利用基因编辑GmTPS22基因获得高油酸大豆的方法

本发明属于基因工程，尤其涉及利用基因编辑gmtps22基因获得高油酸大豆的方法。

背景技术：

1、大豆起源于中国，是中国最早的栽培作物之一。是人类重要的植物蛋白来源和食用植物油来源，大豆油的供应量占世界食用植物油总量的1/3左右。大豆油的生产工艺、耐储存性、营养和安全，主要受制于大豆中的油脂品质。大豆中主要五种脂肪酸的含量和在大豆油脂中所占的比例直接决定了大豆油脂的品质。其中油酸含量比例的高与低，是作为衡量大豆油脂品质的重要标准。油酸也被称为“安全脂肪酸”，系统命名为十八碳烯酸(c18:1)，是单不饱和脂肪酸，在大豆油脂中含量丰富。医学研究表明油酸具有降低人体血液中胆固醇含量的作用，并且人体对油酸的合成不能满足自身供给，需从食物中摄入，故而油酸酸也被称为“必需脂肪酸”。此外，高油酸含量的大豆油不易变质、热稳定性高，可以降低大豆油生产和储存的成本。因此，培育高油酸的大豆品种成为大豆优质高产育种的重要目标。

2、对gmtps22基因，在cog、go、kegg、swissprot、pfam、eggnog六个数据库对预测出来的编码基因进行蛋白质比对，发现该基因参与调控赤霉素的合成。研究报道，在拟南芥、红花、油菜中，赤霉素的含量对脂肪酸的合成有重要影响，并且有报道赤霉素在生殖生长过程中对油酸和亚油酸合成过程中的关键酶基因fad2基因家族的表达量产生了影响，本发明假设该基因是通过调控赤霉素的合成间接调控油酸的含量，在后续转基因验证过程中进一步进行分析，对大豆高油酸分子标记辅助育种提供理论基础。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供利用基因编辑gmtps22基因获得高油酸大豆的方法，旨在解决上述背景技术中提出的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、gmtps22基因，所述gmtps22基因的核苷酸序列，由2715个碱基组成，如seq idno.1所示，所述gmtps22基因编码蛋白的氨基酸序列如seq idno.2所示，共编码821个氨基酸。

4、gmtps22基因在提高转基因大豆成熟籽粒的油酸含量中的应用。

5、利用基因编辑gmtps22基因获得高油酸大豆的方法，包括以下步骤：

6、利用全基因组关联分析(gwas)筛选到一个与油酸含量相关的重要候选基因gmtps22，为了进一步研究该基因的功能，从大豆“ko99”品种中克隆一个调控赤霉素相关的关键基因gmtps22，构建pcbsg015-gmtps22基因编辑载体，通过农杆菌介导法，将pcbsg015-gmtps22基因编辑载体转入受体大豆吉农38的基因组中，利用实时荧光定量pcr(实时pcr)的方法来检验t2代转基因大豆株系r5、r6、r7时期豆荚和籽粒中gmtps22基因的相对表达量，利用nirsds2500近红外分析仪测定t2代基因编辑大豆株系和对照植株成熟籽粒中油酸含量，最终获得遗传稳定的高油酸含量的基因编辑大豆新品系2个。

7、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

8、本发明通过基因编辑gmtps22基因并将其转入大豆吉农38中，可以获得稳定的高油酸的大豆遗传材料，对于改善大豆油脂品质具有重要意义，能够为大豆育种和生产提供有力的技术支持。

技术特征：

1.gmtps22基因，其特征在于，所述gmtps22基因的核苷酸序列如seq idno.1所示，所述gmtps22基因编码蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.gmtps22基因在提高转基因大豆成熟籽粒的油酸含量中的应用。

3.利用基因编辑gmtps22基因获得高油酸大豆的方法，其特征在于，包括以下步骤：

技术总结本发明适用于基因工程技术领域，提供了利用基因编辑GmTPS22基因获得高油酸大豆的方法，所述GmTPS22基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述GmTPS22基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明克隆了一个调控赤霉素相关的关键基因GmTPS22，构建pCBSG015‑GmTPS22基因编辑载体，通过农杆菌介导法，将pCBSG015‑GmTPS22基因编辑载体转入受体大豆吉农38中，再对得到的转基因大豆植株进行继代繁殖及鉴定，获得遗传稳定的高油酸含量的基因编辑大豆新品系，对于改善大豆油脂品质具有重要意义，能够为大豆育种和生产提供有力的技术支持。技术研发人员：仉祺,王丕武,王鑫雨,董青松,刘思言,姚丹,关淑艳,魏健,宋阳,张卓,刘露,吕辰强,姚志远,杨敬坤受保护的技术使用者：吉林农业大学技术研发日：技术公布日：2024/9/29