一种结核杆菌耐药性检测方法与流程

本发明涉及耐药性检测，具体涉及一种结核杆菌耐药性检测方法。

背景技术：

1、结核杆菌是引起结核病的病原菌，会引起多种组织器官的结核病，如果病人感染的结核分枝杆菌对一种或一种以上的抗结核药物产生了耐药性，即为耐药结核病，现有的结核杆菌耐药性检测完全由人工操作，其步骤繁琐，工程量大，不利于大量检测。

2、现有因菌悬液透明度较高，人工涂刷观察吃力，导致平板局部易产生漏刷区域，影响抗生素纸片对菌的反应精度，导致结核杆菌的耐药性检测精度低的问题，因此提出一种结核杆菌耐药性检测方法，来为结核杆菌患者或潜在患者提供一套耐药性检测方法，通过装置替代人工进行自动化的接种准备工作、接种工作以及排废和排料的工作，降低人工操作步骤，提高操作效率，替代人工操作平板逐片区的涂刷作业方式，提高菌悬液对平板涂刷的均匀性，保证检测精度。

技术实现思路

1、针对现有技术中的问题，本发明提供了一种结核杆菌耐药性检测方法，便于为结核杆菌患者或潜在患者提供一套耐药性检测方法，通过装置替代人工进行自动化的接种准备工作、接种工作以及排废和排料的工作，降低人工操作步骤，提高操作效率，替代人工操作平板逐片区的涂刷作业方式，提高菌悬液对平板涂刷的均匀性，保证检测精度。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种结核杆菌耐药性检测方法，包括装置和耗材，所述耗材设置于装置上，所述耗材包括用于存放悬菌液的试管、无菌棉拭子和mh平板，所述无菌棉拭子为l型结构，且无菌棉拭子的棉头位于l型结构的底部，所述装置包括基座和箱板，所述箱板固定于基座外围，所述箱板一侧通过铰链盖设有箱门，所述基座顶部表面的两侧平行开设有第一滑槽和第二滑槽，所述第一滑槽内设置有立架，所述立架底部一端连接有第一齿条，所述第一齿条设置于基座内腔，所述第一齿条的齿牙面啮合有齿轮，所述齿轮远离第一齿条的一侧啮合有第二齿条，所述第二滑槽内设置有平板滑板，所述平板滑板底部一侧与第二齿条顶部一端连接；

3、所述第一齿条和第二齿条的背部均设置有滑块，且滑块与基座内壁滑动连接，所述立架底部螺纹插设有丝杆，所述丝杆两端通过轴承与基座转动连接，所述基座端部安装有第一伺服电机，所述第一伺服电机的驱动端与丝杆的端部连接；

4、所述第一齿条底部设置有第一给电电极条，所述第一齿条底部远离第一给电电极条设置有第二给电电极条，所述第二齿条的端部设置有第三给电电极。

5、通过采用上述技术方案，通过装置和耗材组成的组件，实现为结核杆菌患者或潜在患者提供一套耐药性检测方法，通过装置替代人工进行自动化的接种准备工作、接种工作以及排废和排料的工作，实现对患者的样本进行连续化的接种处理，降低人工操作步骤，提高操作效率，且以涡槽打转式的接种涂刷方式，替代人工操作平板逐片区的涂刷作业方式，提高菌悬液对平板涂刷的均匀性。

6、具体的，所述立架顶部安装有驱动向下的第二伺服电机，所述第二伺服电机的驱动端底部设置有横套，所述横套内一端插设有内板，所述内板远离横套的一端顶部安装有第二电动缸，所述第二电动缸的输出端连接有电动爪；

7、所述第二伺服电机的驱动端与立架之间安装有导电滑环，所述立架上且远离横套的底部连接有圆盘，所述圆盘内贯穿开设有导向涡槽，所述第二电动缸的输出端贯穿于导向涡槽内；

8、所述立架底部远离第一齿条的一端设置有脚轮。

9、通过采用上述技术方案，通过脚轮对立架底部辅助支撑，使立架移动期间的稳定性更好。

10、具体的，所述第二滑槽远离第一滑槽一端的顶部设置有mh平板导筒，所述平板滑板一端顶部开设有钩子折叠槽，所述钩子折叠槽一端垂直设置有钩板块，所述钩板块底部两端的轴头通过转轴与平板滑板转动连接，所述钩板块底部两端设置有扭力弹簧，所述扭力弹簧的两端分别与钩板块和平板滑板固定；

11、所述平板滑板顶部设置有若干组橡胶吸嘴，所述平板滑板底部安装有抽气泵，所述抽气泵的进气端与橡胶吸嘴的排气端连接；

12、所述第一齿条的底部通过弹簧连接有第一受电电极和第二受电电极，所述第一受电电极的输出端与抽气泵的输入端通过导线构成电连接；

13、所述mh平板导筒顶部通过弹簧铰链盖设有筒盖，所述mh平板导筒的底部开设有与钩板块对应的钩槽，所述mh平板导筒底部远离钩槽一侧开设有出板口，所述mh平板叠落于mh平板导筒中。

14、通过采用上述技术方案，扭力弹簧可使钩板块失去外部压力后回位。

15、具体的，所述基座顶部且位于第一滑槽的一侧开设有拭子出口，所述拭子出口底部插设有l形抽拉盒，所述l形抽拉盒尾端贯穿于基座外侧，所述l形抽拉盒顶部开设有拭子排列槽，所述无菌棉拭子以棉棒向下的的方式排列于拭子排列槽中，所述拭子排列槽内设置有推板，所述l形抽拉盒的尾端设置有弹簧拉杆，所述弹簧拉杆的一端与推板连接，用于对拭子排列槽中的无菌棉拭子向拭子出口处推送；

16、所述l形抽拉盒底部设置有第三电动缸，所述第三电动缸垂直于拭子出口底部，所述述l形抽拉盒远离弹簧拉杆一端的底部开设有与第三电动缸输出端对应的杆孔，所述第三电动缸的套筒与基座固定，所述第三电动缸的套筒一侧设置有第三受电电极，所述第三受电电极的输出端与第三电动缸的输入端通过导线构成电连接。

17、通过采用上述技术方案，由拭子出口对基座上排出无菌棉拭子。

18、具体的，所述拭子出口一侧平行设置有滑轨，所述滑轨顶部滑动连接有l形滑台，所述l形滑台顶部开设有试管插口，所述试管底部插入试管插口中；

19、所述箱门底部开设有与l形抽拉盒对应的槽口，所述箱板和箱门内侧均安装有紫外线杀菌灯。

20、通过采用上述技术方案，在接种操作结束后，开启紫外线杀菌灯，通过紫外线杀菌灯对整体装置内部进行照射杀菌。

21、具体的，所述基座一侧设置有mh板台，所述箱门底部开设有与mh板台对应的出板口，所述出板口上通过铰链安装有挡板。

22、通过采用上述技术方案，通过挡板对出板口遮挡，提高出板口内部的密封性。

23、具体的，所述第二滑槽底部开设有废料下排口，所述基座一侧插设有废料回收屉，所述废料下排口与废料回收屉相通。

24、通过采用上述技术方案，通过废料回收屉对废气的拭子集中回收。

25、具体的，所述箱板两端分别通过转轴安装有第一电动缸，所述第一电动缸的输出端通过转轴与箱门的端部转动连接；

26、所述第二滑槽远离第一滑槽的一侧垂直设置有第四电动缸，所述第四电动缸的套筒与基座连接，所述第四电动缸的输出端连接有弧形推板，所述第二受电电极的输出端与第四电动缸的输入端通过导线构成电连接。

27、具体检测步骤如下：

28、步骤一：收集样本：收集患者下呼吸道痰液，通过生理盐水洗涤痰液数次，以去除血液、唾液和其他非微生物成分，得到样本；

29、步骤二：处理样本：取无菌接种环挑取样本至具有生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管中，对试管振荡，振荡均匀制成约0.5麦氏浊度(约108-109cfu/ml的菌悬液，得到具有菌悬液的试管；

30、步骤三：装配试管：抽拉出l形滑台，使试管插口露出，将具有菌悬液的试管底部插入试管插口中，再将l形滑台推入，完成菌悬液的接种准备；

31、步骤四：接种准备：

32、1、开启第一伺服电机驱动丝杆反转，丝杆带动立架移动至拭子出口顶部，与立架连接的第一齿条同步向右移动，第一齿条上的第三给电电极与第三受电电极接触，第三受电电极通电，第三电动缸工作，第三电动缸输出端上推l形抽拉盒中的无菌棉拭子，使无菌棉拭子上端排出拭子出口，第二电动缸下推电动爪，由电动爪对排出拭子出口的无菌棉拭子上端夹持；

33、第一齿条向右移动的同时，第一齿条推转齿轮，齿轮推转第二齿条，第二齿条向左移动，且第二齿条带动平板滑板进入mh平板导筒底部，为带走mh平板导筒内底部的mh平板做好准备；

34、2、第一伺服电机驱动丝杆正转，丝杆带动立架向左移动，且第一齿条同步向左移动，直至电动爪夹持的无菌棉拭子垂直于试管上，第三电动缸下推电动爪，无菌棉拭子的棉头进入试管，对试管中的菌悬液吸覆，第三电动缸输出端回收，无菌棉拭子离开试管；

35、第一齿条向左移动的同时对齿轮推转，齿轮带动第二齿条向右移动，平板滑板端部的钩板块在向右移动期间，钩板块将mh平板导筒内底部的mh平板通过出板口带出，并滞留于平板滑板上，同时，mh平板导筒内上方的mh平板落下填补原来位置的mh平板；

36、3、第一伺服电机继续驱动丝杆正转，立架和平板滑板持续相向移动，直至平板滑板与立架上的圆盘垂直，同时，第二齿条上的第一受电电极与第一给电电极条接触，抽气泵通电工作，抽气泵对橡胶吸嘴抽气，橡胶吸嘴对平板滑板上的mh平板底部吸附固定。

37、步骤五，接种：

38、1、第二电动缸下推电动爪，无菌棉拭子的棉头与mh平板的培养面圆心接触；

39、2、第二伺服电机驱动横套正转，第二电动缸的输出端受导向涡槽的导向，在导向涡槽内涡狀旋转移动，此时，无菌棉拭子的棉头在mh平板的培养面由圆心圆周表面涂刷，直至涂刷至导向涡槽的尾端，得到接种后的mh平板；

40、3、第二伺服电机驱动横套反转，使涂刷结束的无菌棉拭子回位到导向涡槽的圆心；

41、步骤六：排废和排料：

42、1、第一伺服电机驱动丝杆继续正转，直至涂刷结束的无菌棉拭子垂直于废料下排口上，同时接种后的mh平板移动至弧形推板前方，同时第二受电电极与第二给电电极条接触，且第一受电电极离开第一给电电极条；

43、第二受电电极受电，第四电动缸通电工作，第四电动缸推出弧形推板，弧形推板将接种后的mh平板对出板口推出，使接种后的mh平板置于mh板台上；

44、2、电动爪松开涂刷结束的无菌棉拭子，涂刷结束的无菌棉拭子由废料下排口掉落至废料回收屉中；

45、3、第一伺服电机驱动丝杆反转回位，并重复步骤四至步骤五的工作；

46、步骤七：耐药性检测人员依次拾取mh板台上得到的接种后的mh平板，并依次通过无菌镊子将所需检测的抗生素纸片贴布于接种后的mh平板的表面，各纸片间中心间距不得小于24mm，纸片距mh平板边缘不得小于15mm，再依次对贴片后的mh平板盖上盖子；

47、步骤八：纸片贴完后，放置约15-30min后，将mh平板置于35℃倒置培养18-24h后，观察mh平板中抗生素纸片周围出现的抑菌圈大小，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。

48、本发明的有益效果：通过装置和耗材组成的组件，实现为结核杆菌患者或潜在患者提供一套耐药性检测方法，通过装置替代人工进行自动化的接种准备工作、接种工作以及排废和排料的工作，实现对患者的样本进行连续化的接种处理，降低人工操作步骤，提高操作效率，且以涡槽打转式的接种涂刷方式，替代人工操作平板逐片区的涂刷作业方式，提高菌悬液对平板涂刷的均匀性，保证检测精度，解决现有因菌悬液透明度较高，人工涂刷观察吃力，导致平板局部易产生漏刷区域，影响抗生素纸片对菌的反应精度，导致结核杆菌的耐药性检测精度低的问题。