蜘蛛香脂质提取物及其制备方法和在制备预防和/或治疗腹泻的药物中的应用

本发明属于生物医药，尤其是涉及一种蜘蛛香(valeriana jatamansi)脂质提取物及其制备方法和在制备预防和/或治疗腹泻的药物中的应用。

背景技术：

1、腹泻是一种常见的消化道疾病症状，可直接引起脱水、营养不良等，具有较大的临床危害。特别是小儿腹泻，是小儿消化系统的主要疾病之一，也是临床造成婴幼儿死亡的主要原因之一，危害仅次于小儿肺炎，全球每年造成约52.5万名儿童死亡(gbd diarrhoealdiseases collaborators.estimates of global,regional,and national morbidity,mortality,and aetiologies of diarrhoeal diseases:a systematic analysis forthe global burden of disease study 2015.lancet infect dis.2017,17:909-48.；yang,x.,xiong,w.,huang,t.,et al..meteorological and social conditionscontribute to infectious diarrhea in china.scientific reports.2021,11(1):23374.doi:10.1038/s41598-021-00932-0)。

2、蜘蛛香临床上常用于治疗胃肠道疾病，亦用于多个治疗胃肠道疾病的成药中，如胃复舒胶囊、香果健胃胶囊/片、秋泻灵合剂/颗粒等。其中由蜘蛛香单味药材提取制得的“秋泻灵合剂”“秋泻灵颗粒”为儿科治疗腹泻的专用药，对婴幼儿轮状病毒和细菌引起的感染性腹泻均有效。

3、现有技术中发现了其蜘蛛香乙醇提取物通过恢复肠黏膜细胞紧密连接和肠道屏障损伤、调控erk/jnk和nrf2/sod1信号通路对抗氧化应激反应以及抑制gsdmd诱导的细胞焦亡等多种机制对蓖麻油致小鼠腹泻呈现保护作用(ma,y.l.,wu,z.m.,liu,x.,etal..antidiarrheal activity of the extracts of valeriana jatamansi jones oncastor oil-induced diarrhea mouse by regulating multiple signalpathways.journal of ethnopharmacology.2022:115560.)。目前已从蜘蛛香中分离并鉴定出的单体化合物近300个，其中以环烯醚萜类为主，此外有黄酮类、木质素类、倍半萜类、酚类等。同时从其挥发油中鉴定出的成分超过了290个，主要为单帖和倍半萜类成份(arunk.jugran,sandeep rawat,indra d.bhatt,et al.,valeriana jatamansi:an herbaceousplant with multiple medicinal uses.phytotherapy research.2019；33:482-503.；wang,r.,shi,s.,tan,y.,et al.,chemical constituents from valerianajatamansi.biochemical systematics and ecology,2021.94.doi:10.1016/j.bse.2020.104177；wang,y.,liu,z-y.,zhou,y.,et al.,the chemical constituentsfrom valeriana jatamansi and their anti-influenza virus and anti-inflammatoryeffects.phytochemistry letters,2022.52:20-26.doi:10.1016/j.phytol.2022.08.016；wang,y.,shi,d.q.,jiang,n.,et al.,a new acylated iridoidand other chemical constituents from valeriana jatamansi and their biologicalactivities.natural product research,2023.37(2):248-255.doi:10.1080/14786419.2021.1961255；tan,y.z.,wang,l.x.,li,h.x.,et al.,lignans from the rootof valeriana jatamansi and their biological evaluation.journal of asiannatural products research,2022.1-8.doi:10.1080/10286020.2022.2145958)。但对止泻活性物质仍不明确，且其脂质成分研究未见报道。

4、中国专利cn108339028a公开了一种蜘蛛香提取物的制备方法，包括以下步骤：取蜘蛛香，加入乙醇浸提，所得浸提液去除乙醇后，用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯层，即得。所得萃取物经浓缩后得到的蜘蛛香提取物能很好地降低臭味，还具有很好的止泻效果。该方案主要是用乙酸乙酯萃取的，所以其提取的物质主要是能够溶于乙酸乙酯的物质。

5、中国专利cn112316078a公开了一种治疗小儿消化不良的脐贴及其制备方法，脐贴由基质和药物组成，其中：所述药物由下列质量份的组分制成：蜘蛛香提取物10-30份，木香提取物3-10份，草果提取物5-20份；所述基质由下列质量份的组分制成：卵磷脂0.1-0.4份，胆固醇0.01-0.03份，胆酸钠0.01-0.05份，丙二醇0.3-0.9份，甘羟铝0.3-1份，甘油10-40份，np700 5-20份，酒石酸0.5-2份，pvpk90 2-6份。但是该方案中的蜘蛛香提取物主要为一种粗提物，粗提物中还存在一些未知的成分以及杂质。

技术实现思路

1、基于现有技术中未有关于蜘蛛香脂质用于止泻的相关技术，本发明提供一种蜘蛛香脂质及其制备方法和在制备预防和/或治疗腹泻的药物中的应用。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

3、本发明还进一步提供一种蜘蛛香脂质的制备方法，包括如下步骤：

4、蜘蛛香药材干粉加乙醇后，浸泡回流提取，过滤，滤液减压浓缩至浸膏并经冷冻干燥成冻干粉；

5、冻干粉加水溶解，再加入氯仿、甲醇混合溶剂，涡旋混匀，静置，得到悬浮液；

6、悬浮液通过滤纸过滤，滤液静置，实现相分离；

7、用分液漏斗取出下层，下层溶液真空离心浓缩干燥，得蜘蛛香脂质提取物。

8、在本发明的一个实施方式中，所述乙醇的用量为蜘蛛香药材干粉重量的2-12倍量。

9、在本发明的一个实施方式中，所述乙醇的体积浓度为50-100％。

10、在本发明的一个实施方式中，所述浸泡回流提取的时间为4-24h。

11、在本发明的一个实施方式中，浸泡回流提取，且滤过后，药渣再加乙醇进行浸泡回流提取，药渣重复浸泡回流提取的次数为1-5次，且药渣浸泡回流提取的滤液与第一次蜘蛛香药材干粉加乙醇进行浸泡回流提取后的滤液合并。

12、在本发明的一个实施方式中，冻干粉再由氯仿、甲醇混合溶剂提取时，冻干粉加入2-15倍量体积的水充分混匀，得到冻干粉水溶液，再加入氯仿、甲醇混合溶剂，且混合溶剂使用量与冻干粉水溶液的体积比为1:0.1-2。

13、在本发明的一个实施方式中，所述氯仿、甲醇混合溶剂中氯仿与甲醇的体积比为1:0.1-5。

14、在本发明的一个实施方式中，冻干粉再由氯仿、甲醇混合溶剂提取的方法为：冻干粉水溶液中加入氯仿、甲醇混合溶剂后，涡旋混匀，4-10℃静置8-18h，得到悬浮液；静置后悬浮液通过滤纸过滤，滤液静置后，滤液完全相分离，用分液漏斗取出下层，下层溶液真空离心浓缩干燥，得蜘蛛香脂质提取物。

15、本发明还进一步提供基于上述方法制备得到的蜘蛛香脂质提取物。

16、本发明还进一步提供所述蜘蛛香脂质提取物在制备预防腹泻的药物中的应用。

17、本发明还进一步提供所述蜘蛛香脂质提取物在制备治疗腹泻的药物中的应用。

18、与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

19、1、本技术方案在将蜘蛛香药材干粉加乙醇浸泡回流提取得到冻干粉后，还进一步对冻干粉进行提取，包括冻干粉加水溶解，再加入氯仿、甲醇混合溶剂，过滤后再进行相分离，对下层溶液真空离心浓缩干燥，得蜘蛛香脂质提取物。

20、2、本技术方案所得提取物主要是蜘蛛香脂质提取物，主要成分均是蜘蛛香脂质，与普通的蜘蛛香提取物不同，脂类物质是从蜘蛛香提取物中精制出来的，是粗提取物的一部分，这类物质的止泻活性未见报道也较少被关注。

21、3、本发明方案所得提取物主要是蜘蛛香脂质提取物，预防或治疗腹泻相较于现有方案具有更好的技术效果。