一种丽江白块菌的大树接种方法

本发明属于生物，具体涉及一种丽江白块菌的大树接种方法。

背景技术：

1、块菌，也称松露，隶属盘菌目（pezizales）、块菌科（tuberaceae），是一类著名的野生食用菌，其中以意大利白块菌和法国的黑孢块菌最为名贵，被誉为“厨房里的钻石”“地下黄金”等，常被我国西南各地百姓叫做“猪拱菌”，商业上多称为松露。具有独特的香味、口感和营养价值，人类食用块菌已有上千年的历史。在欧美等发达国家，块菌号称“黑色金刚石”，是野生菌的极品，它与鱼子酱、鹅肝酱同被称为三大珍品。块菌有多种疗效，富含17种氨基酸、8种维生素、适量的蛋白质、以及雄性酮、甾醇、鞘脂、脂肪酸、氨基酸及微量元素等50余种生理活性成分。并且含有人体自身不能合成的8种氨基酸、锌、锰、铁、钙、磷、硒等必需营养素，具有增强免疫力、抗衰老、益胃、清神、止血、疗痔等药用价值；具有抗癌活性，对癌细胞有一定的抑制作用，可以激发脑细胞活力。

2、块菌清香可口，是欧美地区喜食的菌类之一，主要鲜食、制成饮食调料或提取所需成分用于化妆品。目前，黑块菌在日本、欧美的市场价格处于每公斤50-1000美元之间，国内黑块菌市场价格处于每公斤500-1000元之间，上等的意大利白块菌的售价可达每公斤5000多欧元，是价格昂贵的菌种之一。

3、丽江白块菌于2011年被正式命名，是生长于云南省丽江市永胜县的一种白色块菌，直径0.5-3cm，为亚球形或不规则球形，幼嫩期为白色，随着成熟度的增加，表皮逐渐变为灰白色，完全成熟时香味浓郁，孢子为灰褐色，间杂白色至灰白色脉络，子囊大小为：60-90×50-80µm，孢子大小为25-42.5µm。丽江白块菌与黑块菌相比，口感更加细腻绵密软糯，商品价值是黑块菌的5-8倍，具有巨大的开发利用前景。但目前除了丽江当地农民采集野生丽江白块菌售卖以外，还未见任何开发研究报道。野生丽江白块菌资源稀少，产量极低，远远不能满足人们的需求。

4、块菌由于营养物质丰富、功能成分含量高、香味浓郁，价值较高，所以野生资源常被过度采挖，且野生块菌菌塘被大量破坏，造成产量逐年减少。目前实现块菌产量增加、质量提升的方法有两种：1、野生块菌保育促繁技术，该技术的必要条件是针对林地里原来就有块菌菌塘，进行保护和生态条件的改善，使菌塘产出更多数量的块菌。但是，该技术对原来菌塘数量极少的林地效果低微，对没有菌塘的林地完全无法实施。2、块菌菌根苗培育及种植技术。该技术要从树木的种子培育成无菌苗，再接种块菌孢子液形成菌根苗，培育完成后种植管理，5至8年后树苗长大，树根附近形成菌塘自然长出块菌，整个过程需要较长周期，耗费大量人力物力和时间成本。

5、因此如何克服现有技术的不足是目前生物技术领域亟需解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种丽江白块菌的大树接种方法。

2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、一种丽江白块菌的大树接种方法，包括如下步骤：

4、步骤一，环境及接种树木要求：

5、环境要求为：海拔范围为1500-2800m的坡地或平地森林；年平均气温13-20℃，年降雨量600-1800mm，年日照时数1600-3000h；旱季、雨季分明，日温差8-22℃；土壤类型为红壤、棕壤或褐土，森林土层厚度>40cm；

6、接种森林树木要求：成年云南松树林，或以成年云南松为主，混合华山松、槲栎、锥连栎、板栗、化香树、榛子、滇杨和滇青冈中的一种或多种的混交林，林木郁闭度6.5-7.5；

7、步骤二，接种时间选择：

8、每年3-4月或6-7月接种；

9、3-4月接种前须洒水保证3-5cm深的表皮土壤湿润，接种后须按照每1m2为3-5kg的浇水量，每三天浇水一次，直至雨水降临；

10、6-7月需在雨水刚刚落地或者雨水浸透土层40cm后进行接种；

11、步骤三，接种前准备：

12、铲除林地矮小灌木和杂草，然后把林地表皮腐殖质铲开；再铲开腐殖质下面2-4cm厚的土壤；接着将此时地下10-20cm厚的土壤进行疏松处理，以暴露出云南松及其他大树的部分表皮根系；然后撒生石灰进行消毒杀菌；消毒杀菌后第二天进行接种；

13、步骤四，菌种制作：

14、使用熟石灰将无菌水的ph值调节为7.5-8.0之间作为溶剂；

15、选择直径1cm以上无虫蛀、无霉烂且成熟度大于等于95%的丽江白块菌子实体，每99-101g子实体加入溶剂595-605ml，然后放入搅拌机中粉碎，制成孢种原液；于0℃-4℃保存；

16、接种前使用孢种原液加所述的溶剂稀释为体积浓度为0.5%-1.0%的孢种液，然后加熟石灰将ph调节为7.0-7.5待用；

17、步骤五，大树接种：

18、在经步骤三处理好的林地上，采用步骤四制得的孢种液对林地表面进行喷洒，每亩地喷洒孢种液500-600kg；喷洒完后先撒一层石粉，每平方米撒石粉3-5kg；再撒一层熟石灰，每平方米撒0.5-1.0kg的量；接着将步骤三铲开的土壤均匀回填，后再将步骤三铲开的腐殖质均匀的铺在上面；

19、接种完成后，检测土壤交换性钙ca2+含量及土壤ph值，土壤交换性钙ca2+含量应达到30-80cmol/kg，土壤ph值应为7.5-8.5；

20、步骤六，接种后管理：

21、接种后，禁止动物和闲杂人员进入接种区，

22、接种6个月后检查块菌菌根形成情况；未形成菌根的需进行树干标记，以便来年二次补接种；

23、接种后每年7-8月份，对林地内的蚂蚁和蠼螋进行集体诱杀；

24、步骤七，块菌采收：

25、采收时间为接种后第三年的1-2月份采收，待块菌成熟度大于等于95%时进行采收。

26、进一步，优选的是，步骤一中，环境要求地貌为喀斯特地貌。

27、进一步，优选的是，步骤一中，接种森林中，60%以上的林木为10-35年树龄，树木直径10-40cm，树间距长和宽均为2-5米。

28、进一步，优选的是，步骤二中，6-7月份接种，若接种后连续20天不下雨，须用喷淋方式浇水，浇水量每1m2为3-5kg，每三天浇水一次。

29、进一步，优选的是，步骤三中，把林地表皮腐殖质铲开，每5米×5米堆成一堆；再铲开腐殖质下面2-4cm厚的土壤，每3米×3米堆成一堆。

30、进一步，优选的是，步骤三中，每667m2林地撒生石灰的量为200-300kg。

31、进一步，优选的是，步骤四中，在12月底至次年2月获取丽江白块菌子实体，洗净块菌子实体表面泥土和杂物，密封包装后，放在-20℃冰箱中冷冻保存待用；配制孢种原液时取出子实体；

32、配制孢种原液时搅拌机的速度为8000rpm/min-15000rpm/min，粉碎时间为15s-30s。

33、进一步，优选的是，步骤五中，腐殖质厚度为3.0-5.0cm。

34、进一步，优选的是，步骤六中，二次补接种方法为接种后第二年的3-4月或5-6月进行二次补接种；以未形成菌根大树为圆心，半径1.0-1.5m的面积为接种区域，先铲开回填的腐殖质，再铲开回填的土壤及撒了熟石灰和石粉的土层，然后按照0.85-0.90kg/m2的量喷洒孢种液；然后再次将铲开土壤及撒了熟石灰和石粉的土层回填，接着将铲开腐殖质回填；接种后须按照每1m2为3-5kg的浇水量，每三天浇水一次，直至雨水降临。

35、进一步，优选的是，步骤七中，采收时，耙挖的深度不得超过10cm。

36、本发明的技术是直接通过人为干预改良土壤，进行成片的大树接种，技术精确度高，接种成功率高，丽江白块菌接种后当年就形成了块菌子实体，见效快。

37、本发明与现有技术相比，其有益效果为：

38、（1）本发明提供一种丽江白块菌的大树接种方法，该方法为整片树林进行丽江白块菌接种，经过石粉和石灰的覆盖等方式人为改良土壤，使得土壤的ph值和交换性ca2+含量能够达到块菌的生长需求，所以本发明不需要确保接种林地原来就有大量块菌菌塘，即在没有块菌菌塘的情况下依然可以实施本发明方法；本发明方法与块菌的保育促繁技术相比实施范围大大增加；

39、（2）本发明与块菌保育促繁技术和菌根苗培育种植技术相比，周期较短，大树接种的当年冬天就发现有少量的块菌子实体形成，且大树接种成功率高达80%以上，效果明显；

40、（3）本发明同时对印度块菌、中华夏块菌和丽江白块菌实施了大树接种技术，接种成功率印度块菌21%，中华夏块菌15%，丽江白块菌大于80%。发现只有丽江白块菌表现优异，接种成功率最高，且丽江白块菌大树接种技术为首创技术，至今未见任何报道。

41、本发明方法与现有技术相比，具体见表1。

42、表1

43、。