用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物及其应用的制作方法

本发明涉及微生物应用，具体涉及一种用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物及其应用。

背景技术：

1、骨质疏松是由多种原因引起的一种常见的代谢性骨骼疾病，分为原发性、继发性和特发性三大类。原发性骨质疏松症又分为绝经后骨质疏松症（ⅰ型）、老年性骨质疏松症（ⅱ型）和特发性骨质疏松（包括青少年型）三种；继发性骨质疏松症是由代谢性疾病或长期服用某些药物等一些因素所诱发；特发性骨质疏松症主要发生于一些具有特定家族史的患者。随着老龄化程度不断增加，骨质疏松病人不断增加，预防、治疗或改善骨质疏松越来越重要。

2、骨质疏松症的发病会伴随着多种骨骼相关的并发症，对患病者的生活质量水平造成严重影响。目前，对骨质疏松症的治疗主要是依靠传统药物，主要分为抑制骨吸收和促进骨形成两类，此类药物不仅在价格上会增加患者的经济负担，长期服用还会产生依赖性，严重者会造成器官损害、内分泌失调等副作用。故需要寻求新的安全有效的防治手段来解决这一困境。近年来多项关于益生菌或益生元干预骨质疏松的研究均表明其可以安全有效地预防各种情况下的骨质流失，显示了益生菌或益生元对骨骼健康的潜在益处。

技术实现思路

1、针对传统药物治疗骨质疏松存在易产生依赖性、副作用大的技术问题，本发明提供一种用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物及其应用。

2、第一方面，本发明提供一种用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物，包括复合益生菌粉，复合益生菌粉包括约氏乳杆菌（ lactobacillus johnsonii）hc1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种（ lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）hc1983；约氏乳杆菌hc1175的保藏编号为cgmcc no.27354，德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983的保藏编号为cgmcc no.26584。

3、进一步的，约氏乳杆菌hc1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983的活菌数之比为1~3:1~3。

4、进一步的，复合益生菌粉由约氏乳杆菌hc1175菌粉和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉混合制得，约氏乳杆菌hc1175菌粉和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉的菌含量为5.0×109~3.0×1010cfu/g。

5、进一步的，约氏乳杆菌hc1175菌粉的制备方法如下：

6、（1）将冷藏保存的约氏乳杆菌hc1175菌株于常温中回温1h，接种于2.5l液体培养基，37℃、有氧培养16~20h，制成一级种子，再转接至100l种子罐中，ph6.58、37℃下有氧培养6~8h得到二级种子，随后以10%的接种量转种至1000l发酵罐中，ph6.39、37℃下有氧培养6~8h至对数生长期，将发酵液无菌离心得到约氏乳杆菌hc1175菌泥；

7、（2）采用高压空气灭菌的方法对第一包被剂进行灭菌，灭菌条件105℃、30min，将约氏乳杆菌hc1175菌泥与第一包被剂按照1:1~2的重量比充分搅拌混匀后，调节ph至6.5~7.0，得到菌泥包被液，真空冷冻干燥后，取出冻干块进行粉碎，得到约氏乳杆菌hc1175菌粉。

8、进一步的，德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉的制备方法如下：

9、（1）将冷藏保存的德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌株于常温中回温1h，接种于2.5l液体培养基，37℃、厌氧培养24~30h，制成一级种子，再转接至100l种子罐中，ph6.45、37℃下厌氧培养12~14h得到二级种子，随后以10%的接种量转种至1000l发酵罐中，ph6.45、37℃下厌氧培养6~8h至对数生长期，将发酵液无菌离心得到德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌泥；

10、（2）采用高压空气灭菌的方法对第二包被剂进行灭菌，灭菌条件105℃、30min，将约氏乳杆菌hc1175菌泥与第二包被剂按照1:1~2的重量比充分搅拌混匀后，调节ph至6.5~7.0，得到菌泥包被液，真空冷冻干燥后，取出冻干块进行粉碎，得到德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉。

11、进一步的，第一包被剂包括如下质量分数的组分：脱脂奶粉10%、海藻糖8%、低聚果糖2%、甘油3%、麦芽糊精5%和蒸馏水72%；第二包被剂包括如下质量分数的组分：脱脂奶粉15%、海藻糖8%、甘油3%、抗坏血酸钠1%和蒸馏水73%。

12、进一步的，以质量分数计，复合益生菌组合物包括：复合益生菌粉4%、低聚果糖67%、水苏糖8%、低聚木糖7%、低聚半乳糖8%、菊粉5%、无花果果粉0.2%、苹果粉0.3%、红枣粉0.2%、枸杞粉0.3%。

13、第二方面，本发明提供一种上述复合益生菌组合物在制备预防、治疗或改善骨质疏松产品方面的应用。

14、进一步的，预防、治疗或改善骨质疏松产品为促进成骨细胞增殖、提高成骨细胞活性和抑制破骨细胞活性的产品。

15、进一步的，预防、治疗或改善骨质疏松产品为增强骨密度、骨最大载荷和骨弯曲强度的产品。

16、进一步的，预防、治疗或改善骨质疏松产品为改善血清中血钙、血磷、骨钙素、降钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶含量的产品。

17、本发明的有益效果在于：

18、本发明提供的一种复合益生菌组合物，由约氏乳杆菌hc1175、德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983和多种益生元（低聚果糖、水苏糖、低聚木糖、低聚半乳糖、菊粉、无花果果粉、苹果粉、红枣粉和枸杞粉）复配而成。在体外试验中，约氏乳杆菌hc1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983均具有十分优异的胃肠道存活、定殖能力，且能促进成骨细胞的增殖、抑制破骨细胞的增殖，从而发挥抗骨质疏松的作用。经过动物试验验证，该复合益生菌组合物可以显著改善血清中血钙、血磷、骨钙素、降钙素、碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶含量，有效增强骨密度、提升多项骨生物力学指标，实现缓解或抑制骨质疏松发生的目的。且在整个试验过程中，该复合益生菌组合物无毒害作用，无肝肠易位现象。

技术特征：

1. 一种用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物，其特征在于，包括复合益生菌粉，复合益生菌粉包括约氏乳杆菌（lactobacillus johnsonii）hc1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种（lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）hc1983；约氏乳杆菌hc1175的保藏编号为cgmcc no.27354，德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983的保藏编号为cgmcc no.26584。

2.如权利要求1所述的复合益生菌组合物，其特征在于，约氏乳杆菌hc1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983的活菌数之比为1~3:1~3。

3.如权利要求1所述的复合益生菌组合物，其特征在于，复合益生菌粉由约氏乳杆菌hc1175菌粉和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉混合制得，约氏乳杆菌hc1175菌粉和德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉的菌含量为5.0×109~3.0×1010cfu/g。

4.如权利要求3所述的复合益生菌组合物，其特征在于，约氏乳杆菌hc1175菌粉的制备方法如下：

5.如权利要求3所述的复合益生菌组合物，其特征在于，德氏乳杆菌保加利亚亚种hc1983菌粉的制备方法如下：

6.如权利要求1所述的复合益生菌组合物，其特征在于，以质量分数计，复合益生菌组合物包括：复合益生菌粉4%、低聚果糖67%、水苏糖8%、低聚木糖7%、低聚半乳糖8%、菊粉5%、无花果果粉0.2%、苹果粉0.3%、红枣粉0.2%、枸杞粉0.3%。

7.一种如权利要求1-6任一项所述复合益生菌组合物在制备预防、治疗或改善骨质疏松产品方面的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，预防、治疗或改善骨质疏松产品为促进成骨细胞增殖、提高成骨细胞活性和抑制破骨细胞活性的产品。

9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，预防、治疗或改善骨质疏松产品为增强骨密度、骨最大载荷和骨弯曲强度的产品。

10.如权利要求7所述的应用，其特征在于，预防、治疗或改善骨质疏松产品为改善血清中血钙、血磷、骨钙素、降钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶含量的产品。

技术总结本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种用于预防、治疗或改善骨质疏松的复合益生菌组合物及其应用。所述复合益生菌组合物包括复合益生菌粉，复合益生菌粉包括约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）HC1175和德氏乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus）HC1983；约氏乳杆菌HC1175的保藏编号为CGMCC No.27354，德氏乳杆菌保加利亚亚种HC1983的保藏编号为CGMCC No.26584。该复合益生菌组合物可以显著改善骨代谢相关指标，增强骨密度、提升多项骨生物力学指标，有效缓解或抑制骨质疏松。技术研发人员：周亚男,刘晓伟,解云芸,周群,王永平,李俊,韩海滨受保护的技术使用者：威凯海思（山东）生物工程有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/1