一种MET抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌EBC-1细胞株、试剂盒及其应用的制作方法

本发明涉及met抑制剂耐药的细胞株，具体涉及一种met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株、试剂盒及其应用。

背景技术：

1、肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤，根据形态特点分为两种类型：小细胞肺癌(sclc)和非小细胞肺癌(nsclc)，其中绝大多数为非小细胞肺癌，约占85％。非小细胞肺癌又可进一步分为三类：肺腺癌、肺鳞状细胞癌(又称肺磷癌，lscc)和肺大细胞癌。肺鳞状细胞癌是一种常见肺癌，约占原发性肺癌的40％～51％。

2、对于非小细胞肺癌(nsclc)的患者而言，egfr(表皮生长因子)是常见的治疗靶点之一，被称为“黄金突变”。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(egfr-tyrosine kinasesinhibitor，egfr-tki)靶向治疗是晚期nsclc的重要治疗方式，但随着治疗时间延长，几乎所有患者都会出现耐药现象，而在这其中有5％-20％的原因是细胞间质上皮转化因子(c-met)扩增。间质上皮转化因子(met)是一种原癌基因，编码蛋白c-met是肝细胞生长因子(hgf)的受体，具有酪氨酸激酶的活性。当met基因发生异常时，则会促进肿瘤增殖与转移。

3、卡马替尼(capmatinib)是一种口服、强效、高选择性的met抑制剂，其主要作用机制是抑制由肝细胞生长因子结合或由met扩增引发的met磷酸化，从而抑制met介导的下游信号蛋白的磷酸化以及met依赖性癌细胞的增殖和存活。《新英格兰医学期刊》上公布的试验结果表明，其一线治疗效果十分突出。目前，capmatinib已被肺癌国际指南优先推荐用于met的第14号外显子跳突非小细胞肺癌的全线治疗，为这类患者提供了新的临床解决方案。

4、很多常规靶向药物，如egfr抑制剂、cdk抑制剂都会随用药时间增加出现一定耐药现象。capmatinib的应用虽然可以为肺鳞癌患者提供较好的用药体验，但是难以减小耐药性增加致使治疗瓶颈提前的可能性。而自2020年5月capmatinib经fda批准上市至今，临床使用时间较短，尚未有耐药情况相关报道，因此建立met抑制剂耐药的人肺癌细胞株具有重要研究意义。

技术实现思路

1、为了研究capmatinib的耐药问题，建立对capmatinib耐药的细胞株尤为重要。本发明提供了一种met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株。其是保藏编号为cctccno：c2024222的人肺鳞状细胞癌耐药细胞株homo sapiens，命名是cap-r-ebc-1-pa。

2、此外，由于cap-r-ebc-1-pa为非小细胞肺癌耐药细胞株，可用于筛选对非小细胞肺癌耐药的有效的化合物和/或组合物，从而评价治疗非小细胞肺癌耐药的药物的有效性。因此，本发明还提供如上所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株在评价治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

3、在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

4、本发明还提供如上所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株在筛选治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

5、在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

6、本发明还提供一种试剂盒，其包含如上所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株。

7、本发明还提供如上所述的试剂盒在评估治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

8、在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

9、本发明还提供如上所述的试剂盒在筛选治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

10、在一些实施方案中，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

11、与现有技术相比，本发明中具备以下有益效果：

12、1、本发明筛选得到的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌细胞株cap-r-ebc-1-pa，对capmatinib的相对半最大效应浓度(relative ic50)为524.9nmol/l，对capmatinib的体外耐药指数(resistant index，ri)是833.84。ri的计算公式为：ri＝relativeic50 ebc-1-筛选/relative ic50 ebc-1-parental。relative ic50 ebc-1-parental表示用于筛选的亲本细胞株的相对半最大效应浓度；relative ic50 ebc-1-筛选表示筛选得到的细胞株的半最大效应浓度。当求cap-r-ebc-1-pa对capmatinib的体外耐药指数时，relative ic50ebc-1-筛选带入524.9nmol/l。

13、2、本发明的cap-r-ebc-1-pa，可用于研究met抑制剂耐药机制，揭示肺鳞状细胞癌的耐药机制、筛选新的抗肿瘤药物，为寻找逆转人肺鳞状细胞癌耐药的有效药物及方法提供了细胞研究模型，对于制备治疗人肺鳞状细胞癌的产品的开发具有较高的科研价值和应用前景。

14、以下将结合附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本发明的目的、特征和效果。

技术特征：

1.一种met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株，其特征在于，其是保藏编号为cctcc no：c2024222的人肺鳞状细胞癌耐药细胞株，命名是cap-r-ebc-1-pa。

2.根据权利要求1所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株在评价治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

4.根据权利要求1所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株在筛选治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

6.一种试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的met抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌ebc-1细胞株。

7.根据权利要求6所述的试剂盒在评价治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

9.根据权利要求6所述的试剂盒在筛选治疗非小细胞肺癌耐药的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述非小细胞肺癌耐药为肺鳞状细胞癌耐药。

技术总结本发明公开了一种MET抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌EBC‑1细胞株、试剂盒及其应用。该MET抑制剂耐药的人肺鳞状细胞癌EBC‑1细胞株是保藏编号为CCTCC NO：C2024222的人肺鳞状细胞癌耐药细胞株，命名是Cap‑R‑EBC‑1‑Pa。Cap‑R‑EBC‑1‑Pa可用于研究MET抑制剂耐药机制，揭示肺鳞状细胞癌的耐药机制、筛选新的抗肿瘤药物，为寻找逆转人肺鳞状细胞癌耐药的有效药物及方法提供了细胞研究模型，对于制备治疗人肺鳞状细胞癌的产品的开发具有较高的科研价值和应用前景。技术研发人员：白鹏,崔雯,王雪麟,许洪,陈旭,张志翔,谷庆阳受保护的技术使用者：南通药明康德医药科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/12/2