用于治疗癌症的组合疗法的制作方法

本发明涉及结合分子领域。特别地，其涉及用于治疗涉及异常细胞(诸如癌细胞)的疾病的治疗性结合分子领域。特别地，其涉及与两种或更多种不同膜相关蛋白的胞外部分结合并由此调节细胞表达的生物活性的多特异性抗体，以及此类抗体在组合疗法中的用途。

背景技术：

1、癌症目前仍然是世界上发病和死亡的主要原因，尽管在治疗该疾病方面取得许多进展，且对导致癌症的分子事件的了解有所增加。

2、传统上，大多数癌症药物的发现都集中在阻断基本细胞功能和杀死分裂细胞的药物上。然而，在晚期癌症的情况下，无论施药多么积极，即使达到患者因治疗而遭受危及生命的副作用的程度，化疗也很少能完全治愈。在大多数情况下，患者体内的肿瘤停止生长或暂时缩小(称为缓解)只是为了再次开始增殖，有时更快速(称为复发)，并且变得越来越难以治疗。最近，癌症药物开发的重点已经从广泛的细胞毒性化学疗法转移到毒性较小的靶向细胞抑制疗法。晚期癌症的治疗已在白血病和其他一些癌症中得到临床验证。然而，在大多数癌症中，靶向方法仍被证明不足以完全消除大多数患者的癌症。

3、癌症的靶向已经使用多种不同的方法实现，包括例如靶向癌症赖以生存和/或生长信号蛋白的小分子；具有肿瘤特异性蛋白的疫苗；使用主动杀死肿瘤细胞的免疫细胞，以及将细胞毒性分子靶向肿瘤的抗体的细胞疗法；干扰信号和/或将宿主的免疫系统(重新)引导至肿瘤细胞。

4、免疫系统的(重新)定向可通过多种方式实现。一种方法是活化t-细胞共刺激分子，诸如肿瘤坏死因子受体超家族，包括cd137(4-1bb，tnfrsf9)。cd137的活化导致t-细胞增殖增加、细胞因子产生和cd8+t-细胞存活时间延长。另一种方法是阻断由涉及免疫检查点的分子诱导的负信号，涉及免疫检查点的分子为诸如：细胞毒性t-淋巴细胞相关抗原4(ctla-4)、在t细胞上表达的程序性细胞死亡(pd-1)或其同源物配体程序性细胞死亡1配体1(pd-l1)，其可在肿瘤细胞上表达。pd-l1与pd-1结合后，信号传递导致t-细胞受体(tcr)信号减弱和t-细胞耗竭。这是肿瘤用来逃避和/或抑制免疫系统的一种机制。

5、该免疫抑制可被免疫检查点抑制剂疗法(ici)阻断，诸如针对pd-1或pd-l1的拮抗性抗体。ici治疗在与活化的cd8+t-细胞浸润和增殖相关的癌症患者亚组中显示出显著持久的反应。ici的组合(如抗pd-1和抗ctla-4)已证实可进一步提高疗效，但以毒性为代价，因为大多数患者会经历3级或4级治疗相关的不良事件。

6、pd-1/pd-l1轴和cd137的双重靶向可能有利于最佳地参与特异性抗肿瘤免疫。目前临床试验最先进的两种治疗性cd137激动剂抗体为乌瑞芦单抗(igg4)和乌托鲁单抗(igg2)。乌瑞芦单抗的开发已停止，由于患者体内cd137路径的系统性活化会导致剂量-依赖性肝炎。乌瑞芦单抗的安全施用需要降低剂量；选用0.1mg/kg与pd-1抑制剂进行组合研究。患者对乌托鲁单抗的耐受性较佳，但作为单一疗法仅具有些许的抗肿瘤活性，且在组合疗法中与pd-1阻断没有明显的协同作用。

7、因此，仍然需要为医疗保健专业人员提供更多更好的选择来治疗癌症，尤其是晚期或转移性实体瘤。

技术实现思路

1、本发明涉及一种组合疗法，其中多特异性抗体与pd-l1或pd-1抑制剂一起用于治疗有需要的受试者的癌症的方法中，所述多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点。

2、本发明提供用于(重新)引导免疫系统成分治疗癌症，尤其是晚期或转移性实体瘤的装置和方法。

3、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体，其包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，用于治疗有需要的受试者的癌症的方法中，其中该治疗还包含施用pd-l1或pd-1抑制剂。

4、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体，其包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，用于治疗有需要的受试者的癌症的方法中，其中该多特异性抗体与该pd-1或pd-l1抑制剂同时、依次或分开施用。

5、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体与pd-l1或pd-1抑制剂的组合，该多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，用于治疗有需要受试者的癌症的方法中。

6、在某些方面中，本发明提供一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，该方法包含向该有需要的受试者施用多特异性抗体以及pd-1或pd-l1抑制剂，该多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点。

7、在某些方面中，该多特异性抗体与该pd-1或pd-l1抑制剂同时、依次或分开施用。

8、在某些方面中，该癌症为晚期或转移性实体瘤，诸如选自于局部晚期或转移性肺癌和局部晚期或转移性黑色素瘤，诸如该癌症为nsclc。在某些方面中，该黑色素瘤选自于皮肤、肢端或黏膜黑色素瘤。在某些方面中，该癌症为梅克尔细胞癌(mcc)(也称为皮肤的神经内分泌癌或小梁癌)。

9、在某些方面中，该癌症在经pd-1/pd-l1疗法后复发，和/或呈pd-l1表达阳性。

10、在某些方面中，该多特异性抗体在pd-1或pd-l1抑制剂之前施用。

11、在某些方面中，该多特异性抗体为双特异性抗体。

12、在某些方面中，该与第二膜蛋白的胞外部分结合的多特异性抗体的抗原结合位点与pd-l1结合。

13、在某些方面中，本发明提供了一种多特异性抗体，用于治疗有需要的受试者的癌症的方法中，其中该抗体包含与cd137结合的结合域，该结合域包含：

14、可变域，其包含具有如seq id no:50所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:51所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:52所示的氨基酸序列的cdr3；或

15、可变域，其包含具有如seq id no:40所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:41所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:42所示的氨基酸序列的cdr3；或

16、可变域，其包含具有如seq id no:21所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:22所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:23所示的氨基酸序列的cdr3；或

17、可变域，其包含具有如seq id no:32所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:33所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:34所示的氨基酸序列的cdr3；和/或

18、其中该抗体包含与pd-l1结合的结合域，其包含：

19、可变域，其包含具有如seq id no:68所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:55所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:56所示的氨基酸序列的cdr3；或

20、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:94所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:95所示的氨基酸序列的cdr3；或

21、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:101所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:102所示的氨基酸序列的cdr3；或

22、可变域，其包含具有如seq id no:90所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:79所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:91所示的氨基酸序列的cdr3；

23、单个seq id no各自具有0、1、2、3、4或5个氨基酸插入、删除或取代，或其组合，

24、其中该多特异性抗体与pd-1或pd-l1抑制剂同时、依次或分开施用。

25、在某些方面中，本发明提供一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，该方法包含向有需要的受试者施用多特异性抗体，该多特异性抗体包含与cd137结合的结合域，该结合域包含：

26、可变域，其包含具有如seq id no:50所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:51所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:52所示的氨基酸序列的cdr3；或

27、可变域，其包含具有如seq id no:40所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:41所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:42所示的氨基酸序列的cdr3；或

28、可变域，其包含具有如seq id no:21所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:22所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:23所示的氨基酸序列的cdr3；或

29、可变域，其包含具有如seq id no:32所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:33所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:34所示的氨基酸序列的cdr3；和/或

30、其中该抗体包含与pd-l1结合的结合域，其包含：

31、可变域，其包含具有如seq id no:68所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:55所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:56所示的氨基酸序列的cdr3；或

32、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:94所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:95所示的氨基酸序列的cdr3；或

33、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:101所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:102所示的氨基酸序列的cdr3；或

34、可变域，其包含具有如seq id no:90所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:79所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:91所示的氨基酸序列的cdr3；

35、单个seq id no各自具有0、1、2、3、4或5个氨基酸插入、删除或取代，或其组合，

36、以及pd-1或pd-l1抑制剂。

37、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体，用于治疗有需要的受试者的癌症的方法中，其中该抗体包含与cd137结合的结合域，该结合域包含：

38、可变域，其包含具有如seq id no:50所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:51所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:52所示的氨基酸序列的cdr3；或

39、可变域，其包含具有如seq id no:40所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:41所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:42所示的氨基酸序列的cdr3；或

40、可变域，其包含具有如seq id no:21所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:22所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:23所示的氨基酸序列的cdr3；或

41、可变域，其包含具有如seq id no:32所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:33所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:34所示的氨基酸序列的cdr3；且/或

42、其中该抗体包含与pd-l1结合的结合域，其包含：

43、可变域，其包含具有如seq id no:68所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:55所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:56所示的氨基酸序列的cdr3；或

44、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:94所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:95所示的氨基酸序列的cdr3；或

45、可变域，其包含具有如seq id no:93所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:101所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:102所示的氨基酸序列的cdr3；或

46、可变域，其包含具有如seq id no:90所示的氨基酸序列的cdr1、具有如seq idno:79所示的氨基酸序列的cdr2、以及具有如seq id no:91所示的氨基酸序列的cdr3；

47、单个seq id no各自具有0、1、2、3、4或5个氨基酸插入、删除或取代，或其组合，

48、其中该多特异性抗体与pd-1或pd-l1抑制剂同时、依次或分开施用；以及

49、其中该癌症选自晚期或转移性实体瘤。

50、在某些方面中，本发明提供一种包含多特异性抗体的药物组合物或试剂盒，该多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，以及该多特异性抗体与pd-1或pd-l1抑制剂组合使用的说明，特别适用于治疗癌症。

51、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体与pd-1或pd-l1抑制剂的组合，该多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，用于治疗有需要的受试者的癌症。

52、在某些方面中，本发明提供用于治疗有需要的受试者的癌症的pd-1或pd-l1抑制剂，其中该pd-l1抑制剂用于与多特异性抗体同时或依序施用，该多特异性抗体包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点。

53、在某些方面中，本发明提供一种多特异性抗体，其包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点、和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，用于在已或待施用pd-1或pd-l1抑制剂的受试者中治疗癌症。

54、在某些方面中，本发明提供一种用于治疗患者癌症的pd-1或pd-l1抑制剂，其中该多特异性抗体，其包含与cd137的胞外部分结合的抗原结合位点和与第二膜蛋白的胞外部分结合的抗原结合位点，已施用或待施用。

55、在某些方面中，该多特异性抗体以介于25-300mg，如25-150mg或25-100mg，或如介于25-50mg或50-100mg的剂量施用。

56、在某些方面中，该pd-1抑制剂为派姆单抗，并以介于200-600mg，诸如介于300-500，或诸如约400mg的剂量施用。

57、在某些方面中，该癌症为晚期或转移性实体瘤。

58、在某些方面中，该多特异性抗体、pd-l1或pd-1抑制剂为经分离的抗体。

59、在某些方面中，该受试者为人类受试者。

60、在某些方面中，该受试者尚未接受过cd137激动剂的先前治疗或car t细胞疗法的先前治疗，或包括靶向小分子疗法或放射疗法的先前治疗。