新型胍苯甲酸酯类衍生物制备方法及其胰腺炎用途

本发明涉及抗胰腺炎药物的制备，特别是新型胍苯甲酸酯类衍生物的制备方法及其胰腺炎用途。

背景技术：

1、急性胰腺炎是一种较为复杂的炎症反应，其特征表现为胰腺早期的胰酶激活，导致胰腺组织的自身消化、间质水肿、空泡堆积、腺泡细胞坏死以及巨噬细胞和中性粒细胞的炎性渗透等。引发此类急性疾病的主要因素是胰腺过度刺激，如胆结石继发的胰管梗阻、酒精滥用。这些因素可能触发病理细胞通路和细胞器功能障碍，最终导致腺泡细胞死亡、局部和全身炎症。目前对急性胰腺炎的发病机制已有广泛的研究，如胰蛋白酶原过早激活、病理性钙超载、胰腺微循环障碍、nf-κb激活、白细胞浸润和自噬受损等都曾被报道参与急性胰腺炎的发病机制(bhatia m，et al.pancreatology，2005，5：132-144)，然而其确切的发病机制仍具争论。最常见和被广泛接受的理论为胰腺炎发生是由于胰腺腺泡损伤或破坏，使得胰腺酶(胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性酶)渗漏到胰腺组织中，进而被激活，活化后的蛋白酶(胰蛋白酶和弹性蛋白酶)和脂肪酶破坏组织和细胞膜，引起水肿、血管损伤、出血坏死等(jiang x，et al.drug delivery，2020，27(1)：1562-1580)。

2、炎症细胞募集、促炎细胞因子和氧自由基在确定急性胰腺炎严重程度方面发挥着重要作用，其中促炎细胞因子会导致诱导型一氧化氮合酶(inos)的表达，进而导致过量no的释放。而过量的no会增强白细胞对内皮的粘附以及白细胞向组织的迁移(um s h，etal.journal of korean medical science，2003，18(4)：520)，加速炎症进程。现已有大量证据表明，活化的巨噬细胞和淋巴细胞可产生大量的no，而这过量的no与其细胞毒性有直接关系；低水平的no可能对多种细胞具有保护作用，而大量系统性产生的no会对组织产生损伤(molero x，et al.gastroenterology，1995，108(6)：1855-1862)。因此，将no保持在最佳水平，可以减少急性胰腺炎中的白细胞浸润，进而减缓炎症进程。最近一项研究表明，促炎细胞因子释放后还与外周血单核细胞(pbmc)相互作用，导致腺泡细胞凋亡(jakkampudia，et al scientific reports，2017，7(1)：15276)。

3、目前临床上胰腺炎用药多为胰蛋白酶抑制剂奈莫司他、加贝酯等，其中甲磺酸萘莫司他作为一线药物一直用于治疗胰腺炎，但不具抗炎作用，且合成所需原料6-脒基-2-萘酚价格极其昂贵。本项目在保留萘莫司他中左侧对胍基苯甲酸片段的基础上，对其右侧萘脒基进行了大量化学基团随机置换，寻找同时具有抗胰蛋白酶活性和抗炎作用的分子结构，最终发现胍苯甲酸基与对羟基肉桂酸酯或对羟基肉桂酰胺结合时抗炎效果显著，并据此合成了一系列新型胍苯甲酸酯类衍生物。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了寻找同时具有抑制胰蛋白酶活性和抗炎作用的多靶向抗胰腺炎药物，由此设计合成了一系列新型胍苯甲酸酯类衍生物。本发明对该系列化合物进行了深入的化学和药理活性研究，结果表明本项目中五个全新化合物不仅具有显著的抗炎活性，且其中四个化合物对胰蛋白酶的抑制效果还强于对照药萘莫司他。本发明原料易得，易于产业化，具备开发成新型抗胰腺炎药物的前景，为研制多靶向抗胰腺炎药物和丰富临床用药品种提供了新思路。

2、本发明的技术方案：

3、新型胍苯甲酸酯类衍生物，其化学结构通式如下：

4、

5、结构式中r为乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、二甲氨基、二乙氨基。

6、所述的衍生物包括新型胍苯甲酸酯类衍生物，其特征在于：所述衍生物具体包括(e)-4-(3-乙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-丙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-异丙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-二甲氨基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-二乙氨基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯。

7、所述新型胍苯甲酸酯类衍生物制备方法是：以对氨基苯甲酸为原料，首先将其转化成盐酸盐，在一定条件下与氰胺反应制得中间体对胍基苯甲酸盐酸盐，另外由对羟基肉桂酸酰化后与各种胺或醇类物质生成对羟基肉桂酸酯或对羟基肉桂酰胺，然后在缩合剂二环己基碳二亚胺(dcc)、4-二甲氨基吡啶(dmap)及无水吡啶溶液中相互反应8～12h生成目标化合物。

8、步骤1：在圆底烧瓶中加入对氨基苯甲酸、4mol/l盐酸，回流搅拌0.5h，减压浓缩；继续加入乙醇、氰胺，55℃搅拌反应8h，减压浓缩冷却至析出白色固体，过滤，用丙酮(2×30ml)洗涤，用水重结晶，干燥，得白色晶体，即对胍基苯甲酸盐酸盐。

9、步骤2：在圆底烧瓶中依次加入四氢呋喃、对羟基肉桂酸，冰浴搅拌下依次滴加草酰氯、n，n-二甲基甲酰胺，滴毕，冰浴下反应30min后升至常温，沿杯壁滴加醇类或胺类溶液常温反应1h。过滤，浓缩至10ml，湿法上样，用硅胶柱分离，v(二氯)：v(甲醇)＝20：1为洗脱剂，收集产物，减压回收溶剂，得到对羟基肉桂酸酯类或对羟基肉桂酰胺类化合物。

10、步骤3：取对胍基苯甲酸盐酸盐、对羟基肉桂酸酯类或对羟基肉桂酰胺类加入到圆底烧瓶中，依次加入吡啶溶液、催化剂dcc、dmap，常温反应8～12h，析出大量dcu，tlc检测反应完全后，抽滤，浓缩至10ml，湿法上样，用硅胶柱分离，v(二氯)：v(甲醇)＝10：1为洗脱剂，收集产物，减压回收溶剂后得白色固体。对其进一步通过凝胶柱sephadex-lh-20纯化，得到目标产物。

11、本发明提供的新型胍苯甲酸酯类衍生物同时具有胰蛋白酶抑制作用及抗炎活性，可用于制备抗胰腺炎药物。

12、本发明的优点和有益效果是：

13、相较于已上市的抗胰腺炎胰蛋白酶抑制剂类药物，此类新型胍苯甲酸酯类衍生物不仅具有出色的胰蛋白酶抑制活性，更是在抗炎活性方面表现出良好的抗炎效果，为多靶点抗胰腺炎候选药物。在对羟基肉桂酸酯或对羟基肉桂酰胺的制备过程中，将对羟基肉桂酸与醇类或胺类物质反应，我们尝试过直接采用缩合剂(dcc、dmap)，但经tlc点板检测显示，目标中间体基本不生成，副产物多，且极性相似，难于分离。而文献报道中常用氧化亚砜作为催化剂，将羧酸转为活性更高的酰氯，但副产物较多，反应剧烈且毒性较大。最终我们采用较为温和的草酰氯进行酰化，少量dmf作为催化剂，反应高效，副产物少，收率高且符合绿色化学，迄今国内外没有关于此种合成改进的文献报道。

技术特征：

1.新型胍苯甲酸酯类衍生物，其特征在于其化学结构通式如下：

2.如权利要求1所述的新型胍苯甲酸酯类衍生物，其特征在于：所述衍生物具体为(e)-4-(3-乙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-丙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-异丙氧基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-二甲氨基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯、(e)-4-(3-二乙氨基-3-氧代-1-丙烯基)苯基-4-胍基苯甲酸酯。

3.一种如权利要求1所述新型胍苯甲酸酯类衍生物的制备方法，其特征在于：以四氢呋喃为溶剂，草酰氯为酰化剂，少量n，n-二甲基甲酰胺为催化剂，通过对羟基肉桂酸与醇类或胺类溶液进行反应制备对羟基肉桂酸酯类或对羟基肉桂酰胺类中间体。具体步骤如下：

4.权利要求1或2所述的新型胍苯甲酸酯类衍生物的用途，其特征在于：所述的衍生物同时具有显著的胰蛋白酶抑制活性和抗炎作用，用于制备多靶向抗胰腺炎药物。

技术总结新型胍苯甲酸酯类衍生物的制备和胰腺炎用途，所述制备方法是：以对氨基苯甲酸为原料，首先将其转化成盐酸盐，在一定条件下与氰胺反应制得对胍基苯甲酸盐酸盐，另外由对羟基肉桂酸酰化后与醇或胺类物质生成对羟基肉桂酸酯类或对羟基肉桂酰胺类中间体，然后此中间体与上述对胍基苯甲酸盐酸盐在缩合剂二环己基碳二亚胺(DCC)、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)及无水吡啶溶液中反应生成新型胍苯甲酸酯类衍生物。合成所得的五种新型胍苯酸酯类衍生物不仅具有显著的抗炎活性，且其中四个化合物对胰蛋白酶的抑制效果强于对照药萘莫司他。本发明制备方法原料易得，易于产业化，能用于制备抗胰腺炎药物，为研制多靶向抗胰腺炎药物提供了新思路。技术研发人员：刘玉明,祝东荣,滑鑫豪受保护的技术使用者：天津理工大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10