一种干腌火腿复合活性肽的应用及其制备

本发明涉及一种干腌火腿复合活性肽的应用及其制备，属于生物活性肽领域。

背景技术：

1、高尿酸血症是人体核苷及嘌呤代谢紊乱所引起的代谢性疾病，血清尿酸盐水平超过正常范围(即男性上限7.0mg/dl，女性上限为6.0mg/dl)的生化异常。随着人们生活水平的提高，饮食结构发生了很大的变化，成年人尿酸高水平已经超过20％。我国有超过3.2亿人患有高尿酸血症，每年新增痛风患者近百万。高尿酸血症已成为危害人类健康的第二大疾病。长期升高的尿酸会加速心血管疾病的发展，无症状高尿酸血症与代谢综合征、糖尿病风险显著相关。当血尿酸含量过高，尿酸盐晶体便会沉积在关节、软组织、肾脏等部位引起炎症和组织损伤等问题，导致痛风、肾结石等肾脏疾病。黄嘌呤氧化是尿酸合成的最后一步的关键酶，是抑制尿酸合成药物的主要靶点。

2、目前，市场上的降尿酸类产品主要有两种，一种是黄嘌呤氧化酶抑制剂类产品，如别嘌醇、非布司他等；另外一类是促尿酸排泄剂。两类药物都有其局限性，而且不可避免的发热、皮疹、腹痛腹泻、肾功能损伤等副作用。因此，寻找天然有效的降尿酸物质是一个重要而紧迫的任务，为高尿酸人群研制天然降尿酸保健食品及活性药物十分必要。

技术实现思路

1、为了解决现有药物在治疗尿酸中的不足，本发明提供了一种干腌火腿复合活性肽，所述干腌火腿复合肽包括：leu-leu-leu-leu-leu-his-gla(lllllha)、glu-his-val-glu-pro-glu-glu(ehvepee)、leu-leu-phe-val-leu-pro-leu(llfvlpl)、leu-leu-phe-lys-phe-leu(llpkpl)和leu-leu-leu-leu-cys-asp-cys(llllcdc)5个多肽，它们的氨基酸序列分别如seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4和seq id no:5所示。

2、本发明所述干腌火腿复合活性肽在制备降尿酸药物中的应用。

3、作为进一步优选的，所述干腌火腿降尿酸活性肽的制备方法包括以下步骤：

4、(1)将干腌火腿于盐酸混合均质处理后离心，取上清ⅰ，在上清ⅰ中加入乙醇静置离心次取上清ⅱ，上清液ⅱ用超滤膜超滤收集滤液冷冻干燥得到干腌火腿粗提肽。

5、(2)用葡聚糖凝胶柱对干腌火腿粗提肽进一步分离纯化，收集黄嘌呤氧化酶抑制活性最高的单峰的洗脱液，冷冻干燥即得到干腌火腿降尿酸活性肽。

6、(3)通过lc-ms/ms对步骤(2)得到的干腌火腿降尿酸活性肽进行鉴定。

7、优选的，步骤(1)中盐酸的浓度为0.2mmol/l。

8、优选的，步骤(1)中乙醇的浓度为70％，用量为上清液ⅱ体积的2～2.5倍。

9、优选的，步骤(1)中超滤膜的截留分子量为3k da。

10、优选的，步骤(2)中用葡聚糖凝胶柱纯化过程中上样体积为200μl，流速为0.3ml/min。

11、优选的，步骤(2)中所述葡聚糖凝胶柱为sephadex g15。

12、本发明的有益效果

13、(1)本发明获得的干腌火腿复合活性肽无毒性和副作用，且具有很好的降尿酸作用，可用于降尿酸药物的制备。

14、(2)本发明通过一种简单、高效的方法从干腌火腿中得到5种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的肽。

技术特征：

1.一种干腌火腿复合活性肽，其特征在于：所述干腌火腿复合肽包括：leu-leu-leu-leu-leu-his-gla、glu-his-val-glu-pro-glu-glu、leu-leu-phe-val-leu-pro-leu、leu-leu-phe-lys-phe-leu、l e u-l e u-l e u-l e u-c y s-as p-c y s共5个肽。

2.权利要求1所述干腌火腿复合活性肽在制备降尿酸药物中的应用。

3.权利要求1所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中盐酸的浓度为0.2mmol/l。

5.根据权利要求3所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中乙醇的浓度为70％，用量为上清液ⅱ体积的2～2.5倍。

6.根据权利要求3所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中超滤膜的截留分子量为3k da。

7.根据权利要求3所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中用葡聚糖凝胶柱纯化过程中上样体积为200μl，流速为0.3ml/min。

8.根据权利要求3所述干腌火腿复合活性肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述葡聚糖凝胶柱为sephadex g15。

技术总结本发明公开了一种干腌火腿复合活性肽的应用及其制备，属于保健食品及药品领域。该活性肽包括5个新肽，序列为：LLLLLHA(Leu‑Leu‑Leu‑Leu‑Leu‑His‑Gla)、EHVEPEE(Glu‑His‑Val‑Glu‑Pro‑Glu‑Glu)、LLFVLPL(Leu‑Leu‑Phe‑Val‑Leu‑Pro‑Leu)、LLPKPL(Leu‑Leu‑Phe‑Lys‑Phe‑Leu)、LLLLCDC(Leu‑Leu‑Leu‑Leu‑Cys‑Asp‑Cys)，制备方法为：将干腌火腿与酸溶液混合、均质，搅拌提取后过滤、离心、超滤，通过葡聚糖凝胶柱进一步纯化，用LC‑MS/MS鉴定得到干腌火腿降尿酸活性肽，干腌火腿降尿酸活性肽对黄嘌呤氧化酶抑制IC50值为8.32mg/mL～13.56mg/mL，同时具有良好的抗氧化活性。本发明筛选出的降尿酸肽具有活性高、制备方法简单的特点，可用于制备食品和药品。技术研发人员：李莉蓉,姚登杰,黄锐,张文文,李雯雯,曾春银,曹建新受保护的技术使用者：昆明理工大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10