一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记及其应用

本发明属于植物育种，具体涉及一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记及其应用。

背景技术：

1、大豆(glycine max[l]merr.)起源于中国，已有五千多年的栽培历史，是豆科大豆属的一年生草本植物。它也是世界上最早栽培的经济作物之一，含有丰富的植物蛋白和油脂，是重要的油料和饲料作物，具有良好的发展前景。随着人们生活水平的提高，对大豆的需求量也越来越大，但是目前我国大豆的产量有限，无法满足国内的需求，其对外依存度正逐年上升。这主要是由于在当前阶段，大豆的单产水平较低，提高单位面积产量是目前育种工作的重点，所以为适应我国大豆产业发展的需要，急需选育高产品种。生物产量是经济产量的基础，苗期形成较大生物产量，为大豆最终生物产量的形成奠定了良好的基础。大豆苗期主要是进行营养生长，随着营养体增大，更多的光能向化学能进行转换，促进干物质的积累，为生殖生长的发育奠定了坚实的基础。

2、蔗糖是光能向化学能转换的重要中间产物，植物生长发育所需要的光合产物大部分以蔗糖的形式供应和运输。研究大豆苗期叶片蔗糖含量的变化特征，对大豆良种的选育具有重要的参考价值，传统的检测方法过于缓慢，亟需一种快速准确便捷的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了快速、准确的筛选出叶片蔗糖含量高的大豆品种。

2、本发明提供一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记，所述分子标记的基因为glyma.14g029100，且在2131531位上的核苷酸位点为t或c。

3、本发明提供一种扩增上述的分子标记的引物序列，正向引物序列为seq id no.4或seq id no.5所示；反向引物序列如seq id no.6所示。

4、本发明提供一种大豆叶片蔗糖含量相关的snp位点，所述snp位点位于14号染色体上的2131531位，所述位点的碱基为t或c。

5、本发明提供一种扩增上述的snp位点的引物序列，正向引物序列为seq id no.4或seq id no.5所示；反向引物序列如seq id no.6所示。

6、本发明提供一种上述的分子标记、上述的引物序列、上述的snp位点或上述的引物序列在制备鉴定高蔗糖含量的大豆叶片或低蔗糖含量的大豆叶片的试剂盒中的应用。

7、本发明提供一种鉴定高蔗糖含量的大豆叶片的试剂盒，所述试剂盒包括上述的引物序列；检测待检测品种的大豆为tc基因型则待检测品种为高蔗糖含量的大豆叶片。

8、本发明提供一种鉴定苗期生物产量高的大豆的试剂盒，所述试剂盒包括上述的引物序列；检测待检测品种的大豆为tc基因型则待检测品种为苗期生物产量高的大豆。

9、本发明提供一种鉴定高蔗糖含量的大豆叶片的方法，所述方法的具体步骤如下：

10、步骤1：提取待检测大豆的dna；

11、步骤2：利用上述的分子标记的引物序列或上述的snp位点的引物序列进行pcr反应，检测待检测品种的大豆为tc基因型则待检测品种为高蔗糖含量的大豆叶片，若为cc基因型则待检测品种为低蔗糖含量的大豆叶片。

12、进一步地限定，步骤2中pcr反应为95℃，10min；95℃，20sec，61℃，45sec，每个循环-0.6℃10个循环；95℃，20sec，30个循环；55℃，45sec；37℃，1min，1个循环。

13、进一步地限定，步骤2中的tc基因型为snp位点的碱基为t；cc基因型为snp位点的碱基为c。

14、有益效果：大豆kasp标记开发群体中不同品种的生物产量和叶片蔗糖含量均有显著差异且差异幅度较大。大豆苗期生物产量和叶片蔗糖含量显著正相关。开发了1个判断大豆苗期叶片蔗糖含量的kasp标记为chr14_2131531，利用kasp标记验证群体确认了chr14_2131531具有很好的分型效果，将337份种质资源分为携带基因型tc的品种和携带基因型cc的品种两类，并发现利用chr14_2131531标记可以对叶片蔗糖含量高的品种有70.14％的选择效果。

技术特征：

1.一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记的基因为glyma.14g029100，且在2131531位上的核苷酸位点为t或c。

2.扩增权利要求1所述的分子标记的引物序列，其特征在于，正向引物序列为seq idno.4或seq id no.5所示；反向引物序列如seq id no.6所示。

3.一种大豆叶片蔗糖含量相关的snp位点，其特征在于，所述snp位点位于14号染色体上的2131531位，所述位点的碱基为t或c。

4.扩增权利要求3所述的snp位点的引物序列，其特征在于，正向引物序列为seq idno.4或seq id no.5所示；反向引物序列如seq id no.6所示。

5.权利要求1所述的分子标记、权利要求2所述的引物序列、权利要求3所述的snp位点或权利要求4所述的引物序列在制备鉴定高蔗糖含量的大豆叶片或低蔗糖含量的大豆叶片的试剂盒中的应用。

6.一种鉴定高蔗糖含量的大豆叶片的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求2或权利要求4所述的引物序列；检测待检测品种的大豆为tc基因型则待检测品种为高蔗糖含量的大豆叶片。

7.一种鉴定苗期生物产量高的大豆的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求2或权利要求4所述的引物序列；检测待检测品种的大豆为tc基因型则待检测品种为苗期生物产量高的大豆。

8.一种鉴定高蔗糖含量的大豆叶片的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤如下：

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2中pcr反应为95℃，10min；95℃，20sec，61℃，45sec，每个循环-0.6℃10个循环；95℃，20sec，30个循环；55℃，45sec；37℃，1min，1个循环。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2中的tc基因型为snp位点的碱基为t；cc基因型为snp位点的碱基为c。

技术总结本发明公开一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记及其应用，属于植物育种技术领域。为了快速、准确的筛选出叶片蔗糖含量高的大豆品种。本发明提供一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记，所述分子标记的基因为Glyma.14G029100，且在2131531位上的核苷酸位点为T或C。该标记在实际生产过程中具有很高的实用价值，可以在苗期时对材料进行早期筛选，有助于缩短育种时间，但单一标记的效应有限，后期可开发更多相关的分子标记辅助选育优良大豆种质。技术研发人员：姚昕东,刘伟,张大勇,于振海,吉可馨,吴雨恒,王象然受保护的技术使用者：东北农业大学技术研发日：技术公布日：2024/9/9