌。

9、第四方面，本申请提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌或真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂在植物培养领域中的应用。

10、优选的，真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在增加植物蛋白含量中的应用。

11、优选的，真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在定殖小麦中的应用。

12、优选的，真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在合成iaa中的应用。

13、优选的，真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在植物固氮中的应用。

14、第五方面，本申请提供一种肥料，包含真菌内生密歇根克雷伯氏菌或真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂。

15、本申请的有益效果如下：

16、本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌由可食用真菌分离，对人和环境友好；

17、本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌的固氮能力强，可在无氮条件下正常生长，其固氮酶活性为646.25±38.61nmol·ml-1·h-1c2h4，同时，还具有定殖小麦、合成iaa及作为产铁载体的能力，可增加豆类6-8个蛋白含量；

18、本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌生产周期短，使用简单，在植物促生、生物肥料等领域具有十分广阔的应用前景。

技术特征：

1.一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌，其特征在于，其保藏编号为cctcc m2022708，于2022年5月24日保藏于中国典型培养物保藏中心。

2.一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂，其特征在于，其含有保藏编号为cctcc m2022708的真菌内生密歇根克雷伯氏菌。

3.一种如权利要求1所述的真菌内生密歇根克雷伯氏菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的密歇根克雷伯氏菌的分离方法，其特征在于，所述玉米黑粉菌体的体内含有内生细菌。

5.一种如权利要求1所述的真菌内生密歇根克雷伯氏菌或如权利要求2所述的真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂在植物培养领域中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在增加植物蛋白含量中的应用。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在定殖小麦中的应用。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在合成iaa中的应用。

9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述真菌内生密歇根克雷伯氏菌或其培养液或其发酵液或含有其的菌剂在植物固氮中的应用。

10.一种肥料，其特征在于，包含如权利要求1所述的真菌内生密歇根克雷伯氏菌或如权利要求2所述的真菌内生密歇根克雷伯氏菌菌剂。

技术总结本发明公开一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌及其应用，该菌株的保藏编号为CCTCC M 2022708，于2022年5月24日保藏于中国典型培养物保藏中心；本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌可在无氮环境中生长，且固氮酶活性高，因此，可为植物生长发育提供氮源，本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌扩宽了固氮菌株资源，同时本申请的真菌内生密歇根克雷伯氏菌具有定殖小麦、合成IAA及作为产铁载体的能力，可增加豆类的蛋白含量。技术研发人员：许汝冰,黎妍妍,周燚,董善余,覃永生,熊涛受保护的技术使用者：湖北省烟草科学研究院技术研发日：技术公布日：2024/9/9