鸡蛋壳膜多肽组合物、制备方法及在防皱纹、防脱发中的应用与流程

本申请涉及鸡蛋壳膜蛋白成分，尤其涉及鸡蛋壳膜多肽组合物、制备方法及在防皱纹、防脱发中的应用。

背景技术：

1、鸡蛋壳膜是一类生物活性物质，主要由蛋白质组成，其中蛋白质主要以糖蛋白的形式存在为主，与细胞组织中的细胞膜结构相类似。除糖蛋白外，鸡蛋壳膜中还含有一定量的其他成分，主要包括胶原蛋白、角质蛋白、卵清蛋白、骨桥蛋白和溶菌酶等生物活性成分。鸡蛋壳膜蛋白质中多肽和氨基酸的含量较高，其中富含肌氨酸、脯氨酸、组氨酸、赖氨酸等。这些氨基酸具有较好的抗氧化活性，也是动物优质毛发必不可少的营养成分。并且由于鸡蛋壳膜的组成成分和结构功能特征，目前己经将鸡蛋壳膜作为功能性成分应用于日用化工、医药、食品保健等多个领域。

技术实现思路

1、然而，进一步充分挖掘的鸡蛋壳膜的活性成分，充分开发其应用领域仍然具有十分重要的意义。

2、第一方面，本申请实施例公开了一种鸡蛋壳膜多肽组合物，包括如seq id no.1～11所示多肽中的至少一种。

3、第二方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物，其中，包括如seq idno.1～11所示的多肽中的至少一项，及如seq id no.1～11所示的多肽的美容或药学上可接受的盐，缀合物分子，以及至少一种美容或药学上接上的赋形剂或佐剂。

4、第三方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物，包含美容或药物有效量的至少一种如seq id no.1～11所示的多肽，美容或药学有效量的选自去角质剂、润湿剂、脱色或美白剂、原色素剂、抗糖化剂、一氧化氮合成酶抑制剂、刺激皮肤或表皮分子合成和/或防止它们降解的药剂、刺激纤维母细胞和/或角质细胞增生及刺激角质细胞分化的药剂、欲改善真皮-表皮交界处的药剂、皮肤舒缓剂、固化剂、抗大气污染和/或抗自由基药剂、作用于毛细血管循环和/或微循环的药剂、安定剂、抗炎剂、抗微生物剂、作用于细胞代谢的药剂、作用于毛细血管循环和/或微循环的药剂、维生素、螯合剂、可抗紫外线a和/或b的有机或矿物性光保护剂及其混合物的活性剂。

5、第四方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物纳米乳，按重量份数计包含2～8份肉豆蔻酸异丙酯、10～20份聚氧乙蓖麻油、12～18份聚氧乙烯醚(el-40)、1～10份1,2-丙二醇、1～8份异丙醇和10～15份如seq id no.2、4～8和10～11所示多肽中的至少一种。

6、第五方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物纳米乳，按重量份数计包含2～8份肉豆蔻酸异丙酯、10～20份聚氧乙蓖麻油、12～18份聚氧乙烯醚(el-40)、1～10份1,2-丙二醇、1～8份异丙醇和10～15份的等量份的seq id no.4～8所示的多肽混合物。

7、第六方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物纳米乳，按重量份数计包含2～8份肉豆蔻酸异丙酯、10～20份聚氧乙蓖麻油、12～18份聚氧乙烯醚(el-40)、1～10份1,2-丙二醇、1～8份异丙醇和10～15份的等量份的seq id no.4～8和10～11所示的多肽混合物。

8、第七方面，本申请实施例公开了一种防皱和防脱发组合物纳米乳，按重量份数计包含2～8份肉豆蔻酸异丙酯、10～20份聚氧乙蓖麻油、12～18份聚氧乙烯醚(el-40)、1～10份1,2-丙二醇、1～8份异丙醇和10～15份的等量份的seq id no.2、4～8和10～11所示的多肽混合物。

9、第八方面，本申请实施例公开了鸡蛋壳膜多肽组合物的制备方法，其中，包括以下步骤：

10、获得鸡蛋壳膜粉；

11、酸解，包括将所述鸡蛋壳膜粉用10m/v％的乙酸溶液配制成悬浊液，向悬浊液中加入终浓度为0.5m/v％的3-巯基丙酸，充分反应后，离心得到酸解液；

12、酶解，包括取酸解液采用酶制剂进行酶解以得到鸡蛋壳膜多肽粗品的步骤，所述酶制剂包括α-糜蛋白酶和胶原酶；

13、纯化，包括将所述鸡蛋壳膜多肽粗品进行sephadex g-25纯化和rp-hplc分离纯化的步骤。

14、在一些实施例中，所述酶解步骤包括：第一次酶解和第二次酶解，所述第一次酶解包括：

15、将所述酸解液调ph值至5.0～5.5析出后离心，取沉淀再次用10％的乙酸再次将其溶解，透析，取出，冷冻干燥得到冻干粉；

16、将冻干粉用0.7m/v％生理盐水调配成50mg/ml的溶液，向其中加入第一酶制剂，加酶量为10000～15000u/ml处理1～2.5h，经灭酶处理和离心后，取上清液，浓缩，冷冻干燥；其中，使用的第一酶制剂包含碱性蛋白酶200000u/g，胃蛋白酶30000u/g和木瓜蛋白酶100000u/g；

17、所述第二酶解包括：将所述第一次酶解得到的冻干粉用0.7m/v％生理盐水成50mg/ml的溶液，向其中加入第二酶制剂，加酶量为10000～15000u/ml处理1～2.5h，经灭酶处理和离心后，取上清液，浓缩，冷冻干燥，即可得到的鸡蛋壳膜多肽粗品；其中使用的第二酶制剂包含α-糜蛋白酶100000u/g和胶原酶150000u/g。

18、第九方面，本申请实施例公开了第一方面所述的鸡蛋壳膜多肽组合物、或第八方面所述的制备方法制得的鸡蛋壳膜多肽组合物在制备防皱纹、防脱发化妆品中的应用。

19、本申请实施例通过对鸡蛋壳膜粉进行酶解制得了11种多肽，通过抗菌实验证实了此11种多肽对15种常见致病菌的具有不同程度的抑菌效果，并且细胞实验证实了其中9种多肽对皮肤成纤维细胞具有明显的增殖和迁移活性促进作用，另外还对人骨骼肌细胞的收缩功能具有抑制作用，提示该鸡蛋壳膜多肽可通过抑制人骨骼肌细胞收缩，达到减少肌肉收缩，从而实现减少皱纹诞生的目的。

20、本申请实施例进行一步通过动物实验，将制备的11中鸡蛋壳膜多肽中部分多肽进行组合制得了一种防皱和防脱发纳米乳，通过皮肤修复实验和脱发修复实验证实，本申请实施例以鸡蛋壳膜多肽制得的纳米如具有明显的诱导伤口愈合，促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，促进成纤维细胞中的胶原沉积，具有明显皮肤组织修复功能；并且还有促进毛囊再生，防治脱发的功能，由此提示，本申请实施例制得的鸡蛋壳膜多肽不仅具有在抗皱、抗衰老类化妆品的中应用前景，还具有在防脱发类化妆品或保健品中的应用前景。

技术特征：

1.一种鸡蛋壳膜多肽，其特征在于，序列如seq id no.1～11所示。

2.权利要求1所述的鸡蛋壳膜多肽在制备用于治疗、清洁或照顾皮肤的防皱纹和/或防脱发化妆品组合物中的用途。

3.权利要求1所述的鸡蛋壳膜多肽组合物的制备方法，其中，包括以下步骤：

4.权利要求1所述的鸡蛋壳膜多肽在制备防皱纹、防脱发、抑菌化妆品中的应用。

技术总结本申请公开了鸡蛋壳膜多肽组合物、制备方法及在防皱纹、防脱发中的应用。该组合物包括如SEQ ID NO.1～11所示多肽中的至少一种。该多肽组合物具有明显的增殖和迁移活性促进作用，对人骨骼肌细胞的收缩功能具有抑制作用，促进毛囊再生，防治脱发的功能，具有在抗皱、抗衰老类和防脱发类化妆品或化妆品的中应用前景。技术研发人员：王晓娟受保护的技术使用者：宁波格鲁康生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/1