一种sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalanineA及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用

：本发明属于天然产物领域，具体涉及微生物天然产物的分离纯化及其在制备抗炎药物中的应用。

背景技术

0、背景技术：

1、炎症是机体受到各种损失刺激后，细胞释放的各种化学介质调节的复杂生物反应，适当的炎症反应能帮助机体清除病原体，保护机体免受伤害，但如果炎症反应过于激烈或者持续存在，可能会导致自身免疫或自身炎症疾病、神经性疾病或癌症。炎症已经成为大多数流行疾病的病理学特征，如糖尿病、动脉粥样硬化、癌症、癫痫、哮喘和神经退行性疾病。天然产物是研发新型抗炎药物等人类疾病用药的宝贵资源，微生物拥有可重复发酵、可持续发展的独特优势，深海海洋生态环境特殊性造就了深海微生物次级代谢产物的独特性，已成为创新药物发现的重要源泉。因此，从深海微生物中筛选发现具有良好抗炎活性的药物先导化合物，对合理利用深海微生物药物资源具有重要的意义。

技术实现思路

0、技术实现要素：

1、本发明的第一个目的是提供一种具有抗炎活性的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalanine a。

2、本发明的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalanine a，其结构如式(ⅰ)：

3、

4、本发明的第二个目的是提供如式(i)所示的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea在制备抗炎药物中的应用。

5、本发明的第三个目的是提供深海来源青霉penicillium sp.scsio06871在制备上述sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea中的应用。

6、本发明的第四个目的是提供一种上述sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalanine a的制备方法，包括以下步骤：

7、a、制备深海来源青霉菌penicillium sp.scsio06871的发酵培养物；

8、b、分离发酵液和菌丝体，将发酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩得发酵液浸膏；菌丝体剪碎经乙酸乙酯浸泡、超声提取，乙酸乙酯提取液浓缩得菌丝体浸膏；合并发酵液浸膏和菌丝体浸膏，用正相硅胶分离，采用二氯甲烷：甲醇从100:0,100:1,100:2,100:3,100:5,100:10,100:20,0:100,v/v梯度洗脱顺序得9个组分fr1-fr9，收集二氯甲烷：甲醇100：5v/v洗脱的组分fr8，先经sephadex lh-20柱层析，以甲醇为洗脱剂，再经中压反相柱层析，采用乙腈：水从10:90,20:80,25:75,35:65,60:40,100:0,v/v梯度洗脱，其中25:75,v/v洗脱后的产物，经高效液相纯化得到sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea。

9、优选，所述的制备深海来源青霉菌penicillium sp.scsio06871的发酵培养物是将深海来源青霉菌penicillium sp.scsio06871接种到发酵培养基中培养所得的发酵培养物，所述的发酵培养基每1000ml含有：葡萄糖10g，麦芽糖20g，甘露醇20g，玉米浆1g，味精10g，磷酸氢二钾0.5g，七水合硫酸镁0.3g，酵母浸粉3g，海盐15g，溶于适量的水中，用水定容至1000ml。

10、优选，所述的培养是28℃，180rpm下培养48h得种子液，将种子液以3％的体积比例接种到发酵培养基中，25℃下静置培养32天，得到penicillium sp.scsio06871的发酵产物。

11、优选，所述的经高效液相纯化是以210和270nm波长做检测、采用2ml/min的流速，以甲醇：水＝65:35,v/v进行等梯度洗脱进行半制备高效液相分离，hplc(ymc-pack ods-a,10×250mm,5μm)，于保留时间tr 12.0min得到sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea。

12、本发明人通过对一株深海来源青霉菌penicillium sp.scsio06871液体静置放大发酵和发酵提取物提取纯化，从中得到化合物1。经结构分析，其被确定为sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea，具体结构如式(ⅰ)所示。通过对化合物1的抗炎活性评价，发现化合物1对脂多糖(lps)诱导小鼠巨噬细胞株raw264.7产生的no具有显著的抑制作用，同时抑制促炎因子il-6和mcp-1基因的表达，促进抗炎因子il-4、il-10和arg-1基因的表达，且相同浓度下对细胞株raw264.7没有细胞毒活性，可以做为抗炎药物开发的候选先导化合物。

13、本发明的深海来源青霉菌penicillium sp.scsio06871于2024年02月04日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所，邮编：510070，保藏编号：gdmcc no：64307。

技术特征：

1.sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalanine a，其结构如式(i)所示：

2.如式(i)所示的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea在制备抗炎药物中的应用。

3.一种抗炎药物，其特征在于，含有权利要求1所述的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea作为活性成分。

4.青霉菌penicillium sp.scsio06871，保藏编号：gdmcc no：64307。

5.一种权利要求1所述的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea的制备方法，其特征在于，是从权利要求4所述的青霉菌penicillium sp.scsio06871的发酵培养物中分离得到。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的制备深海来源青霉菌penicillium sp.

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的经高效液相纯化是以205和265nm波长做检测、采用2ml/min的流速，以甲醇：水＝65:35,v/v进行等梯度洗脱进行半制备高效液相分离，hplc(ymc-pack ods-a,10×250mm,5μm)，于保留时间tr 12.0min得到sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea。

9.权利要求4所述的青霉菌penicillium sp.scsio06871在制备权利要求1所述的sorbicillin混杂二聚体类化合物sorbicillalaninea中的应用。

技术总结本发明公开了一种sorbicillin混杂二聚体类化合物及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用。本发明从深海青霉菌SCSIO06871的液体发酵物中制备得到一个具有抗炎活性的化合物sorbicillalanine A，经结构鉴定sorbicillalanine A为新化合物，结构如式(I)所示。抗炎活性评价，发现sorbicillalanine A对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7产生的NO具有显著的抑制作用，同时抑制促炎因子IL‑6和MCP‑1基因的表达，促进抗炎因子IL‑4、IL‑10和Arg‑1基因的表达，且相同浓度下对细胞株RAW264.7没有细胞毒活性，可以做为抗炎药物开发的候选先导化合物。技术研发人员：庞小艳,王俊锋,刘永宏,郭鹏,田新朋,周雪峰,杨斌,任雪受保护的技术使用者：中国科学院南海海洋研究所技术研发日：技术公布日：2024/8/20