一种硫酸软骨素寡糖衍生物及其制备方法与应用

本申请涉及生物医药，更具体地，涉及一种硫酸软骨素寡糖衍生物及其制备方法与应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息旨在增加对本发明总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、糖胺聚糖是一类由重复二糖单元构成的线性阴离子多糖，普遍存在于细胞表面与细胞外基质中，在调节生物生理过程中发挥重要作用。根据构成二糖单元及硫酸化程度的不同，糖胺聚糖可以分为肝素（hp）、硫酸乙酰肝素（hs）、硫酸软骨素（cs）等。其中，硫酸软骨素具有抗炎、抗氧化、抗血栓、抗凝和免疫调节等作用。但由于硫酸软骨素具有分子量大、高负电荷、亲水性、在酸性条件下不稳定等特点，使得硫酸软骨素的口服生物利用度低，不足以提供预期的临床治疗效果，只能采用静脉注射等肠外给药的方式。这对于短期治疗是可以接受的，但对于长期治疗来说患者需要忍受疼痛、易感染、院外治疗不方便等，往往需要更方便和更符合患者要求的给药方法。然而，本发明人发现在诸多给药途径中，口服是最安全、最方便、最经济、最容易被患者和临床医生接受的途径。因此，寻求一种有效的策略来提高硫酸软骨素的口服生物利用度，具有非常重要的意义。

3、非酒精性脂肪性肝病 （non-alcoholic fatty liver disease, nafld）是指除外酒精和其他明确的损肝因素外，以肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的慢性肝损伤。它是全球最常见的慢性肝病之一，全球患病率约占成年人口的25%左右，患病率在全球范围内仍在逐年升高。并且，非酒精性脂肪性肝病可以进一步发展为非酒精性脂肪性肝炎（nash）、肝硬化甚至肝癌。此外，nafld与代谢综合征紧密相关，不仅影响肝脏健康，还会增加ⅱ型糖尿病、高血压和血脂异常等一系列严重疾病的风险。因此，寻求一种有效的治疗非酒精性脂肪性肝病的药物及用于长期治疗的给药途径，具有非常重要的意义。

技术实现思路

1、提供了本申请以解决现有技术中存在的上述缺陷。需要一种硫酸软骨素寡糖衍生物及其制备方法与应用，提供一种能够提高硫酸软骨素的口服生物利用度的化合物，还提供一种对非酒精性脂肪性肝病具有治疗效果的化合物。

2、本申请的第一方面，提供了一种硫酸软骨素寡糖衍生物，其特征在于，所述硫酸软骨素寡糖衍生物的结构如式i所示，

3、式i，式i中的r为so3h或h，所述硫酸软骨素寡糖衍生物的聚合度等于8。

4、本申请的第二方面，提供了一种本申请任一实施例所述的硫酸软骨素寡糖衍生物的制备方法，将硫酸软骨素通过酶解法制备成低分子量硫酸软骨素；低分子量硫酸软骨素通过p10色谱柱分离，得到硫酸软骨素寡糖；所述硫酸软骨素寡糖发生脱硫反应，脱除部分 n-乙酰半乳糖胺的6位硫酸基团，得到硫酸软骨素寡糖脱硫产物；所述硫酸软骨素寡糖脱硫产物进行羧基活化，并与脱氧胆乙胺配体反应，得到硫酸软骨素寡糖衍生物。

5、本申请的第三方面，提供了本申请任一实施例所述硫酸软骨素寡糖衍生物在制备促进慢性肝炎修复和/或抗炎方面的应用。

6、本申请的第四方面，提供了本申请任一实施例所述硫酸软骨素寡糖衍生物在制备治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用。

7、本申请各个实施例提供的硫酸软骨素寡糖衍生物及其制备方法与应用，涉及的硫酸软骨素寡糖衍生物能够有效促进硫酸软骨素寡糖口服吸收，大大提高硫酸软骨素寡糖衍生物的口服生物利用度；硫酸软骨素寡糖衍生物具有良好的促进慢性肝炎修复及抗炎活性，且结构明确，可以用于口服治疗非酒精性脂肪性肝病。

技术特征：

1.一种硫酸软骨素寡糖衍生物，其特征在于，所述硫酸软骨素寡糖衍生物的结构如式i所示，

2.权利要求1所述的硫酸软骨素寡糖衍生物的制备方法，其特征在于，将硫酸软骨素通过酶解法制备成低分子量硫酸软骨素；低分子量硫酸软骨素通过p10色谱柱分离，得到硫酸软骨素寡糖；所述硫酸软骨素寡糖发生脱硫反应，脱除部分n-乙酰半乳糖胺的6位硫酸基团，得到硫酸软骨素寡糖脱硫产物；所述硫酸软骨素寡糖脱硫产物进行羧基活化，并与脱氧胆乙胺配体反应，得到硫酸软骨素寡糖衍生物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，硫酸软骨素通过酶解法制备得到低分子量硫酸软骨素，包括：将硫酸软骨素溶于部分酶解缓冲液，加入硫酸软骨素abc酶，进行酶解反应；反应结束后灭活混合液中硫酸软骨素abc酶；灭活后的混合液进行离心后取上清液，冻干得到低分子量硫酸骨素；低分子量硫酸骨素经p10色谱柱分离，得到硫酸软骨素寡糖。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，部分酶解缓冲液包括醋酸钠、醋酸钙和水；硫酸软骨素与部分酶解缓冲液的质量体积比为1 g:28-32 ml。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，1 g硫酸软骨素对应的硫酸软骨素abc酶的量为0.4-0.6 iu。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述硫酸软骨素寡糖发生脱硫反应，脱除部分n-乙酰半乳糖胺的6位硫酸基团，得到硫酸软骨素寡糖脱硫产物，包括：所述硫酸软骨素寡糖的水溶液过h+离子交换柱后得到洗脱液，洗脱液和吡啶混合发生反应得到硫酸软骨素寡糖吡啶盐；硫酸软骨素寡糖吡啶盐和n-甲基-n-三甲基硅烷基三氟乙酰胺反应得到硫酸软骨素寡糖脱硫产物。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，硫酸软骨素寡糖和吡啶反应得到硫酸软骨素寡糖吡啶盐，包括：所述硫酸软骨素寡糖的水溶液过h+离子交换柱后得到洗脱液，洗脱液和吡啶混合发生反应得到硫酸软骨素寡糖吡啶盐。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，硫酸软骨素寡糖脱硫产物进行羧基活化，并与脱氧胆乙胺配体反应，包括：硫酸软骨素寡糖脱硫产物和1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐发生反应，得到羧基活化后的具有活性羧酸的硫酸软骨素寡糖；具有活性羧酸的硫酸软骨素寡糖和脱氧胆乙胺在常温下反应得到硫酸软骨素寡糖衍生物。

9.权利要求1所述硫酸软骨素寡糖衍生物在制备促进慢性肝炎修复和/或抗炎的药物中的应用。

10.权利要求1所述硫酸软骨素寡糖衍生物在制备治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用。

技术总结本申请属于生物医药技术领域，具体涉及一种硫酸软骨素寡糖衍生物及其制备方法与应用，所述硫酸软骨素寡糖衍生物的结构如式I所示，式I，式I中的R<subgt;1</subgt;为SO<subgt;3</subgt;H，R<subgt;2</subgt;为H或R<subgt;1</subgt;为H，R<subgt;2</subgt;为SO<subgt;3</subgt;H，所述硫酸软骨素寡糖衍生物的聚合度等于8；硫酸软骨素寡糖衍生物具有良好的促进慢性肝炎修复及抗炎活性，且结构明确，可以用于口服治疗非酒精性脂肪性肝病。技术研发人员：迟连利,国颖,安子哲受保护的技术使用者：山东大学技术研发日：技术公布日：2025/1/13