基于胶原样蛋白的海绵的制作方法

本发明涉及制备基于胶原样蛋白的海绵的方法，其包括以下步骤：i)提供包含至少一种胶原样蛋白和任选存在的至少一种添加剂的水性溶液；ii)经由孵育用至少一种交联剂将所述至少一种胶原样蛋白交联，以获得水凝胶；iii)任选地，用缓冲液洗涤所述水凝胶；iv)执行冻干步骤以获得所述海绵；v)任选地加入至少一种添加剂；和vi)任选地对获得的海绵灭菌。此外，本发明涉及通过根据本发明的方法获得的海绵，和所述海绵的用途，其用于伤口密封、止血、伤口堵塞、愈合促进、骨再生、软骨修复、细胞培养、素食肉类或严格素食肉类的生产、对生物流体例如血液或伤口渗出物的吸收。

背景技术：

1、本发明的目的是提供衍生自动物的胶原海绵的替代物，该替代物可以用于医疗领域中，例如以用于伤口密封、止血、伤口堵塞、愈合促进、骨再生、软骨修复、细胞培养、或对生物流体例如血液或伤口渗出物的吸收。当被应用于医疗应用中时，替代海绵应至少具有类似的特性，并且另外避免衍生自动物胶原的海绵的挑战和问题，例如过敏或不耐受。

2、另外，动物胶原在水中表现出差的溶解性，并且在乙酸或盐酸中形成粘稠溶液。通过首先冷冻干燥所述粘稠溶液，然后交联经冷冻干燥的材料，实现了交联剂溶液与蛋白质网络的直接接触(固-液稳定化)。该程序比交联剂通过粘稠溶液的扩散更快。然而，因为经干燥的蛋白质部分地重新进入溶液，所以所述经冷冻干燥的材料的初始网络结构不能被有效地保存。最终，在交联经冷冻干燥的材料之后，交联产物再次处于湿润状态并需要进一步的冷冻干燥步骤。

3、在这点上，本发明的发明人发现了，根据本发明的基于胶原样蛋白的海绵不仅可以克服上述问题中的一个或多个，而且获得的海绵在与液体接触之后与基于衍生自动物的胶原的海绵相比还出人意料地显示出改善的形式稳定性。此外，根据本发明的海绵显示出改善的刚度、杨氏模量性质以及开孔孔隙率。此外，鉴于用于衍生自动物胶原的海绵的“常见”方法，本发明的方法通过需要更少的方法步骤而也得到了改善。

技术实现思路

1、因此，在第一方面，本发明涉及制备基于胶原样蛋白的海绵的方法，其包括以下步骤：

2、i)提供包含至少一种胶原样蛋白和任选存在的至少一种添加剂的水性溶液；

3、ii)经由孵育用至少一种交联剂将所述至少一种胶原样蛋白交联，以获得水凝胶；

4、iii)任选地，用缓冲液洗涤所述水凝胶；

5、iv)执行冻干步骤以获得所述海绵；

6、v)任选地加入至少一种添加剂；和

7、vi)任选地，对获得的海绵灭菌，优选地经由等离子体、γ或uv处理对获得的海绵灭菌。

8、在第二方面，本发明涉及通过根据本发明的方法获得的海绵。

9、最后，在第三方面，本发明涉及根据本发明的海绵的用途，其用于伤口密封、止血、伤口堵塞、愈合促进、骨再生、软骨修复、细胞培养、素食肉类或严格素食肉类的生产、对生物流体例如血液或伤口渗出物的吸收。

技术特征：

1.制备基于胶原样蛋白的海绵的方法，其包括以下步骤或由以下步骤组成：

2.根据权利要求1所述的方法，其中彼此发生反应的所述至少一种胶原样蛋白的官能团与所述至少一种交联剂的官能团是以1∶0.01至1∶5的比率存在。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述至少一种胶原样蛋白是：

4.根据前述权利要求中的任意一项所述的方法，其中，所述至少一种交联剂

5.根据前述权利要求中的任意一项所述的方法，其中所述孵育被执行5分钟至48h和/或在4至37℃执行。

6.根据前述权利要求中的任意一项所述的方法，其中，所述缓冲液具有5.5至8.2的ph值，和/或选自2-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙烷-1-磺酸缓冲液、2-吗啉-4-基乙烷磺酸缓冲液、和磷酸盐缓冲盐水。

7.根据前述权利要求中的任意一项所述的方法，其中，所述冻干步骤在-40至-60℃执行；和/或

8.海绵，所述海绵是通过根据权利要求1至7中的任意一项所述的方法获得的。

9.根据权利要求8所述的海绵，所述海绵具有：

10.根据权利要求8或9所述的海绵的用途，其用于伤口密封、止血、伤口堵塞、愈合促进、骨再生、软骨修复、细胞培养、素食肉类或严格素食肉类的生产、对生物流体例如血液或伤口渗出物的吸收。

技术总结本发明涉及制备基于胶原样蛋白的海绵的方法，其包括以下步骤：i)提供包含至少一种胶原样蛋白和任选存在的至少一种添加剂的水性溶液，所述水性溶液优选地具有6至8的pH值；ii)经由孵育用至少一种交联剂将所述至少一种胶原样蛋白交联，以获得水凝胶；iii)任选地，用缓冲液洗涤所述水凝胶；iv)执行冻干步骤以获得所述海绵；v)任选地加入至少一种添加剂；和vi)任选地，对获得的海绵灭菌，优选地经由等离子体、γ或UV处理对获得的海绵灭菌。此外，本发明涉及通过根据本发明的方法获得的海绵，和所述海绵的用途，其用于伤口密封、止血、伤口堵塞、愈合促进、骨再生、软骨修复、细胞培养、素食肉类或严格素食肉类的生产、对生物流体例如血液或伤口渗出物的吸收。技术研发人员：M·扬纳施,S·韦伯,M·蒙特罗米拉贝特受保护的技术使用者：赢创运营有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/10