用于检测样品中泛素羧基末端水解酶L1和/或胶质纤维酸性蛋白的存在或测量其量的侧向流方法、测定和装置与流程

本公开涉及用于对获自受试者的生物样品进行至少一种侧向流测定以确定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、胶质纤维酸性蛋白(gfap)的量或存在、或者uch-l1的量或存在和gfap的量或存在。

背景技术：

1、仅在美国，每年发生超过500万的轻度创伤性脑损伤(tbi)。目前，没有可用于帮助患者评估的简单、客观、准确的测量。事实上，tbi的评价和诊断中的大多数是基于主观数据。遗憾的是，客观测量诸如头部ct和格拉斯哥昏迷量表(gcs)评分在评价轻度tbi方面并不十分全面或灵敏。此外，头部ct绝大部分时间都无法显示轻度tbi，价格昂贵，并且使患者暴露于不必要的辐射之下。另外，阴性头部ct也并不意味着患者已免于脑震荡；相反，它仅意指某些干预措施(诸如手术)是不能保证的。临床医生和患者需要客观、可靠的信息来准确评价这种病状，以促进适当的分类和恢复。迄今为止，仅有有限的数据可以用于针对使用uch-l1和gfap来在急症护理环境中帮助患者评估和管理。迄今为止，仅有有限的数据可以用于针对使用uch-l1和gfap来在急症护理环境中帮助患者评估和管理。

2、轻度tbi或脑震荡更难客观地检测，并且这对全球急救中心来说是一项日常挑战。脑震荡通常不会导致大体病理，诸如出血，并且在对脑的常规计算机断层摄影扫描中不会出现异常，但是会出现在几天到几周内以自发方式消退的快速发作的神经元功能障碍。大约15％的轻度tbi患者罹患持续的认知功能障碍。对于在现场、在急诊室和诊所中、在运动区中和在军事活动(例如，战斗)中检测和评估轻度tbi受害者而言存在尚未满足的需求。

3、目前用于评估脑损伤的严重程度的算法包括格拉斯哥昏迷量表评分和其他措施。这些措施有时可能足以关联急性严重程度，但对可能导致永久性缺陷的细微病理不够敏感。gcs和其他措施也无法区分损伤类型，并且可能不够充分。因此，进入临床试验被分组到单一gcs水平的患者可能具有严重程度和类型非常不同的损伤。因为结局也因此发生变化，所以不恰当的分类会破坏临床试验的完整性。损伤分类改进将能够在临床试验中更精确地描述tbi患者的疾病严重程度和类型。

4、另外，目前的脑损伤试验依赖于结局测量诸如扩展的格拉斯哥结局量表，其捕捉了全局现象，但未能评估结局的细微差异。需要灵敏的结局测量来确定患者从脑损伤恢复的情况，以测试治疗剂和预防药。

技术实现思路

1、在一个实施方案中，本公开涉及一种方法，其包括：

2、对获自受试者的生物样品进行至少一种侧向流测定以确定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、胶质纤维酸性蛋白(gfap)的量或存在、或者uch-l1的量或存在和gfap的量或存在；以及

3、显示所述样品中uch-l1、gfap、或者uch-l1和gfap的量或存在。在上述方法的一些实施方案中，至少一种侧向流测定为侧向流装置的一部分。在上述方法的另外的实施方案中，侧向流装置包括(a)至少一个测试条；或(b)至少两个测试条。

4、在上述方法的一些实施方案中，(a)针对uch-l1的侧向流测定包括结合uch-l1上的表位的第一特异性结合配偶体和包含可检测标记的第二特异性结合配偶体；并且(b)针对gfap的侧向流测定包括结合gfap上的表位的第三特异性结合配偶体和包含可检测标记的第四特异性结合配偶体。在另外的实施方案中，第一特异性结合配偶体、第二特异性结合配偶体、第三特异性结合配偶体、第四特异性结合配偶体或其任何组合为抗体或其抗体片段。

5、在其他实施方案中，所述方法用于帮助诊断和评价已经遭受或可能已经遭受头部损伤的受试者。例如，在其他实施方案中，受试者被诊断为患有创伤性脑损伤。当受试者被诊断为患有创伤性脑损伤时，受试者可以被进一步诊断为患有轻度、中度、重度或中度至重度创伤性脑损伤。

6、在上述方法的另外的实施方案中，所述方法可以用于确定受试者是否应接受头部计算机断层(ct)扫描、磁共振成像(mri)扫描、或者头部ct扫描和mri扫描两者。

7、在另外的实施方案中，受试者为人类受试者(例如，成人受试者和/或儿科受试者)。

8、在上述方法的另外的实施方案中，生物样品为选自由以下组成的组的样品：全血样品、尿液样品、脑脊液样品、组织样品、体液样品、唾液样品、口咽样本和鼻咽样本。例如，在一些实施方案中，样品为全血样品。在其他实施方案中，样品为血浆样品。在另外的实施方案中，样品为血清样品。在另外的实施方案中，样品为唾液样品。在另外的实施方案中，样品为尿液样品。在其他实施方案中，样品为口咽样品。在其他实施方案中，样品为全血样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在其他实施方案中，样品为血浆样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为血清样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为唾液样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为尿液样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在其他实施方案中，样品为口咽样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。

9、在上述方法的另外的实施方案中，至少一种针对gfap的侧向流测定、至少一种针对uch-l1的侧向流测定、或者至少一种针对gfap的侧向流测定和至少一种针对uch-l1的侧向流测定各自在或能够在小于约30分钟、小于约25分钟、小于约20分钟、小于约18分钟或小于约15分钟内进行。在上述方法的另外的实施方案中，至少一种针对gfap的侧向流测定、至少一种针对uch-l1的侧向流测定、或者至少一种针对gfap的侧向流测定和至少一种针对uch-l1的侧向流测定各自在或能够在范围为约4至约20分钟、约10至约15分钟或约15至约18分钟的时间内进行。

10、在另一个实施方案中，本公开涉及一种用于进行上述方法的试剂盒。试剂盒可以包括：(a)用于检测样品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)的存在的第一侧向流装置；(b)用于检测样品中胶质纤维酸性蛋白(gfap)的存在的第二侧向流装置；以及(c)用于检测样品中uch-l1和gfap的存在的说明。

11、在另一个实施方案中，本公开涉及一种用于进行上述方法的试剂盒。试剂盒可以包括：(a)用于检测样品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)和胶质纤维酸性蛋白(gfap)的存在的侧向流装置；以及(b)用于检测样品中uch-l1和gfap的存在的说明。

12、在另一个实施方案中，本公开涉及一种方法，其包括：

13、对获自受试者的生物样品进行至少一种侧向流测定，以确定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、胶质纤维酸性蛋白(gfap)、或者uch-l1和gfap两者的量或存在；以及

14、使在样品中确定的uch-l1、gfap、uch-l1和gfap的量或存在可视化，

15、其中测定不需要读取uch-l1、gfap或者uch-l1和gfap的量或存在的装置(例如，读取器或读取装置)。

16、在上述方法的一些实施方案中，(a)针对uch-l1的侧向流测定包括结合uch-l1上的表位的第一特异性结合配偶体和包含可检测标记的第二特异性结合配偶体；并且(b)针对gfap的侧向流测定包括结合gfap上的表位的第三特异性结合配偶体和包含可检测标记的第四特异性结合配偶体。在另外的实施方案中，第一特异性结合配偶体、第二特异性结合配偶体、第三特异性结合配偶体、第四特异性结合配偶体或其任何组合为抗体或其抗体片段。

17、在其他实施方案中，所述方法用于帮助诊断和评价已经遭受或可能已经遭受头部损伤的受试者。例如，在其他实施方案中，受试者被诊断为患有创伤性脑损伤。当受试者被诊断为患有创伤性脑损伤时，受试者可以被进一步诊断为患有轻度、中度、重度或中度至重度创伤性脑损伤。

18、在上述方法的另外的实施方案中，所述方法可以用于确定受试者是否应接受头部计算机断层(ct)扫描、磁共振成像(mri)扫描、或者头部ct扫描和mri扫描两者。

19、在另外的实施方案中，受试者为人类受试者(例如，成人受试者和/或儿科受试者)。

20、在上述方法的另外的实施方案中，生物样品为选自由以下组成的组的样品：全血样品、尿液样品、脑脊液样品、组织样品、体液样品、唾液样品、口咽样本和鼻咽样本。例如，在一些实施方案中，样品为全血样品。在其他实施方案中，样品为血浆样品。在另外的实施方案中，样品为血清样品。在另外的实施方案中，样品为唾液样品。在另外的实施方案中，样品为尿液样品。在其他实施方案中，样品为口咽样品。在其他实施方案中，样品为全血样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在其他实施方案中，样品为血浆样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为血清样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为唾液样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在另外的实施方案中，样品为尿液样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。在其他实施方案中，样品为口咽样品，并且受试者为人类受试者(例如，成人和/或儿科受试者)。

21、在上述方法的另外的实施方案中，至少一种针对gfap的侧向流测定、至少一种针对uch-l1的侧向流测定、或者至少一种针对gfap的侧向流测定和至少一种针对uch-l1的侧向流测定各自在或能够在小于约30分钟、小于约25分钟、小于约20分钟、小于约18分钟或小于约15分钟内进行。在上述方法的另外的实施方案中，至少一种针对gfap的侧向流测定、至少一种针对uch-l1的侧向流测定、或者至少一种针对gfap的侧向流测定和至少一种针对uch-l1的侧向流测定各自在或能够在范围为约4至约20分钟、约10至约15分钟或约15至约18分钟的时间内进行。

22、在另一个实施方案中，本公开涉及一种用于进行上述方法的试剂盒。试剂盒可以包括：(a)用于检测样品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)的存在的第一侧向流装置；(b)用于检测样品中胶质纤维酸性蛋白(gfap)的存在的第二侧向流装置；以及(c)用于检测样品中uch-l1和gfap的存在的说明。

23、在另一个实施方案中，本公开涉及一种用于进行上述方法的试剂盒。试剂盒可以包括：(a)用于检测样品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)和胶质纤维酸性蛋白(gfap)的存在的侧向流装置；以及(b)用于检测样品中uch-l1和gfap的存在的说明。试剂盒中所含的侧向流装置可以含有一个用于检测样品中uch-l1和gfap的存在或量的测试条。替代地，侧向流装置可以含有用于确定样品中uch-l1的存在或量的第一测试条和用于确定样品中gfap的存在或量的第二测试条。