一种侧孢芽孢杆菌HP-2及其应用的制作方法

本技术涉及微生物领域，更具体地说，它涉及一种侧孢芽孢杆菌hp-2及其应用。

背景技术：

1、侧孢芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌属；能够形成芽孢以抵抗不良环境；并且具有较强的生命力和适应性，能够在多种环境条件下存活和繁殖；侧孢芽孢杆菌在农业、环保、生物防治等领域具有广泛的应用价值。

2、侧孢芽孢杆菌能够分解土壤中的有机物质，释放植物所需要的养分，促进植物生长，同时还能够抑制、杀灭植物病原菌，减少农作物病害发生的概率，提高农作物的产量和品质；并且还能够降解油脂、蛋白质等，减轻环境污染，进一步保证土壤中农作物的品质和质量。

3、但是侧孢芽孢杆菌的活性受温度和ph值影响，在碱性土壤中，侧孢芽孢杆菌活性降低，在夏季高温环境下，活性也容易降低，从而容易影响侧孢芽孢杆菌在土壤中的作用效果，还可能影响农作物的品质和产量。

4、因此，如何得到一种耐高温、耐碱的侧孢芽孢杆菌，使其应用在土壤中，能够促进农作物生长，提高农作物产量，是一个有待解决的问题。

技术实现思路

1、为了得得到一种耐高温、耐碱的侧孢芽孢杆菌，使其应用在土壤中，能够促进农作物生长，提高农作物产量，本技术提供一种侧孢芽孢杆菌hp-2及其应用。

2、第一方面，本技术提供一种侧孢芽孢杆菌hp-2，采用如下的技术方案：

3、一种侧孢芽孢杆菌hp-2，侧孢芽孢杆菌hp-2(bacillussporidiahp-2)保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：cctccno.m20221789。

4、通过采用上述技术方案，侧孢芽孢杆菌hp-2具有较好的耐高温、耐碱的优点，并且不易因储存、使用过程中的外界环境因素而影响侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，当侧孢芽孢杆菌hp-2用作生物肥添加到土壤中，够促进农作物生长，提高农作物品质和产量。

5、第二方面，本技术提供一种生物肥，采用如下的技术方案：

6、一种生物肥，包含如下重量份的原料：

7、豆粕30-50份、磷酸钾25-35份、磷酸二氢铵25-35份、edta螯合镁0.0001-0.0003份、edta螯合钙0.0001-0.0005份、edta螯合铁0.0001-0.0005份、硫酸锌0.0001-0.0008份、腐殖酸0.1-0.25份、生物纤维1-5份、透气填料2-8份、侧孢芽孢杆菌hp-2菌液50-70份；侧孢芽孢杆菌hp-2菌液采用侧孢芽孢杆菌hp-2制成。

8、通过采用上述技术方案，豆粕、生物纤维和透气填料等物质容易吸附侧孢芽孢杆菌hp-2菌液，使得侧孢芽孢杆菌hp-2均匀分散的同时，在土壤中侧孢芽孢杆菌hp-2能够缓慢释放，配合侧孢芽孢杆菌hp-2较高的活性和耐高温、耐碱性，能够长时间分解有机物，补充农作物生长所需要的营养物质，从而促进土壤中农作物生长和繁殖。

9、豆粕、生物纤维、透气填料相配合，利用豆粕较好的粗糙度以及连通孔隙配合生物纤维和透气填料的内部孔隙结构，使生物肥具有较好的透气效果，保证侧孢芽孢杆菌在土壤中应用时能够与氧气接触，使侧孢芽孢杆菌hp-2具有较高活性的同时保证侧孢芽孢杆菌hp-2的生长和繁殖。

10、豆粕、生物纤维相配合，豆粕中含有较高含量的蛋白质，能够供给侧孢芽孢杆菌hp-2生长所需要的碳源和氮源物质，生物纤维也能够在后期被侧孢芽孢杆菌hp-2分解利用，从而进一步保证侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，以及侧孢芽孢杆菌hp-2的生长速率和繁殖率。

11、豆粕、生物纤维和透气填料相配合，豆粕是榨油后的产物，具有疏水效果，由于豆粕添加量较大，其疏水效果能够阻止水分在土壤中过度附着，并且生物纤维和透气填料利用其孔隙结构，配合豆粕的孔隙作用，能够保证降雨雨水水分的流通，从而使土壤具有较好的透气性，保证侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，从而保证侧孢芽孢杆菌hp-2在土壤中较高含量的繁殖，促进农作物生长。

12、优选的，所述侧孢芽孢杆菌hp-2菌液制备方法如下：

13、将侧孢芽孢杆菌hp-2接种于na固体培养基中，在30-35℃、ph为6.8-7.2的条件下培养8-12h，得到活化菌；

14、将活化菌按照4-8％的接种量转接于扩培培养基中，在30-35℃、80-100rpm的条件下培养6-8d，离心分离后取上清液，得到菌液。

15、通过采用上述技术方案，侧孢芽孢杆菌hp-2经na固体培养基活化处理后，在扩培培养基中进行扩培，使菌液中含有高含量的侧孢芽孢杆菌hp-2，并且使侧孢芽孢杆菌hp-2具有较高的活性，同时具有耐高温、耐碱的优点，即使在炎热的夏季，也不易影响侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，使炎热夏季侧孢芽孢杆菌hp-2仍然能够分解有机物质，保证农作物的生长；即使在碱土壤中使用，也不以影响侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，仍能够分解有机物产生碳源、氮源物质，进一步保证农作物的生长。

16、优选的，所述na固体培养基包含如下原料：氯化钠4-6g/l，牛肉膏8-12g/l，蛋白胨8-12g/l，琼脂15-25g/l，水余量，定容至1l。

17、优选的，所述扩培培养基包含如下原料：葡萄糖5-10g/l、胰蛋白胨10-15g/l、酵母提取物2-8g/l、氯化钠4-8g/l、氯化钾2-4g/l，水余量，定容至1l。

18、优选的，所述菌液中侧孢芽孢杆菌hp-2的含量为2.52×1010～4.76×1010cfu/ml。

19、通过采用上述技术方案，限定na固体培养基和扩培培养基的原料比，使侧孢芽孢杆菌hp-2能够被迅速活化、扩培，使菌液中含有较高含量的侧孢芽孢杆菌hp-2。

20、优选的，所述豆粕由质量比为1:0.1-0.2:0.1-0.3的大豆粕、糖蜜和酪蛋白制成。

21、通过采用上述技术方案，利用糖蜜的粘性，便于将酪蛋白粘附在大豆粕表面，利用酪蛋白的水不溶性，不易吸附过多的水分，并且酪蛋白中含有氨基和羧基，具有亲水性，保证水分在豆粕表面的流通，同时利用酪蛋白和大豆粕交联形成的网络结构，进一步提高豆粕的孔隙率，不仅便于负载侧孢芽孢杆菌hp-2，促进侧孢芽孢杆菌hp-2的生长繁殖，而且还具有较好的透气性，保证氧气在土壤中的流通，使好氧的侧孢芽孢杆菌hp-2能够快速生长繁殖，以促进农作生长，提供农作物产量。

22、优选的，所述生物纤维由质量比为1:0.5-1的竹纤维和果胶包膜木质素组成。

23、通过采用上述技术方案，壳聚糖、竹纤维、果胶、木质素等物质，均能够供给侧孢芽孢杆菌hp-2生长所需要的碳源和氮源物质，从而保证侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，促进侧孢芽孢杆菌hp-2生长繁殖，提高土壤中的侧孢芽孢杆菌hp-2含量，从而提高农作物的产量。

24、竹纤维、果胶包膜木质素相配合，在碱性土壤中，果胶容易被碱液逐渐分解，使得木质素逐渐暴露，木质素也能够溶于碱液，通过碱液的利用，降低土壤中碱含量；在果胶和木质素未被分解时，利用果胶和木质素的吸附效果配合木质素的孔隙，配合木质素、竹纤维对碱液的吸附效果，进一步降低土壤中的碱含量；同时配合侧孢芽孢杆菌hp-2较好的耐碱性，保证侧孢芽孢杆菌hp-2能够在碱性土壤中活性较高，保证农作物的生长，从而保证农作物的产量。

25、优选的，所述果胶包膜木质素由木质素负载柠檬酸溶液后包覆果胶膜液制得；木质素、柠檬酸溶液、果胶膜液的质量比为1:0.4-0.8:0.5-1。

26、通过采用上述技术方案，利用木质素的吸附效果吸附柠檬酸溶液，然后利用果胶进行包膜；降雨时，土壤中的碱遇到水，变成碱液，果胶逐渐溶于碱液，暴露处柠檬酸溶液，利用柠檬酸与碱的中和反应，降低土壤中碱含量，并且配合木质素对碱液的吸附效果，进一步降低土壤中的游离碱含量，同时木质素溶于碱液，进一步消耗土壤中的碱；使土壤中的碱含量降低，配合侧孢芽孢杆菌hp-2较好的耐碱性，以及代谢产生酸对碱的中和效果，提高土壤中农作物的产量。

27、优选的，所述透气填料由质量比起1:0.5-1的生物炭和沸石组成。

28、通过采用上述技术方案，生物炭、沸石相配合，利用生物炭和沸石的孔隙，提高土壤透气性，保证侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，从而提高农作物的产量。

29、综上所述，本技术具有以下有益效果：

30、1、侧孢芽孢杆菌hp-2具有较好的耐高温、耐碱的优点，并且不易因储存、使用过程中的外界环境因素而影响侧孢芽孢杆菌hp-2的活性，当侧孢芽孢杆菌hp-2用作生物肥添加到土壤中，够促进农作物生长，提高农作物品质和产量。

31、2、东北地区碱性土壤使用生物肥，利用生物肥中生物纤维和透气填料的透气性，保证侧孢芽孢杆菌hp-2生长繁殖的同时，能够中和碱性土壤，从而进一步促进土壤中农作物的生长，提高农作物的产量。