一种预测结核病严重程度及预后的生物标志物及其应用

本发明属于生物，具体涉及一种预测结核病严重程度及预后的生物标志物及其应用。

背景技术：

1、结核病的发生、发展与结核分枝杆菌感染并累及脏器密切相关，临床以肺结核为主，易因结核分枝杆菌在肺部迅速繁殖，导致病灶及(或)全身出现炎症反应(王玉婷，张娟，群玛吉.结核分枝杆菌igg/igm抗体、正五聚蛋白3及肝素结合蛋白对肺结核患者病情动态演变的监测价值[j].临床和实验医学杂志，2020,(22):2416-2420.)。肺结核患者会出现干咳或咳血、体质量减轻、低热等症状，且病程较长，容易反复，对患者的生活质量造成严重影响。尽管大多数肺结核患者经正规治疗后均能控制病情，但因治疗周期长、不良反应较为常见，导致相当一部分患者未能得到有效的治疗，治疗效果不甚理想。关于肺结核的诊断方法，以痰结核分枝杆菌检查、胸部影像学检查等为主，并结合是否有肺结核接触史，然而非活动性肺结核的漏诊率和误诊率较高。与此同时，部分肺结核患者因未得到有效诊治，导致病情发展，显著增大后续治疗的难度。因此寻找合适的血液学指标，进而监测病情、评估疾病严重程度，对制定更佳的诊治方案具有重要的临床意义。

2、近年来的研究认为，多种细胞因子在肺结核患者中存在异常表达，参与肺结核的发生、发展，了解细胞因子在肺结核中的作用机制对该病的治疗具有重大帮助(reichlermr,hirsch c,yuan yan,et al.predictive value of tnf-α,ifn-γ,and il-10fortuberculosis among recently exposed contacts in the united states and canada[j].bmc infectious diseases,2020,20(1):553.)。有研究发现，随着肺结核病情由轻症发展至重症，患者血清pge2和ykl-40水平显著升高，而治疗后其水平显著下降。二者单独诊断时auc值分别为0.800、0.817，联合后auc值为0.899，提示当血清pge2水平>89.32ng/l、ykl-40水平>49.05ng/ml时，肺结核患者病情进一步加重的风险较大(陈良玉,林霏申,郭晶,等.肺结核患者血清pge_2、ykl-40含量及其与病情严重程度的相关性[j].临床肺科杂志,2024,29(07):1084-1089.)。

3、半乳凝集素-9(galectin-9，gal-9)又名s2选择素，为半乳凝集素家族成员，是tim-3的天然型配体。galectin-9可广泛表达于人淋巴细胞和其他多种类型的细胞表面，在机体免疫内环境和免疫细胞稳态维持方面起重要调节作用(thijssen vl,heusschen r,caers j,et al.galectin expression in cancer diagnosis andprognosis:asystematic review[j].biochim biophys acta,2015,1855(2):235-247)。galectin-9可与th1细胞上的tim-3分子的糖基化侧链特异性结合，给th1细胞提供一种负性共刺激信号，下调th1细胞的免疫功能、诱导th1细胞聚集和凋亡，同时th1细胞相关细胞因子的表达水平也会下降(merani s,chen w,elahi s.the bitter side of sweet:the role ofgalectin-9in immunopathogenesis ofviral infections[j].rev medvirol,2015,25(3):175-186.)。sgal-9是膜gal-9的可溶性存在形式，能够与t细胞上tim-3结合，向t细胞内传递抑制信号，所以过高sgal-9水平，能够抑制抗原特异性t细胞，从而促进肿瘤免疫逃逸或者病原体特异性免疫应答，不利于病原清除。

技术实现思路

1、本发明通过检测肺结核患者血浆中sgal-9的水平，分析sgal-9水平诊断重症结核病，辅助结核病临床诊疗工作以及改善患者预后；基于sgal-9鉴别诊断肺结核重症及预后的方法简单、快速、灵敏度及特异度均较高。基于此，完成了本发明。

2、第一方面，本发明提供一种诊断重症肺结核的生物标志物，所述生物标志物为sgal-9；当sgal-9水平高于临界值70231pg/ml时，提示为重症肺结核。

3、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

4、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

5、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

6、第二方面，本发明提供一种生物标志物在制备诊断重症肺结核的试剂中的应用，所述生物标志物为sgal-9，所述试剂为含有可以检测患者生物样本中sgal-9含量的试剂；当sgal-9水平高于临界值70231pg/ml时，提示为重症肺结核。

7、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

8、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

9、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

10、第三方面，本发明提供一种诊断重症肺结核的试剂盒，所述试剂盒包含检测患者生物样本中sgal-9含量的试剂；当sgal-9水平高于临界值70231pg/ml时，提示为重症肺结核。

11、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

12、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

13、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

14、进一步，所述试剂盒可以为elisa检测试剂盒、胶体金检测试剂盒、免疫组化试剂盒、免疫荧光试剂盒和/或原位杂交染色试剂盒中的一种或多种。

15、更进一步，所述试剂盒诊断方法包括直接法、间接法、双抗夹心法和/或竞争法中的一种或多种。

16、第四方面，本发明提供一种预测肺结核预后效果的生物标志物，所述生物标志物为sgal-9；当sgal-9水平高于临界值97541pg/ml时，提示有死亡风险。

17、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

18、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

19、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

20、第五方面，本发明提供一种生物标志物在制备预测肺结核预后效果的试剂中的应用，所述生物标志物为sgal-9，所述试剂为含有可以检测患者生物样本中sgal-9水平的试剂；当sgal-9水平高于临界值97541pg/ml时，提示有死亡风险。

21、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

22、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

23、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

24、第六方面，本发明提供一种预测肺结核预后效果的试剂盒，所述试剂盒包含检测患者生物样本中sgal-9水平的试剂；当sgal-9水平高于临界值97541pg/ml时，提示有死亡风险。

25、进一步，所述生物样本来自于患者全血、血清或血浆。

26、优选的，所述生物样本来自于患者血浆。

27、进一步，所述肺结核包括原发性肺结核、血行播散性肺结核、继发性肺结核、气管或支气管结核和结核性胸膜炎。

28、进一步，所述试剂盒可以为elisa检测试剂盒、胶体金检测试剂盒、免疫组化试剂盒、免疫荧光试剂盒和/或原位杂交染色试剂盒中的一种或多种。

29、更进一步，所述试剂盒诊断方法包括直接法、间接法、双抗夹心法和/或竞争法中的一种或多种。

30、有益效果

31、本发明筛选得到的生物标志物可以区分肺结核重症和非重症患者，预测肺结核患者预后。其中，sgal-9用于区分肺结核重症和非重症患者时，auc值为0.7620，特异性>82.35％；sgal-9用于预测肺结核患者预后时，auc值>0.8，特异性接近90.00％；说明sgal-9作为区分肺结核重症和非重症患者和预测肺结核患者预后的生物标志物，具有较高的准确性和特异性，有助于帮助临床诊疗方案的确定。