条件性活化的抗原结合多肽复合物及其使用方法与流程

本公开涉及具有某些结构特征的抗原结合多肽复合物(例如抗体及其抗原结合片段)。本公开还涉及具有某些结构特征的条件性活化的抗原结合多肽复合物(例如抗体及其抗原结合片段)。本公开进一步涉及编码此类多肽复合物的多核苷酸和载体；含有此类多肽复合物的细胞、药物组合物和试剂盒；以及使用此类多肽复合物的方法。

背景技术：

1、免疫疗法是通过活化或抑制免疫系统进行的疾病治疗。近年来，免疫疗法受到研究人员和临床医师的极大关注，特别是其在治疗癌症和传染病的前景方面。治疗性抗体是一种重要类型的免疫疗法。治疗性抗体可以具有单特异性，意指其对一种抗原或表位具有特异性。治疗性抗体也已被工程改造为对两种不同抗原或表位具有特异性(即，双特异性抗体)或对多种不同抗原或表位具有特异性(三特异性抗体、四特异性抗体等)。另外，已将单特异性、双特异性和多特异性抗体组合以形成治疗复杂人类疾病(诸如癌症和传染病)的多重靶向策略。

2、在过去几十年里，癌症免疫疗法已发现极大进展。近期发展包括检查点抑制剂和t细胞接合剂。在2014年批准贝林妥欧单抗(blinatumomab)的情况下，双特异性t细胞接合剂已成为下一代抗癌治疗剂的极具活性的领域。双特异性t细胞接合剂是识别靶肿瘤细胞上表达的抗原并且同时接合细胞毒性t细胞上的t细胞受体的cd3亚基的抗体，其充当介导细胞毒性t细胞进行肿瘤细胞溶解的人工免疫突触。

3、虽然双特异性t细胞接合抗体显示高抗肿瘤效力，但其也与强副作用相关，尤其与针对实体肿瘤靶标的中靶、肿瘤脱靶(off-tumor)毒性相关的细胞因子释放综合征(crs)，其可能限制这些抗体的治疗潜力。中靶、肿瘤脱靶毒性在双特异性t细胞接合抗体与发现于正常非癌变组织中的细胞上表达的癌症抗原(除癌细胞上表达的癌症抗原以外)结合时出现，从而将细胞毒性t细胞募集至正常组织并且导致正常组织损伤。因为极少实体肿瘤抗原排他性地对肿瘤具有特异性，所以此类毒性对于使用双特异性t细胞或自然杀手(nk)细胞接合剂的癌症免疫疗法造成巨大挑战。

4、需要可以结合特定靶分子或靶分子的组合并且仅当非常接近于肿瘤细胞或在肿瘤微环境内时活化细胞毒性t细胞的双特异性或多特异性抗原结合多肽复合物。另外需要产生高功效，不良事件(ad)可管控并且同时产生较宽治疗窗和较佳耐受性的双特异性或多特异性t细胞接合抗体。

技术实现思路

1、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽、第二多肽和第三多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-vh1-l2-fc；vh1-l1-vl1-l2-fc；vh1-l3-vl1-l4-fc；或vl1-l3-vh1-l4-fc；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vh2-l5-vh3-l6-ch1-l7-fc或vh3-l5-vh2-l6-ch1-l7-fc；其中所述第三多肽具有由以下表示的结构：vl2-l8-vl3-l9-cl或vl3-l8-vl2-l9-cl；其中vl1是第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是第三免疫球蛋白轻链可变区；vh1是第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是第三免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；ch1是免疫球蛋白重链恒定区1；cl是免疫球蛋白轻链恒定区；并且l1-l9是氨基酸接头。

2、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽、第二多肽、第三多肽和第四多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-cl或vh1-l1-cl；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vh1-l2-ch1-l3-fc或vl1-l2-ch1-l3-fc；其中所述第三多肽具有由以下表示的结构：vh2-l4-vh3-l5-ch1-l6-fc或vh3-l4-vh2-l5-ch1-l6-fc；其中所述第四多肽具有由以下表示的结构：vl2-l7-vl3-l8-cl或vl3-l7-vl2-l8-cl；其中vl1是第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是第三免疫球蛋白轻链可变区；vh1是第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是第三免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；ch1是免疫球蛋白重链恒定区1；cl是免疫球蛋白轻链恒定区；并且l1-l8是氨基酸接头。

3、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽、第二多肽和第三多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-vl2-l2-vh2-l3-vh1-l4-fc；vl1-l1-vh2-l2-vl2-l3-vh1-l4-fc；vh1-l5-vh2-l6-vl2-l7-vl1-l8-fc；或vh1-l5-vl2-l6-vh2-l7-vl1-l8-fc；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vh3-l9-vh4-l10-ch1-l11-fc或vh4-l9-vh3-l10-ch1-l11-fc；其中所述第三多肽具有由以下表示的结构：vl3-l12-vl4-l13-cl或vl4-l12-vl3-l13-cl；其中vl1是第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是第三免疫球蛋白轻链可变区；vl4是第四免疫球蛋白轻链可变区；vh1是第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是第三免疫球蛋白重链可变区；vh4是第四免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；ch1是免疫球蛋白重链恒定区1；cl是免疫球蛋白轻链恒定区；并且l1-l13是氨基酸接头。

4、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽、第二多肽和第三多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-vl2-l2-vh2-l3-vh1-l4-fc；vl1-l1-vh2-l2-vl2-l3-vh1-l4-fc；vh1-l5-vh2-l6-vl2-l7-vl1-l8-fc；或vh1-l5-vl2-l6-vh2-l7-vl1-l8-fc；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vh3-l9-vh4-ch1-fc；或vh4-l9-vh3-ch1-fc；其中所述第三多肽具有由以下表示的结构：vl3-l10-vl4-cl；或vl4-l10-vl3-cl；其中vl1是第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是第三免疫球蛋白轻链可变区；vl4是第四免疫球蛋白轻链可变区；vh1是第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是第三免疫球蛋白重链可变区；vh4是第四免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；ch1是免疫球蛋白重链恒定区1；cl是免疫球蛋白轻链恒定区；并且l1-l10是氨基酸接头。

5、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽和第二多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-vl2-l2-vh2-l3-vh1-l4-fc；vl1-l1-vh2-l2-vl2-l3-vh1-l4-fc；vh1-l5-vh2-l6-vl2-l7-vl1-l8-fc；或vh1-l5-vl2-l6-vh2-l7-vl1-l8-fc；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vl3-l9-vl4-l10-vh4-l11-vh3-l12-fc；vl3-l9-vh4-l10-vl4-l11-vh3-l12-fc；vh3-l13-vh4-l14-vl4-l15-vl3-l16-fc；或vh3-l13-vl4-l14-vh4-l15-vl3-l16-fc；其中vl1是与肿瘤相关抗原特异性结合的第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是与肿瘤相关抗原特异性结合的第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是与cd3特异性结合的第三免疫球蛋白轻链可变区；vl4是与肿瘤相关抗原特异性结合的第四免疫球蛋白轻链可变区；vh1是与肿瘤相关抗原特异性结合的第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是与肿瘤相关抗原特异性结合的第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是与cd3特异性结合的第三免疫球蛋白重链可变区；vh4是与肿瘤相关抗原特异性结合的第四免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；并且l1-l16是氨基酸接头。

6、本文提供了一种抗原结合多肽复合物，所述抗原结合多肽复合物包含第一多肽和第二多肽；其中所述第一多肽具有由以下表示的结构：vl1-l1-vl2-l2-vh2-l3-vh1-l4-ch1-l5-fc；vl1-l1-vh2-l2-vl2-l3-vh1-l4-ch1-l10-fc；vh1-l6-vh2-l7-vl2-l8-vl1-l9-ch1-l10-fc；vh1-l6-vl2-l7-vh2-l8-vl1-l9-ch1-l10-fc；vl1-l11-vl2-l12-vh2-l13-vh1-l14-cl-l15-fc；vl1-l11-vh2-l12-vl2-l13-vh1-l14-cl-l15-fc；vh1-l16-vh2-l17-vl2-l18-vl1-l19-cl-l20-fc；vh1-l16-vl2-l17-vh2-l18-vl1-l19-cl-l20-fc；vl1-l21-vl2-l22-vh2-l23-vh1-l24-ch1-l25-cl-l26-fc；vl1-l21-vh2-l22-vl2-l23-vh1-l24-ch1-l25-cl-l26-fc；vh1-l27-vh2-l28-vl2-l29-vl1-l30-ch1-l31-cl-l32-fc；vh1-l27-vl2-l28-vh2-l29-vl1-l30-ch1-l31-cl-l32-fc；vl1-l33-vl2-l34-vh2-l35-vh1-l36-cl-l37-ch1-l38-fc；vl1-l33-vh2-l34-vl2-l35-vh1-l36-cl-l37-ch1-l38-fc；vh1-l39-vh2-l40-vl2-l41-vl1-l42-cl-l43-ch1-l44-fc；或vh1-l39-vl2-l40-vh2-l41-vl1-l42-cl-l43-ch1-l44-fc；其中所述第二多肽具有由以下表示的结构：vl3-l45-vl4-l46-vh4-l47-vh3-l48-ch1-l49-fc；vl3-l45-vh4-l46-vl4-l47-vh3-l48-ch1-l49-fc；vh3-l50-vh4-l51-vl4-l52-vl3-l53-ch1-l54-fc；vh3-l50-vl4-l51-vh4-l52-vl3-l53-ch1-l54-fc；vl3-l55-vl4-l56-vh4-l57-vh3-l58-cl-l59-fc；vl3-l55-vh4-l56-vl4-l57-vh3-l58-cl-l59-fc；vh3-l60-vh4-l61-vl4-l62-vl3-l63-cl-l64-fc；vh3-l60-vl4-l61-vh4-l62-vl3-l63-cl-l64-fc；vl3-l65-vl4-l66-vh4-l67-vh3-l68-ch1-l69-cl-l70-fc；vl3-l65-vh4-l66-vl4-l67-vh3-l68-ch1-l69-cl-l70-fc；vh3-l71-vh4-l72-vl4-l73-vl3-l74-ch1-l75-cl-l76-fc；vh3-l71-vl4-l72-vh4-l73-vl3-l74-ch1-l75-cl-l76-fc；vl3-l77-vl4-l78-vh4-l79-vh3-l80-cl-l81-ch1-l82-fc；vl3-l77-vh4-l78-vl4-l79-vh3-l80-cl-l81-ch1-l82-fc；vh3-l83-vh4-l84-vl4-l85-vl3-l86-cl-l87-ch1-l88-fc；或vh3-l83-vl4-l84-vh4-l85-vl3-l86-cl-l87-ch1-l88-fc；其中vl1是与肿瘤相关抗原特异性结合的第一免疫球蛋白轻链可变区；vl2是与肿瘤相关抗原特异性结合的第二免疫球蛋白轻链可变区；vl3是与cd3特异性结合的第三免疫球蛋白轻链可变区；vl4是与肿瘤相关抗原特异性结合的第四免疫球蛋白轻链可变区；vh1是与肿瘤相关抗原特异性结合的第一免疫球蛋白重链可变区；vh2是与肿瘤相关抗原特异性结合的第二免疫球蛋白重链可变区；vh3是与cd3特异性结合的第三免疫球蛋白重链可变区；vh4是与肿瘤相关抗原特异性结合的第四免疫球蛋白重链可变区；fc是包含免疫球蛋白重链恒定区2(ch2)、免疫球蛋白重链恒定区3(ch3)和任选的免疫球蛋白铰链的区域；ch1是免疫球蛋白重链恒定区1；cl是免疫球蛋白轻链恒定区；并且l1-l88是氨基酸接头。

7、在一些方面，一个或多个接头l1-l88的长度为0个氨基酸至约50个氨基酸。在一些方面，一个或多个接头l1-l88无免疫原性。在一些方面，一个或多个接头l1-l88不含共同的t细胞表位。

8、在一些方面，一个或多个接头l1-l88是可裂解接头。在一些方面，可裂解接头被基质金属蛋白酶(mmp)、ii型跨膜丝氨酸蛋白酶或mmp和ii型跨膜丝氨酸蛋白酶裂解。在一些方面，mmp是mmp1、mmp2、mmp7、mmp8、mmp9、mmp13或它们的组合。在一些方面，ii型跨膜丝氨酸蛋白酶是间质蛋白酶(matriptase)、赫普辛(hepsin)或它们的组合。在一些方面，间质蛋白酶是间质蛋白酶1、间质蛋白酶2、间质蛋白酶3或它们的组合。在一些方面，可裂解接头被尿激酶或豆荚蛋白裂解。

9、在一些方面，可裂解接头是gpaalv、gsgrkg、gplgltg、gpsglvg、glvgrkag、gpaglvg、gpaglvsg、strkagg、astrkag或astrkagg(seq id no:22-31)，或与seq id no:22-31中的任一者具有至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％同一性的序列。在一些方面，接头l1-l88中的一者或多者包含g、a、gss、asg、ggssg、gssgs、gtvaa、asggs、astgg、ggsgs、asggsg、ggsgssg、ggsggssgss、sggsgssggs、ggsggsgsgggsasgsg、ggsggsgsggggsasgsg、gggssggggsggsgsggsgs、ggggsggsgsggggsasgsg、gggssggsgsggsgsggsgs、sggssggsgsggsgsggsgssg、gsgssggggsggsgsggsgssg、ggggsgsggsgggssggggsggggsggggsggggsggggs、ggggsggggsggggsggggsggggsggggsggggsggggs、ggggsgsggsgggssggggsggggsggggsggggsggggssss或ggggsgsggsgggssggggsggggsggggsggggsggggssssgs(seq id no:1-21)或seq id no:444、567、576(ggs)和607中的任一者的氨基酸序列，或与seq id no:1-21中的任一者或seq id no:444、567、576(ggs)和607中的任一者具有至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％同一性的序列。

10、在一些方面，vh1、vh2、vh3或vh4中的一者与cd3特异性结合。在一些方面，vl1、vl2、vl3或vl4中的一者与cd3特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3、或vh4和vl4与cd3特异性结合。

11、在一些方面，与cd3特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4包含：cdr1，其包含与seq idno:32、40、96、433、524、667、703、739、767、803、839、851和859中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:33、41、97、434、525、668、704、740、768、804、840、852和860中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:34、42、98、435、526、669、705、741、769、805、841、853和861中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；并且其中与cd3特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4包含：cdr1，其包含与seq id no:35、44、99、446、456、466、476、520、663、699、735、763、799、835、855和863中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:36、45、100、447(dt)、457(dt)、467(dt)、477(dt)、521、664、700、736、764、800、836、856和864中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:37、46、101、448、458、468、478、522、665、701、737、765、801、837、857和865中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列。在一些方面，与cd3特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4包含与seq id no:38、43、102、423、432、523、666、702、738、766、802、838、850和858中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列，并且与cd3特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4包含与seq id no:39、47、103、422、445、455、465、475、519、662、698、734、762、798、834、854和862中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列。

12、在一些方面，vh1、vh2、vh3或vh4中的一者或多者与肿瘤相关抗原(taa)特异性结合。在一些方面，vl1、vl2、vl3或vl4中的一者或多者与taa特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3和/或vh4和vl4与taa特异性结合。在一些方面，taa是a2ar、april、atpd酶、baff、baffr、bcma、blys、btk、btla、b7dc、b7h1、b7h2、b7h3、b7h4、b7h5、b7h6、b7h7、b7rp1、b7-4、c3、c5、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl7、ccl8、ccl11、ccl15、ccl17、ccl19、ccl20、ccl21、ccl25、ccr3、ccr4、cd16a、cd19、cd20、cd24、cd27、cd28、cd30、cd38、cd39、cd40、cd40l、cd47、cd52、cd70、cd80、cd86、cd123、cd133、cd137、cd137l、cd160、cd272、ceacam5、clec9、clec91、crth2、csf-1、csf-2、csf-3、cxcl1、cxcl2、cxcl4、cxcl12、cxcl13、cxcr3、cmet、ctla4、dll3、dll4、dngr-1、上皮钙粘蛋白、egfr、entpd1、epcam、fcer1、fcer1a、fcer2、fgfr、flap、folh1、gi24、gitr、gitrl、gpr5、gp100、gprc5d、her2、her3、icosl、icos、hhla2、hmgb1、hvem、ido、ifna、ige、igf1r、il2rβ、il1、ilia、il1b、il1f10、il2、il4、il4ra、il5、il5r、il6、il7、il7ra、il8、il9、il9r、il10、rhillo、il12、il13、il13ral、il13ra2、il15、il17、il17rb、il18、il22、il23、il25、il7、il33、il35、itgb4、itk、kir、lag3、lamp1、瘦素、lpfs2、ii类mhc、muc-1、muc-16、ncr3lg1、nkg2d、nkp46、ntpd酶-1、ox40、ox40l、pd-1、pd-l1、pd-l2、prom1、s152、sirpα、sisp1、slc、spg64、st2、steap1、steap2、syk激酶、steap1、trop2、taci、tdo、tgfβ、t14、tigit、tim3、tlr、tlr2、tlr4、tlr5、tlr9、tmef1、tnfa、tnfrsf7、tp55、treml、tslp、tslpr、tweak、vegf、vista、vstm3或wucam，或它们的组合。在一些方面，taa是cd19。在一些方面，taa是cd20。在一些方面，taa是cmet。在一些方面，taa是trop2。

13、在一些方面，与taa特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4中的一者或多者包含：cdr1，其包含与seq id no:64、72、80、88、104、112、120、128、389、409、419、429、659、695、731、397、508、540、552、757、793、829、875、500、749、785、821、649、685、775、847、625、641、677和713中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:65、73、81、89、105、113、121、129、390、410、420、430、660、696、732、398、509、541、553、758、794、830、876、501、750、786、822、650、686、776、848、626、642、678和714中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:66、74、82、90、106、114、122、130、391、411、421、431、661、697、733、399、510、542、554、759、795、831、877、502、751、787、823、651、687、777、849、627、643、679和715；并且其中与taa特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4中的一者或多者包含：cdr1，其包含与seq id no:67、75、83、91、107、115、123、131、385、405、415、441、452、462、472、655、691、727、393、486、504、536、548、753、789、825、871、879、490、496、745、781、817、645、681、771、843、621、637、673和709中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:68、76、84、92、108、116、124、132、386(yts)、406(yts)、416(yts)、442(yts)、453(yts)、463(yts)、473(yts)、656、692、728、394、487(at)、505(at)、537、549、754、790、826、872、880、491(da)、497(da)、746、782、818、646、682、772、844、622、638、674和710中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:69、77、85、93、109、117、125、133、387、407、417、443、454、464、474、657、693、729、395、488、506、538、550、755、791、827、873、881、492、498、747、783、819、647、683、773、845、623、639、675和711中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列。在一些方面，与taa特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4中的一者或多者包含与seq id no:70、78、86、94、102、110、118、126、134、388、408、418、428、584、658、694、730、396、403、507、539、551、756、792、828、883、866、874、499、544、556、748、784、820、528、648、684、774、846、624、640、676和712中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列；并且与taa特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4中的一者或多者包含与seq id no:71、79、87、95、103、111、119、127、135、384、404、414、440、451、461、471、583、654、690、726、392、402、485、503、535、547、752、788、824、870、878、489、495、543、555、744、780、816、882、527、644、680、770、842、620、636、672和708中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列。

14、在一些方面，vh1、vh2、vh3或vh4中的一者或多者与免疫刺激受体特异性结合。在一些方面，vl1、vl2、vl3或vl4中的一者或多者与免疫刺激受体特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3和/或vh4和vl4与免疫刺激受体特异性结合。在一些方面，免疫刺激受体是cd28。

15、在一些方面，与免疫刺激受体特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4包含：cdr1，其包含与seq id no:48、56、649、685、775和847中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:49、57、650、686、776和848中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:50、58、651、687、777和849；并且其中与免疫刺激受体特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4包含：cdr1，其包含与seq idno:51、59、645、681、771和843中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；cdr2，其包含与seq id no:52、60、646、682、772和844中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列；和cdr3，其包含与seq id no:53、61、647、683、773和845中的任一者具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少100％同一性的氨基酸序列。在一些方面，与免疫刺激受体特异性结合的vh1、vh2、vh3或vh4包含与seq id no:54、62、528、648、684、774和846中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列，并且与免疫刺激受体特异性结合的vl1、vl2、vl3或vl4包含与seq id no:55、63、527、644、680、770和842中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列。

16、在一些方面，l5、l8、或l5和l8是可裂解接头。在一些方面，l4、l7、或l4和l7是可裂解接头。在一些方面，l9、l12、或l9和l12是可裂解接头。在一些方面，vh3和vl3与cd3特异性结合。在一些方面，vh1和vl1和/或vh2和vl2与taa特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、或vh2和vl2与cd28特异性结合。在一些方面，vh4和vl4与cd3特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、以及vh3和vl3中的一者或多者与taa特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与taa特异性结合，vh2和vl2与taa特异性结合，并且vh3和vl3与cd28特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd28特异性结合，vh2和vl2与taa特异性结合，并且vh3和vl3与taa特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cmet特异性结合，vh2和vl2与trop2特异性结合，并且vh3和vl3与cd28特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与trop2特异性结合，vh2和vl2与cmet特异性结合，并且vh3和vl3与cd28特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cmet特异性结合，vh2和vl2与cd28特异性结合，并且vh3和vl3与trop2特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd28特异性结合，vh2和vl2与cmet特异性结合，并且vh3和vl3与trop2特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与trop2特异性结合，vh2和vl2与cd28特异性结合，并且vh3和vl3与cmet特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd28特异性结合，vh2和vl2与trop2特异性结合，并且vh3和vl3与cmet特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd19特异性结合，vh2和vl2与cd20特异性结合，并且vh3和vl3与cd28特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd20特异性结合，vh2和vl2与cd19特异性结合，并且vh3和vl3与cd28特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd19特异性结合，vh2和vl2与cd28特异性结合，并且vh3和vl3与cd20特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd20特异性结合，vh2和vl2与cd28特异性结合，并且vh3和vl3与cd19特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd28特异性结合，vh2和vl2与cd19特异性结合，并且vh3和vl3与cd20特异性结合。在一些方面，vh1和vl1与cd28特异性结合，vh2和vl2与cd20特异性结合，并且vh3和vl3与cd19特异性结合。

17、在一些方面，l1、l3、或l1和l3是可裂解接头，或者l5、l7、或l5和l7是可裂解接头。在一些方面，l9、l11、或l9和l11是可裂解接头，或者l13、l15、或l13和l15是可裂解接头。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3、或vh4和vl4与cd3特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3、以及vh4和vl4中的一者或多者与taa特异性结合。在一些方面，vh1和vl1、vh2和vl2、vh3和vl3、或vh4和vl4与cd28特异性结合。

18、在一些方面，本文所描述的抗原结合多肽复合物是抗体或其抗原结合片段。

19、在一些方面，免疫球蛋白铰链包含上铰链区、中铰链区、下铰链区或它们的组合。

20、在一些方面，fc区包含至少一个杵-臼修饰。在一些方面，抗原结合多肽复合物是igg1或igg4抗体，并且杵-臼修饰包含：(i)s354c和t366w的杵取代以及y349c、t366s、l368a和y407v的臼取代；(ii)l234a、l235a和p329a的臼取代；(iii)l234a和l235a的臼取代；(iv)m428l和n433s的臼取代；(v)m252y、s254t和t256e的臼取代；或(vi)它们的组合；基于eu编号方案。

21、本文还提供了一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含本文所描述的抗原结合多肽复合物。

22、本文还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本文所描述的抗原结合多肽复合物或抗体或其抗原结合片段，以及药学上可接受的载体。

23、本文提供了一种试剂盒，所述试剂盒包含本文所描述的抗原结合多肽复合物、抗体或其抗原结合片段或药物组合物，以及使用说明书。

24、本文还提供了本文所描述的抗原结合多肽复合物、抗体或其抗原结合片段、药物组合物或试剂盒或它们的组合的规定使用方法。本文提供了一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用本文所描述的抗原结合多肽复合物、抗体或其抗原结合片段或药物组合物。在一些方面，癌症是实体癌症。在一些方面，癌症是乳癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、宫颈癌、尿道上皮癌或胰腺癌。在一些方面，癌症是血液学癌症。在一些方面，血液学癌症是白血病或淋巴瘤。在一些方面，白血病或淋巴瘤是b细胞白血病、b细胞淋巴瘤、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病(cll)/小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)、套细胞淋巴瘤(mcl)、伯基特淋巴瘤(burkitt lymphoma)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(waldenstrom macroglobulinemia))、前淋巴细胞性白血病(pll)或毛细胞白血病(hcl)。