可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法与流程

本发明涉及生物医药，特别涉及可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法。

背景技术：

1、人类随着年龄的增长，面临着最大的不可避免的问题就是机体的衰老，人体中的肌肉和胶原蛋白组织会产生不同程度的功能性退化，从而导致皮肤产生凹陷，弹性变差等问题，因此，人们研发了各种填充剂，以此来在皮肤凹陷处填充或通过异物来刺激胶原蛋白和肌肉的再生长，如玻尿酸、牛胶原蛋白等，但这些物质作为填充剂所起到的填充效果较差，需要频繁注射来保持填充效果。因此人们探索了用生物不可降解的材料制作成微球作为填充剂，如：聚乙烯醇(pva)、聚甲基丙烯酸甲酯(pmma)等。虽然这些填充剂的填充时间得到了增长，但是材料在体内过久的残留，会释放有害物质，并因此引发一系列的副反应，危害人体健康。

2、生物可降解的高分子材料是一类在医用方面很有应用前景的材料，该类型的材料在人体中无毒且不会产生免疫排斥反应，在一定时间后，可以在人体内降解后被机体吸收或排出体外。通过调节材料的各项性能参数，还可以根据需要获得对应的性能，特别对降解时间的调控。

3、聚羟基脂肪酸酯，英文名为polyhydroxyalkanoates，简称pha，是一种天然的高分子生物材料，由微生物合成的一种细胞内聚酯。由于pha具有良好的生物相容性能、生物可降解性，是当下最为理想的生物医学材料之一。pha在体内与细胞具有良好的细胞相容性，细胞可以在此种支架上良好生长，且该种支架可以降解为co2和h2o。为了便于注射，人们通常将其制为微球，可以通过针头进行注射。因为人体吞噬细胞的存在，微球直径通常在20微米以上，但微球过大又会堵塞针头，甚至引起皮肤破裂。因此用于注射的微球大小通常为60微米以下。

4、壳聚糖，英文名chitosan，简称cs，是一种天然的碱性多糖，具有优良的生物降解性、抑菌性、无毒性、抗癌能力、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质。壳聚糖被广泛应用于生物产品中，将其与pha结合后的微球，可以起到很好的生物填充作用，同时能够避免注射时可能引起的感染问题。

5、针对现有技术存在以下问题：

6、在将pha材料制备可注射微球时，容易遇到制得的微球十分容易团聚、粘连，形成较大的块状物质的问题，给后续注射带来不便，并且所制备微球粘附细胞的能力不强，不能很好地与组织相容，极大的阻碍了生物可降解材料微球作为填充剂的应用。因此，急需一种新型的微球制备方案，解决微球的细胞粘附性不高、易团聚、粘连的问题。

技术实现思路

1、本发明提供可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

2、为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

3、可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，该制备方法包括以下步骤：

4、步骤一：制备油相：将pha溶于有机溶剂，制备10-60mg/ml的pha/有机溶剂溶液；

5、步骤二：配置1％的壳聚糖/乙酸溶液；

6、步骤三：水相：配置0.5-1％的聚乙烯醇(pva)溶液，溶液中加入0.5％的tween-20。聚乙烯醇溶液作为表面活性剂使用，利于微球的成型过程，不同浓度的聚乙烯醇溶液分别用于两次乳化过程中；聚乙烯醇溶液的比例为0.5％浓度；

7、步骤四：通过控制pha/有机溶剂溶液与壳聚糖溶液的体积比，预先将壳聚糖溶液与pha/有机溶剂溶液超声破碎混合得到混合相；pha/有机溶剂与壳聚糖溶液的比例为1：1；

8、步骤五：搅拌条件下将混匀的混合相溶液滴加到水相中形成w/0乳液，一段时间后，挥发有机溶剂，将溶液分散到大剂量的水中，得到可注射的纳米级多孔微球；混合相与水相的体积比为1：2。

9、溶剂比例，配制10mg/ml的pha/有机溶剂。此时形成的微球粒径合适分散性好、具有多孔性、不易粘连。具体地，聚乙烯醇水溶液中，聚乙烯醇可以是超高聚合度的聚乙烯醇(分子量25～30万)、高聚合度的聚乙烯醇(分子量17～22万)、中聚合度的聚乙烯醇(分子量12～15万)和低聚合度的聚乙烯醇(分子量为2.5～3.5万)，聚乙烯醇的醇解度为78％-98％。

10、优选的，所述步骤四中，pha：cs的浓度比为1：1。

11、优选的，所述所选溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷。

12、优选的，所述pha材料为天然或非天然聚羟基脂肪酸酯。

13、优选的，搅拌速率为500-800rpm。

14、可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球，由可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，制得可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球。

15、由于采用了上述技术方案，本发明相对现有技术来说，取得的技术进步是：

16、1、本发明提供可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法，得到的微球，具有良好的生物相容性，分散性，具备多孔表面，亲水性增强、粒径适宜，且因与壳聚糖的结合从而具有了一定的抗菌抑菌性能。

17、2、本发明提供可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法，制得的可注射pha微球具有亲水性、多孔结构、适宜粒径，可以用于组织填充等领域。

技术特征：

1.可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：该制备方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：所述步骤四中，pha：cs的浓度比为1：1。

3.根据权利要求1所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：所述所选溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷。

4.根据权利要求1所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：所述pha材料为天然或非天然聚羟基脂肪酸酯。

5.根据权利要求1所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：搅拌速率为500-800rpm。

6.可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球，其基于权利要求1-5任一项所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球的制备方法，其特征在于：制备方法制得可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球。

技术总结本发明公开了可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法，涉及生物医药技术领域，该制备方法包括以下步骤：步骤一：制备油相：将PHA溶于有机溶剂，制备10‑60mg/ml的PHA/有机溶剂溶液；步骤二：配置1％的壳聚糖/乙酸溶液；步骤三：水相：配置0.5‑1％的聚乙烯醇(PVA)溶液，溶液中加入0.5％的Tween‑20。本发明所述的可注射的壳聚糖复合聚羟基脂肪酸酯微球及其制备方法，得到的微球，具有良好的生物相容性，分散性，具备多孔表面，亲水性增强、粒径适宜，且因与壳聚糖的结合从而具有了一定的抗菌抑菌性能。技术研发人员：高宏伟,刘柯雨,郑亚铎,王赛争,于佳雯,张博雪,张红蕾,张路路受保护的技术使用者：高宏伟技术研发日：技术公布日：2024/10/10