小鼠口腔鳞状细胞癌的放疗抵抗细胞株及其构建方法和应用

本发明属于生物，具体涉及一种小鼠口腔鳞状细胞癌的放疗抵抗细胞株及其构建方法和应用。

背景技术：

1、口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，oscc)是头颈部常见的恶性肿瘤之一，约占口腔恶性肿瘤的90％。oscc好发于舌、颊、牙龈及口底等部位，可导致患者容貌受损以及吞咽、言语和味觉等功能障碍，极大程度降低了患者的生活质量。oscc的发病率逐年上升，成为全球医疗保健领域的一个重大问题。根据全球癌症观察(global cancerobservatory,gco)最新公布的数据，2022年oscc的新发病例达到389,846例，死亡病例为188,438例。

2、放疗在治疗恶性肿瘤中扮演着不可或缺的角色，超过70％的肿瘤患者需要接受放疗治疗。尽管放疗技术不断进步，放疗抵抗依然是放射治疗中的主要挑战，可能引起肿瘤复发和转移。恶性肿瘤对放疗抵抗涉及多种因素，如dna损伤反应异常、细胞凋亡、基因突变等。借助放疗抵抗细胞模型的研究，可以为逆转放疗抵抗提供基础。通过体外实验中重复辐照x射线，筛选出具有放疗耐受性的细胞株进行研究，有助于探究放疗抵抗机制。结合放疗在口腔鳞状细胞癌的应用和研究进展，深入研究口腔鳞癌的放疗抵抗机制是当前恶性肿瘤治疗领域亟待解决的问题之一。

3、目前针对小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法尚未有明确报道，这给深入研究放疗抵抗的分子机制以及提高放疗敏感性带来了困难。本发明旨在提供一种针对口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，为深入探究口腔鳞状细胞癌放疗抵抗的分子机制、筛选靶点，并最终提高放疗敏感性提供新的思路和方向。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有优异放疗抵抗特性的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株，以及该放疗抵抗细胞株的构建方法和用途。

2、本发明解决上述技术问题的技术方案为：提供了一种小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株，保藏编号为cgmcc no.45842。该细胞株保藏于中国微生物菌种保藏管理中心cgmcc，保藏日期为2024年4月11日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

3、本发明还提供了一种上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，包括以下步骤：

4、a、取小鼠口腔鳞状细胞癌细胞株moc1，采用x射线辐照，剂量率为3.095gy/min，每次2gy，每隔24小时辐照1次，每辐照5次休息48小时，如此重复7次，筛选存活的细胞株；

5、b、将存活的细胞株维持培养8周后，得到放疗抵抗细胞株moc1-r。

6、其中，上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法中，步骤a所述的x射线由x射线生物辐照仪产生。

7、其中，上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法中，所述的x射线生物辐照仪型号为rs2000系列。

8、其中，上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，步骤a所述的小鼠口腔鳞状细胞癌细胞株moc1，采用对数生长期的细胞，制备成单细胞悬液，待贴壁生长时进行辐照。

9、本发明通过上述构建方法，得到了一株稳定的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株，该细胞株moc1-r具有很强放射抵抗性，在不同剂量的辐照下，moc1-r的存活能力均比moc1亲本细胞强。

10、本发明还提供了一种上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在筛选放疗增敏药物的细胞模型中的用途。

11、本发明还提供了一种上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在筛查放疗抵抗基因的细胞模型中的用途。

12、本发明还提供了一种上述小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在研究小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗机制的细胞模型中的用途。

13、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

14、本发明提供了一种小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株，命名为小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞moc1-r，保藏于中国微生物菌种保藏管理中心cgmcc，保藏编号为cgmccno.45842。本发明通过采用特有的筛选方法，采用x射线辐照，筛选得到一株具有很强放射抵抗性的细胞株，在不同剂量的辐照下，moc1-r的存活能力均比moc1亲本细胞强。

15、本发明提供的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株为进一步研究小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗的分子机制、筛选放疗抵抗靶点、提高放疗敏感性，筛选放疗增敏药物和筛查放疗抵抗基因提供了基础。

技术特征：

1.小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株，其特征在于：保藏编号为cgmcc no.45842。

2.权利要求1所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，其特征在于：步骤a所述的x射线由x射线生物辐照仪产生。

4.根据权利要求3所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，其特征在于：所述的x射线生物辐照仪型号为rs2000系列。

5.根据权利要求2所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株的构建方法，其特征在于：步骤a所述的小鼠口腔鳞状细胞癌细胞株moc1，采用对数生长期的细胞，制备成单细胞悬液，待贴壁生长时进行辐照。

6.权利要求1所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在筛选放疗增敏药物的细胞模型中的用途。

7.权利要求1所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在筛查放疗抵抗基因的细胞模型中的用途。

8.权利要求1所述的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株在研究小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗机制的细胞模型中的用途。

技术总结本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株及其构建方法和应用。针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有优异放疗抵抗特性的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株MOC1‑R，保藏于中国微生物菌种保藏管理中心CGMCC，保藏号CGMCC No.45842；它是由小鼠口腔鳞状细胞癌细胞株MOC1经多次X射线累积辐照和培养后获得的放疗抵抗细胞株，放射抵抗性强，在小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗机制的细胞模型中具有良好应用前景。技术研发人员：彭星辰,门可,朱莉莉,杨华菊,秦子健,何玲,刘哲然,代爽,刘映彤受保护的技术使用者：四川大学华西医院技术研发日：技术公布日：2024/9/9