一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法

本发明属于菌株发酵，本发明涉及一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法。

背景技术：

1、在工业生产中，微生物高效生产特定产物的能力是满足市场需求的关键所在。为了实现这一目标，代谢工程改造和控制培养条件成为提升微生物生产效率的重要手段。发酵条件的优化涉及到多个因素，包括温度、ph值、接种量、装液量、转速和发酵时间等。这些因素的变化都会对微生物的生长和代谢产生显著影响。到目前为止，大部分关于生淀粉糖化酶的研究都还停留在实验室水平，生淀粉糖化酶还不能用于大规模工业应用，主要原因为目前生产的生淀粉糖化酶酶活力低且不稳定，使产品的成本增高，不具备经济可行性。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明提供一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法，可有效提高酶活，为将实验室研究结果转化为大规模工业化生产奠定基础。

2、本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：

3、一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法，包括发酵时间44.5h、发酵温度22℃、发酵起始ph 6.0、接种量1vt％、装液量110ml/250ml，转速191r/min。

4、本发明还请求保护上述发酵方法在产生淀粉糖化酶假单胞菌方面的应用。

5、本发明还请求保护获得上述发酵方法的优化方法：具体如下所示：

6、首先用plackett-burman法筛选出发酵时间、温度、转速对低温生淀粉糖化酶菌株发酵效果影响显著，通过对数据进行多元回归拟合，得到回归方程：y＝26.90+3.80a-2.63b-0.80c-1.00d-1.15e+1.89f；

7、然后进行最陡爬坡实验，经计算知发酵时间、温度、转速的爬坡方向和步长分别为+4h，-3.46℃，+9.95r/min，为方便实验，发酵时间、温度、转速的步长分别取+4h、-3.5℃、+10r/min，逼近最佳响应面区域；

8、最后通过box-behnken，利用design expert 10软件进行回归分析，得到各因素的最佳培养条件。接种于最优培养基中，发酵时间为44.5h、发酵温度为22℃、转速为191r/min。

9、进一步，所述回归分析的二次多项回归方程为：

10、y＝32.35+1.13x1+0.88*x2+0.12*x3-1.33*x1x2-0.003*x1x3-0.14*x2x3-3.57*

11、x12-2.05*x22-0.90*x32

12、本发明与现有技术相比的有益效果是：

13、本发明发酵方法得到的发酵液的生淀粉糖化酶活性为31.45±0.48u/ml，较现有技术提高了12.35u/ml。

技术特征：

1.一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法，其特征是，包括发酵时间44.5h、发酵温度22℃、发酵起始ph 6.0、接种量1vt％、装液量110ml/250ml，转速191r/min。

2.如权利要求1所述的发酵方法在产生淀粉糖化酶假单胞菌方面的应用。

3.获得如权利要求1所述的发酵方法的优化方法，其特征是，具体如下所示：首先用plackett-burman法筛选出发酵时间、温度、转速对低温生淀粉糖化酶菌株发酵效果影响显著，通过对数据进行多元回归拟合，得到回归方程：y＝26.90+3.80a-2.63b-0.80c-1.00d-1.15e+1.89f；

技术总结本发明属于菌株发酵技术领域，公开了一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法。包括发酵时间44.5h、发酵温度22℃、发酵起始pH 6.0、接种量1vt％、装液量110ml/250mL，转速191r/min。可有效提高酶活，为将实验室研究结果转化为大规模工业化生产奠定基础。技术研发人员：张庆芳,王严,迟乃玉,迟雪梅,吴家明,于爽受保护的技术使用者：大连大学技术研发日：技术公布日：2024/9/29