固相萃取系统及其方法、液相色谱仪及液相色谱检测方法与流程

本技术涉及检测，特别是涉及一种在线单柱固相萃取系统、在线单柱固相萃取方法、双柱串联在线固相萃取系统、双柱串联在线固相萃取方法、双柱串联在线固相萃取系统、双柱串联在线固相萃取方法、液相色谱仪及液相色谱检测方法。

背景技术：

1、液相色谱已经广泛应用于食品安全、药物研发、临床诊断、毒理法学以及环境监测等领域中，因样品的复杂性使得样品前处理成为液相色谱分析中必不可少的一部分。样品前处理常需作业人员手工多步操作才能完成，占据整体分析时间80%以上。样品前处理中常用的手段是固相萃取，其作用是去除样品中的干扰物质，使痕量组分得到富集，便于检测和分离，且不损害色谱柱。

2、目前，常用的固相萃取为离线固相萃取，单个样品需要的样品量在几百毫升到几千毫升，处理过程中需要消耗几百毫升有机溶剂，涉及到活化、上样、淋洗、洗脱、浓缩、复溶、定容等操作，耗费时间通常1到2个小时，效率低、流程复杂、耗材多、耗时长且对环境不友好，每支固相萃取柱仅能使用一次，样品间平行性不好。

技术实现思路

1、基于此，有必要提供一种在线单柱固相萃取系统。本发明的在线单柱固相萃取系统操作简便，流程简单，消耗溶剂量在十几毫升左右，耗材少，处理时间短，对环境污染小。

2、本技术一实施例提供了一种在线单柱固相萃取系统。

3、一种在线单柱固相萃取系统，包括第一六通阀、第二六通阀以及固相萃取柱；

4、所述第一六通阀的第一阀口用于进样，所述第一六通阀的第二阀口用于连接第一废液管，所述第一六通阀的第三阀口与所述第一六通阀的第六阀口之间连接定量环，所述第一六通阀的第四阀口连接所述第二六通阀的第一阀口，所述第一六通阀的第五阀口用于连接上样再生活化泵；

5、所述第二六通阀的第二阀口用于连接第二废液管，所述第二六通阀的第三阀口与所述第二六通阀的第六阀口之间连接所述固相萃取柱，所述第二六通阀的第四阀口用于连接液相色谱柱，所述第二六通阀的第五阀口用于连接液相泵。

6、本技术一实施例提供了一种在线单柱固相萃取方法。

7、一种在线单柱固相萃取方法，使用在线单柱固相萃取系统，包括如下步骤：

8、s1、通过第一六通阀的第一阀口进样至所述第一六通阀的第三阀口与所述第一六通阀的第六阀口之间连接的定量环中，多余的样品由所述第一六通阀的第二阀口进入第一废液管中；

9、s2、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、固相萃取柱、所述第二六通阀的第三阀口以及所述第二六通阀的第二阀口后进入第二废液管中；

10、控制液相泵经过所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相；

11、s3、切换第二六通阀，控制所述液相泵经过所述第二六通阀的第五阀口、所述固相萃取柱、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口向泵入液相色谱柱泵入流动相，以洗脱所述固相萃取柱上的样品进入液相色谱柱，以备色谱检测；

12、切换第一六通阀，控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口、所述定量环、所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口以及所述第二六通阀的第二阀口后进入第二废液管中；以及

13、s4、切换第二六通阀，控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口、所述定量环、所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述固相萃取柱、所述第二六通阀的第三阀口以及所述第二六通阀的第二阀口后进入第二废液管中，以实现对所述定量环以及所述固相萃取柱的再生、活化、平衡。

14、本技术一实施例提供了一种双柱并联在线固相萃取系统。

15、一种双柱并联在线固相萃取系统，包括第一六通阀、第二六通阀、十通阀以及固相萃取柱；

16、所述第一六通阀的第一阀口用于萃取进样，所述第一六通阀的第二阀口用于连接第一废液管，所述第一六通阀的第三阀口与所述第一六通阀的第六阀口之间连接有定量环，所述第一六通阀的第四阀口连接所述十通阀的第一阀口，所述第一六通阀的第五阀口用于连接上样再生活化泵；

17、所述第二六通阀的第一阀口用于直接进样，所述第二六通阀的第二阀口用于连接第二废液管，所述第二六通阀的第三阀口与所述第二六通阀的第六阀口之间连接有定量环，所述第二六通阀的第五阀口用于连接液相色谱柱；

18、所述十通阀的第二阀口与所述十通阀的第五阀口之间连接有第一固相萃取柱，所述十通阀的第三阀口用于连接液相泵，所述十通阀的第六阀口用于连接第三废液管，所述十通阀的第七阀口与所述十通阀的第十阀口之间连接有第二固相萃取柱，所述十通阀的第八阀口连接所述第二六通阀的第四阀口。

19、本技术一实施例提供了一种双柱并联在线固相萃取方法。

20、一种双柱并联在线固相萃取方法，使用双柱并联在线固相萃取系统，包括如下步骤：

21、s1、通过第一六通阀的第一阀口萃取进样至所述第一六通阀的第三阀口与所述第一六通阀的第六阀口之间连接的定量环中，多余的样品由所述第一六通阀的第二阀口进入第一废液管中；

22、s21、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口、所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述十通阀的第一阀口、所述十通阀的第二阀口、第一固相萃取柱、所述十通阀的第五阀口以及所述十通阀的第六阀口后进入第三废液管中，以实现样品富集于第一固相萃取柱且杂质进入第三废液管中；

23、s22、控制液相泵经过所述十通阀的第三阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第十阀口、第二固相萃取柱、所述十通阀的第七阀口、所述十通阀的第八阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述定量环、所述第二六通阀的第六阀口、所述第二六通阀的第五阀口向液相色谱柱泵入流动相，以实现对第二固相萃取柱进行活化、平衡；

24、s3、切换十通阀，控制液相泵泵入流动相依次经过所述十通阀的第三阀口、所述十通阀的第二阀口、第一固相萃取柱、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述定量环、所述第二六通阀的第六阀口、所述第二六通阀的第五阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现第一固相萃取柱上的样品洗脱进入液相色谱柱，以备色谱检测；

25、s4、重复步骤s1；

26、s5、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口、定量环、所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述十通阀的第一阀口、所述十通阀的第十阀口、第二固相萃取柱、所述十通阀的第七阀口以及所述十通阀的第六阀口后进入第三废液管中，以实现样品富集于第二固相萃取柱且杂质进入第三废液管中；

27、s61、切换十通阀，控制液相泵泵入流动相依次经过所述十通阀的第三阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第十阀口、所述第二固相萃取柱、所述十通阀的第七阀口、所述十通阀的第八阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述定量环、所述第二六通阀的第六阀口、所述第二六通阀的第五阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现第二固相萃取柱上的样品洗脱进入液相色谱柱，以备色谱检测；

28、s62、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口、所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第四阀口、所述十通阀的第一阀口、所述十通阀的第二阀口、第一固相萃取柱、所述十通阀的第五阀口以及所述十通阀的第六阀口后进入第三废液管中，以实现样品富集于第一固相萃取柱进行再生、活化、平衡；

29、s7、重复步骤s1~s62。

30、本技术一实施例提供了一种双柱串联在线固相萃取系统。

31、一种双柱串联在线固相萃取系统，包括第一六通阀、第二六通阀、第三六通阀、十通阀、第一固相萃取柱以及第二固相萃取柱；

32、所述第一六通阀的第一阀口用于连接上样再生活化泵，所述第一六通阀的第二阀口连接所述十通阀的第五阀口，所述第一六通阀的第三阀口用于连接液相泵，所述第一六通阀的第四阀口用于连接液相色谱柱，所述第一六通阀的第五阀口连接所述第二六通阀的第四阀口，所述第一六通阀的第六阀口用于连接第一废液管；

33、所述第二六通阀的第五阀口与所述第二六通阀的第六阀口之间连接所述第一固相萃取柱；所述第二六通阀的第一阀口与所述第三六通阀的第四阀口连接；

34、所述第三六通阀的第五阀口与所述第三六通阀的第六阀口之间连接所述第二固相萃取柱，所述第三六通阀的第一阀口与所述十通阀的第三阀口连接；

35、所述十通阀的第一阀口用于进样，所述十通阀的第六阀口与所述十通阀的第十阀口之间连接有定量环，所述十通阀的第七阀口用于连接第二废液管。

36、本技术一实施例提供了一种双柱串联在线固相萃取方法。

37、一种双柱串联在线固相萃取方法，使用双柱串联在线固相萃取系统，当直接上样时，包括如下步骤：

38、s1、通过十通阀的第一阀口进样至所述十通阀的第十阀口与所述十通阀的第六阀口之间连接的定量环中，多余的样品由所述十通阀的第七阀口进入第二废液管中；

39、s2、切换十通阀，控制液相泵依次经过所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第六阀口、定量环、所述十通阀的第十阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第二阀口、所述第三六通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第二阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现样品进入液相色谱柱以备色谱检测。

40、本技术一实施例提供了一种双柱串联在线固相萃取方法。

41、一种双柱串联在线固相萃取方法，使用双柱串联在线固相萃取系统，当串联上样时，包括如下步骤：

42、s1、通过十通阀的第一阀口进样至所述十通阀的第十阀口与所述十通阀的第六阀口之间连接的定量环中，多余的样品由所述十通阀的第七阀口进入第二废液管中；

43、s2、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第一阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第六阀口、定量环、所述十通阀的第十阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第六阀口、所述第二固相萃取柱、所述第三六通阀的第五阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述第一固相萃取柱、所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口，以实现样品富集于所述第一固相萃取柱、所述第二固相萃取柱且杂质进入第一废液管中；

44、s3、控制液相泵依次经过所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第二阀口、所述第三六通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述第一固相萃取柱、所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现样品进入液相色谱柱以备色谱检测；

45、或者，控制液相泵依次经过所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第六阀口、所述第二固相萃取柱、所述第三六通阀的第五阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第二阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现样品进入液相色谱柱以备色谱检测；

46、s4、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第一阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第二阀口、所述第三六通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述第一固相萃取柱、所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口，以实现对所述第一固相萃取柱进行活化、再生、平衡；

47、或者，控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第一阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第六阀口、所述第二固相萃取柱、所述第三六通阀的第五阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第二阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口，以实现对所述第二固相萃取柱进行活化、再生、平衡。

48、本技术一实施例提供了一种双柱串联在线固相萃取方法。

49、一种双柱串联在线固相萃取方法，使用双柱串联在线固相萃取系统，当单柱上样时，包括如下步骤：

50、s1、通过十通阀的第一阀口进样至所述十通阀的第十阀口与所述十通阀的第六阀口之间连接的定量环中，多余的样品由所述十通阀的第七阀口进入第二废液管中；

51、s2、控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第一阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第六阀口、定量环、所述十通阀的第十阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第二阀口、所述第三六通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述第一固相萃取柱、所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口，以实现样品富集于所述第一固相萃取柱且杂质进入第一废液管中；

52、或者，控制上样再生活化泵泵入缓冲液依次经过所述第一六通阀的第一阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第六阀口、定量环、所述十通阀的第十阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第六阀口、所述第二固相萃取柱、所述第三六通阀的第五阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第二阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第六阀口，以实现样品富集于所述第二固相萃取柱且杂质进入第一废液管中；

53、s3、控制液相泵依次经过所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第二阀口、所述第三六通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第六阀口、所述第一固相萃取柱、所述第二六通阀的第五阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现样品进入液相色谱柱以备色谱检测；

54、或者，控制液相泵依次经过所述第一六通阀的第三阀口、所述第一六通阀的第二阀口、所述十通阀的第五阀口、所述十通阀的第四阀口、所述十通阀的第九阀口、所述十通阀的第八阀口、所述十通阀的第二阀口、所述十通阀的第三阀口、所述第三六通阀的第一阀口、所述第三六通阀的第六阀口、所述第二固相萃取柱、所述第三六通阀的第五阀口、所述第三六通阀的第四阀口、所述第二六通阀的第一阀口、所述第二六通阀的第二阀口、所述第二六通阀的第三阀口、所述第二六通阀的第四阀口、所述第一六通阀的第五阀口、所述第一六通阀的第四阀口向液相色谱柱泵入流动相，实现样品进入液相色谱柱以备色谱检测。

55、本技术一实施例提供了一种液相色谱仪。

56、一种液相色谱仪，包括在线单柱固相萃取系统、双柱并联在线固相萃取系统、双柱串联在线固相萃取系统中的一种或几种。

57、本技术一实施例提供了一种液相色谱检测方法。

58、一种液相色谱检测方法，包括在线单柱固相萃取方法、双柱并联在线固相萃取方法、双柱串联在线固相萃取方法中的一种或几种。

59、本技术相比于离线固相萃取系统，通过阀切换技术，自动完成固相萃取柱的活化、上样、淋洗、洗脱到液相色谱柱上直接分析，样品进样量一般在1ml到10ml左右，溶剂耗费少，每个样品在5到15分钟左右完成，处理时间短，操作简便，固相萃取柱可以实现在线活化，以用于下一个样品的分析，样品重复性好。